B. — MUSCULATURE DORSALE ANTÉRIEURE DE SANGSUE
1° Technique :
Le procédé d'isolement du muscle antérieur de sangsue est maintenant devenu très classique. Notre Maître DasTuGuE (G.) et ses élèves nous en donnent une description détaillée que nous allons résumer : la sangsue est fixée par sa face dorsale sur une plaquette de liège. On pratique deux incisions longitudinales partant des commissures labiales de l’animal. On sépare ainsi la partie ventrale de la partie dorsale. On élimine la partie ventrale aimsi que les viscères et la chaîne nerveuse de la partie dorsale. La tête de l’animal est sectionnée et rejetée : on est alors assuré de la disparition des ganglions cérébroïdes. Le muscle ainsi isolé est plongé dans la euve contenant 20 em3 de solution de Ringer pour grenouille préparée selon la formule indiquée par WACHOLDER (193: 3) :
CI Na : 7,27 £.
CI K : 0,154 g.
CI2 Ca : 0,156 g.
PO+ H2 Na : 1,81 CO3 Na2 : q.s. pour obtenir un pH de 7.1.
La solution physiologique est traversée par un courant d'oxygène arrivant bulle à bulle. L° one assure à la préparation une sensi-
bilité satisfaisante et aère le milieu. On laisse détendre le musele sous l'influence d’un certain poids (4 grammes environ) pendant 1 h. 30 à 2 h. Après ce délai, nous sommes dans de bonnes conditions pour expérimenter.
On enregistre les contractions musculaires au moyen d’un levier amplificateur (amplification du bras de levier : 5,5), sur un cylindre à mouvement uniforme et lent (un.tour complet en 4 heures).
20 Conduite des essais :
a) Préparation énervée non ésérinée : La préparation est étalonnée avec une solution de chlorure d’acétylcholine 1/200.000 qui agit pendant 3 minutes. Après trois lavages successifs d’une durée de 1 minute et après retour du muscle au tonus initial, on ajoute la substance étudiée qui agira 6 minutes. On essaie ensuite l’acétylcholine à 1/200.000. Enfin après trois autres lavages identiques aux précédents, on procède à un dernier étalonnage avec le chlorure d’acétylcholine à 1 /200.000.
b) Préparation énervée et ésérinée : Nous considérerons deux cas, suivant que la substance étudiée est ajoutée après ou avant l’ésérine :
Addition après Esérine :
On ajoute au liquide physiologique baignant le muscle le sulfate d’ésérine à la dilution de 1/500.000.
Après 3 minutes de contact on fait agir la substance à étudier que l’on laisse en contact avec l’organe pendant 6 minutes. On ajoute alors l’acétylcholine à la dilution de 1 /40.000.000.
Les étalonnages sont pratiqués de la façon suivante : 9 minutes exactement après addition de sulfate d’ésérine à 1/500.000, on fait agir l’acétylcholine à la dose de 1 /40.000.000.
Addition avant Esérine :
L'ésérine est ajoutée à la dose de 1/500.000, 3 minutes exactement après addition de la substance à étudier. L’acétylcholine à la dose de 17/40.000.000 est, elle-même, ajoutée 3 minutes après l’ésérine,
de sorte que dans les trois cas l’acétylcholine agit toujours 6 minutes après la substance étudiée.
Les étalonnages sont pratiqués en ajoutant l’acétylcholine trois minutes après l’ésérine.
Nous considérons comme dose favorisante, la concentration Minima permettant de doubler la hauteur de contraction du témoin :
et comme dose antagoniste la plus petite dilution permettant de ‘ réduire de moitié la hauteur de contraction du témoin.
