ACTIVITÉ DES LEUCOCYTES DU SANG
effilée de la pipette qui prend l'aspect conforme au schéma ci-contre. La partie inférieure de ce culot est uniquement formée de globules rouges. A la partie supérieure se rassemblent les globules blancs en une pellicule mince et très mobile.
On décante donc à la pipette avec beaucoup de précaution de façon à ne pas agiter cette partie fragile du culot.
On laisse au-dessus environ un tiers de cen-
limètre de liquide.
Alors d’un trait léger de scie à verre, on détache la partie inférieure du culot, puis par l’orifice supérieur, on souffle le restant sur une lame.
On mélange un peu sur la lame, puis on étale comme une préparation ordinaire de sang (‘.
Les leucocytes viennent tous dans la partie terminale à bords frangés de l’étalement. C'est là
qu'il faudra les numérer. On colore à l’hématéine-éosine après coloration des levures par la
méthode de Gram, au bleu polychrome Unna en différenciant par l’alcool absolu, au Giemsa dilué, au
4. N. B. — Nous employons depuis quelque temps avec succès la technique suivante qui donne des préparations où la répartition des leucocytes est plus régulière et partant la lecture plus facile.
On aspire dans une pipette tout le culot globules rouges et blancs, on mélange sur la lame, on étale avec l'extrémité de la pipette comme pour un culot quelconque de l'exsudat.
On obtient ainsi une préparation épaisse que l’on fixe une à deux secondes par l’acide chromique à 1 p. 100. On lave alors dans l'eau addilionnée d'un peu d'acide acétique. Les globules rouges sont dissous, les blancs restent fixés ainsi que les levures.
Leishmann. Toutes ces colorations donnent des préparations faciles à lire.
On compte alors d'une part 100 polynucléaires, de l'autre les levures qu'ils ont englobées. Dans certaines : préparations où les polynucléaires sont rares, par suite d'une centrifugation mal faite ou d’un décantage malheureux, on pourra se contenter de »o polynucléaires. Mais ceci constitue un minimum. Au-dessous, on court le risque d’avoir un résultat erroné.
Le rapport:
Levures incluses
= — donne l’activité brute variable avec l’émulsion, Polynucléaires
le temps, etc.
Le rapport :
Activité des globules de la malade
RE —— — donne l'activité rela- Activité des globules normaux témoins
tive, seul chiffre intéressant.
Supposons pour fixer les idées que 100 leucocytes d'une malade aient englobé 120 levures. On aura:
Levures 190
———— — — 1,9 etivi ñ Ü Polynucléaires — 100 1,20 activité brute.
Si, dans les mêmes conditions, 100 leucocytes normaux ont englobé 8o levures, on aura:
Levures 80
Polynucléaires — 100 — 0,80 activité normale.
EL pour l’activité proprement dite :
Activité des leucocytes de la malade 4,20 15 Activité des leucocytes normaux 0,80 ?
C'est un calcul analogue à celui dont on se sert pour calculer le pouvoir opsonisant du sérum.
On peut se demander pourquoi nous ne faisons por-ter notre calcul que sur les polynucléaires et non sur la totalité des leucocytes. C’est que l’activité des divers types de leucocytes varie dans de très fortes proporlions, comme nous le verrons plus loin.
Or les mononucléaires ne se trouvent plus dès lors sur la préparation dans la proportion réelle de la formule leucocytaire.
Il s'ensuit que l’on peut trouver sur une. préparalion 60 p.100 de lymphocytes d'activité sensiblement nulle alors qu’une lame provenant du même sang n'en renfermera que 20 p. 100. On serait ainsi conduit à calculer la réussite de la centrifugation plutôt que l’activité réelle des leucocytes.
Il faut donc s’en tenir aux seuls polynucléaires principaux agents de la phagocytose.
2° Activité des cellules d’exsudat.
On peut déterminer par le même procédé l’activité phagocytaire d’autres cellules que les leucocytes du sang. Nous avons été conduit ainsi à rechercher l’activité des leucocytes d’exsudat :
Dans les pleurésies ;
Les ascites ;
Les méningites ;
Les arthrites ;
Le pus.
La recherche se fait toujours en deux tubes. Nous n'insisterons pas sur le tube témoin dont la teneur est identique à celle de la pipette témoin dans la recherche de l’activité leucocytaire sanguine, à savoir:
Sérumnormalouascite MEME
, Ne SAC l àà 10 gouttes Sérum artificiel citraté. \
Émulsion de levures RER 1 goutte Sang-normal {(tÉMOIN) 1 goutte fine
Pour le tube contenant les cellules d’exsudat, la technique est analogue mais non identique.
En effet :
1° L'absence de globules rouges rendant inutile l'emploi de pipettes spéciales, on se servira d’un tube à centrifuger ordinaire.
2° Il est nécessaire de préparer une émulsion convenable de cellules d’exsudat. Pour cela, le mieux est de recevoir l’exsudat dans un tube contenant du sérum artificiel citraté, lequel évite la coagulation. Cette précaution est inutile pour les liquides ne coagulant pas, tel que le liquide céphalo-rachidien. ‘
On centrifuge, on décante et l’on dilue le culot, en s'aidant au besoin de l’hématimètre de facon à avoir une émulsion dont la teneur en cellules actives soit comparable à celle du sang en leucocytes. Parmi les cellules actives, 1l faut ranger les leucocytes polynucléaires, les grands mononucléaires, les cellules endothéliales et les macrophages que l’on trouve dans certains épanchements sanglants. Les lymphocytes doivent, malgré quelques rares exceptions, être tenus pour inactifs.
