CONSERVATION, ENTRETIEN, MODE D'UTILISATION

Nous avons constitué un stock en gélose profonde, conservé à la glacière, à partir duquel nous partions chaque mois pour faire nos repiquages. Nous avons rapidement abandonné le mode d’entretien en milieu liquide, et en particulier en milieu synthétique, à cause des mutations que subissent les souches, surtout quant à leurs réactions envers les phages. Nous nous sommes arrêté à la technique d'entretien suivante :

A partir du stock conservé à la glacière, nous effectuons un repiquage sur gélose inclinée, à partir duquel nous partons pour faire nos repiquages journaliers sur gélose inclinée. Nous avons eu besoin, dans notre travail, d’utiliser les germes en milieu liquide et à des taux connus. Nous avons fait, pour cela, des suspensions en eau physiologique que nous avons étalonnées au photomètre, à 200 millions et 400 millions de germes par em’. Ces étalons ont été conservés en présence d’une goutte de formol par em’, et en tubes scellés; nous les avons renouvelés tous les mois.

Les suspensions utilisées pour nos expériences ont été faites comparativement aux étalons en eau physiologique, et à partir des cultures sur gélose inclinée ayant dix-huit heures d’étuve à 37°. Pour effectuer des dilutions, nous avons utilisé l’eau physiologique ou l’eau peptonée (10 em‘ par tube) et la pipette calibrée à XXX gouttes par cm°. L’exactitude des différentes dilutions employées a été vérifiée plusieurs fois par étalement d’un volume connu sur boîte de PÉTRI et numération des colonies.