TROISIÈME SÉRIE D'EXPÉRIENCES

MODIFICATIONS APPORTÉES AUX BACILLES PROTÉES INFLUENCE DE CES MODIFICATIONS SUR LA RÉACTION DE WEIL ET FELIX DU COBAYE

1° Une forte concentration en CI Na gène la réaction de Weil et Felix

Nous avons préparé plusieurs solutions de CI Na à des concentrations différentes. Les agglutinations ont été effectuées avec ces solutions salines, en présence de sérums humains agglutinant fortement le X 19 et en présence de sérums de cobayes tvphiques. Le sérum humain agglutinait normalement le X 19 à 1/2.000.

RÉSULTATS DES AGGLUTINATIONS

TAUX TAUX CONCENTRATION EN CI Na À a Re te) humain de cobaye SOON CT DA LITE. er mt dei: + 100 () pes a nf 8 Se MER ODA TE + 500 0 COPA bES ee ca ere: + 800: 0 PPD EN DIT AMIE ere PVau es cms + 800 (0 MS MU OST PE Ir + 1.000 0 ROC ADOMIUC PAPE EC EEE TT EC + 2.000 0 MD MDO A LIELE re a ler + 2.000 0

2° Le proteus X 19 est rapidement agglutiné à + 50°, mais en fin de réaction, le résultat est le même qu'après 2 heures d’étuve et un séjour de 24 heures à la température du laboratoire

Avec le même sérum humain, agglutinant le proteus X 19 à 2.000, nous avons effectué plusieurs agglutinations à des températures différentes : + 15°, + 37°, + 50°, + 65°. Les lectures ont été faites après { heure, 3 heures, 9 heures, 24 heures.

RÉSULTATS LECTURE APRÈS : Î HEURE 3 HEURES | 9 HEURES | 24 HEURES Agglutination à + 15°.. 0 + 500 + 1.000 + 2.000 Agglutination à + 37°. + 100 + 1.000 + 1.000 + 2.000 Agglutination à + 50°.. + 200 + 1.000 + 1.000 + 2.000 Agglutination à + 65°.. + 200 + 1.000 + 1.000 + 1.000

La température de + 50°, semblant accélérer le phénomène de l'agglutination, nous avons placé à cette température des mélanges de suspension fraîche de proteus X 19 et de sérums de cobaves typhiques. Nous n'avons constaté aucune agglutination.

3° Le sérum de cobaye typhique ne précipite pas par un lysat de proteus X 19

Une émulsion en eau distillée d'une culture sur gélose inclinée, âgée de 24 heures, est abandonnée à la glacière et agitée tous les jours. Après un mois, on la centrifuge fortement; le liquide clair surnageant est décanté et additionné d'une quantité de CI Na nécessaire pour amener la concentration en ce sel à 7 gr. par litre,

re

On effectue l’agglutination avec le même protocole, le Iysat remplaçant l'émulsion microbienne,

Nous n'avons constaté aucune précipitation avec les sérums de cobayes lyphiques. Avec les sérums humains et les sérums d'animaux expérimentalement infectés de typhus, nous avons vu une très faible opalescence qui ne se rencontrait pas avec les sérums normaux.

4° Les cultures chauffées de proteus X 19 ne sont pas plus sensibles à l’agglutination que les cultures fraîches

Sachs [51] a constaté, comme l'avait fait Dietrich, que le X 19 chauffé à + 56° n'était plus agelutinable. En étudiant l'effet du chauffage sur l’agglutinabilité du proteus X 19, il a vu que, si l’on dépassait cette température de 56°, les microbes redevenaient agglutinables et conservaient cette propriété alors qu'ils avaient été chauffés à + 100°.

L'optimum est, d’après cet auteur, à 80°; chauffés à cette température, écrit-il, les microbes s’agglutinent souvent beaucoup mieux que les microbes vivants; non seulement le taux d’agglutination est supérieur, mais les amas sont beaucoup plus gros; par contre, l’agglutination des bacilles chauffés est notablement plus lente que celle des bacilles vivants: au lieu de 60 minutes, ces derniers demandent 2 à 3 heures.

Schiff [53] confirmant ces expériences, nous avons effectué toute une série d’agglutinations avec une suspension de proteus X 19 chauffée 4 heure à 80° et des sérums de cobayes, expérimentalement infectés de tvphus mondial et murin. Nous n'avons constaté aucune agglutination dans tous les cas.

5° Le proteus X 19 « fragilisé » par la méthode de Porgès ne se montre pas agglutinable par le sérum de cobayes typhiques

Nous avons cherché à rendre le proteus X 19 plus sensible à l’agglutination afin de pouvoir déceler, dans le sérum des cobayes typhi-

ques, des traces d'anticorps, insuffisants pour agglutiner les bacilles normaux. Dans ce but, nous avons essayé de « fragiliser » le proteus par la méthode de Porgès, en nous inspirant des travaux de Maurice Nicolle [41] et de ses collaborateurs, sur le gonocoque.

MÉTHODE DE PORGÈS.

Dans un tube à essai stérile, on emultionne 0,1 gr. de microbes secs dans 20 €.c. d'eau physiologique, que l'on additionne de 0,1 c.c. de solution normale d'acide sulfurique. Le tube est placé 5 minutes au bain marie houillant; on refroidit sous un courant d'eau froide et on neutralise au moyen de 0,1 c.c. de soude normale [50].

Maurice Nicolle, en employant une suspension de gonocoques ainsi traitée, a obtenu des agglutinations de l'ordre du 1/100 avec des sérums de blennorragiques dont le pouvoir agglutinant était nul, vis-àvis d'une suspension de gonocoques non traités.

Nous avons effectué des réactions d'agglutination avec des sérums de cobayes tvphiques et une suspension de profeus X 19, traitée par la méthode de Porgès. Même à la dilution de 1/5, nous n'avons constalé aucune agglutination.

6° Le sérum des cobayes typhiques est sans action sur le proteus traité par les alcalis

1. — Une suspension à # milliards de proteus par c.e. est additionnée d'ammoniaque à raison de { €.e. d'ammoniaque pour 10 €.c. de suspension bactérienne.

Après quelques minutes, le milieu s'éclaireit: la richesse microbienne tombe à 1 milliard environ; le liquide devient sirupeux, mais reste homogène.

A l'examen direct et après coloration, les éléments microbiens sont beaucoup plus petits, plus grèles, et retiennent moins bien les colorants d'aniline.

L'agelutination est effectuée avec cetle suspension et des sérums divers,

RÉSULTATS

oo

: = AVEC AGGLUTINATION AVEC : os SLR LA SUSPENSION alcaline Sérum humain agglutinant le X 19 à..... + 6.400 Le SÉLUME TE HADNRACPOD E ee ceeenrces + 100 0 SCLRUMAAeRCODAYÉMOLMAlERE EE eee 0 0 Sérum de cobaye Toulon C 284 (5° jour de LÉ VRO) ER NN nn else SÉBUTABUMAINAMNONNAl ERA CCC.

Sérum de cobaye Toulon (20° jour d'ino- CU TION) re een en ce den ne 0 0 Sérum de cobaye Tunis L88 (6° jour de LENS NO) DIR PO EE ERP 0 Sérumde lapin C298 anti .xX 419". + 2.000 +

Le phénomène de l'agglutination apparait non pas sous forme de grumeaux, mais sous forme de filaments qui se déposent au fond des

tubes.

que; le milieu se trouble, S'opacilie, quelques filaments montent à la surface du liquide; on filtre sur gaze et l'agglutination est effectuée avec les mêmes sérums que plus haut.

Le sérum de convalescent agglutine fortement, ainsi que celui du lapin C. 298; avec tous les autres sérums, on obtient un résultat

2. — La même suspension est neutralisée au moven d'acide acéti-

négatif.

7° Une suspension de proteus X 19, mise en contact avec une solution de tanin, reste inagglutinable

Une suspension de X 19 est additionnée d'une solution de tanin à 5 % à raison de { volume de la solution tannique pour 9 parties de l’'émulsion microbienne : il se forme un précipité brun qui tombe au fond du tube; après 24 heures de contact, on filtre sur gaze et on