V. aquatilis, M. candidus

B. ochraceus. Négative.| Néant. | Néant. Pure. B. fluorescens non liquef.

14 sept. B.-F. rue 650 1912. Fe Capucins. |(15e jour)

B. subtilis.

Désaturateur | 8 (16e j.) M. aurantiacus.

Se Streptococcus albus.

Eau brute à 200 Sarcina aurantiaca. Naaie Nes NUE ne

l’arrivée. |(16° jour)|M. albus, B. stoloniferus.

B. fluorescens non liquef.

B. albus liquefaciens.

M. aurantiacus. Négative.| Néant. | Néant. Pure. M. candicans.

3 Oct. | B.-F. place 780 4912. ) Saint-Pierre. |(16° jour)

LIEU Nombre de ; Recherche

Réservoir de 890 B. aquatilis sulcatus.

départ de (156 ou M. candidus, M. luteus. [Négative. . | Néant. 7 Oct Château -Bily. 1 B. subtilis.

Réservoir d’eau 1690 M. albus, V. aquatilis.

filtré i ci NE : ; iltrée de (16° jour) Cladothrix chromogenes.|Négative.| Néant. Néant.

Château-Bily. M. aurant , B. mycoïdes.

M. luteus, B. aerophilus.

| is 9 (15e) a , SEE L se 1? B. mesentericus vulgatus. .| Néant. | Néant. Château-Bily. [Sporul.:# B. megatherium.

B. albus liquefaciens.

Sarcina rosea. Négative.| Néant.

M. flavus desidens.

M. aurantiacus.

Eau brute à 1730 l’arrivée. |(15e jour)

23 Oct.

26 Oct

B.-F. Place

Saint-Pierre. 8

5 Nov. | B.-F. rue des Srer Négative.

1912. Capucins.

8 Nov. Robinet rue

aa Négative.

1912. de Quintin. .

C) Analyses personnelles.

Voici la méthode que j'ai suivie pour effectuer toutes mes analyses, méthode préconisée par le Comité consultatif d'hygiène publique de France.

1°) NUMÉRATION DES GERMES. — La gélatine nutritive neutre que j'ai utilisée est préparée en faisant dissoudre au bain-marie, dans 500 ou 600 centimètres cubes d’eau filtrée, parfois de bouillon, ce qui est mieux, 140 à 150 grammes de gélatine blanche de première qualité ; on ajoute 10 grammes de sel marin, 10 grammes de sucre, 3grammesde glycérine.

À part, et à l’ébullition, on fait dissoudre 2 à 4 grammes d’agar-agar, dans 200 grammes d’eau.

On mélange le tout dans un ballon et on y ajoute 15 grammes de peptone préalablement délayée dans un peu d’eau ; on complète à 1 litre et on neutralise avec une solution de carbonate de soude.

Après clarification et filtration, on répartit la gélatine nutritive par doses de 10 centimètres cubes dans des tubes à essais, fermés par un tampon de coton et stérilisés au four à flamber (deux heures à 150 degrés).

On stérilise ces tubes à l’autoclave à 120 degrés pendant 20 minutes et on conserve pour l’usage.

Pour faire la numération des germes, le matériel qui est nécessaire se compose :

De cristallisoirs en verre, d’un diamètre de 15 centimètres, appelés boîtes de Pétri ;

De pipettes en verre jaugées ou graduées.

Ce matériel doit être soigneusement stérilisé dans un four Pasteur, pendant deux heures, à 150 degrés.

On fait fondre au bain-marie, à environ 37 degrés, la gélatine contenue dans les tubes à essais, puis on ensemence dans ces tubes, à l’aide des pipettes stérilisées, la quantité d’eau que l’on veut examiner. On tourne les tubes entre les doigts, en les tenant fortement inclinés, puis on les coule dans les boîtes de culture, en ayant soin d'étendre la gélatine sur toute la surface de la boîte.

On laisse refroidir et on porte les boîtes à l’étuve à 20 degrés. Au bout d’une quinzaine de jours, ou plus, on compte les colonies formées dans ou sur la couche de gélatine.

2°) RECHERCHE SPÉCIALE DU B. coLt ET pu B. TYPHi- QUE. — La recherche spéciale du B. coli et du bacille typhique se fait de la façon suivante :

Dans de petits matras, contenant 10 centimètres cubes de bouillon stérilisé, on ajoute 40 centimètres cubes d’eau à examiner et une quantité d’acide phénique en solution aqueuse à 5 0/0, nécessaire pour que les bouillons soient phéniqués au millième.

On porte à l’étuve réglée à 42 degrés.

Après 48 heures, on ensemence, à l’aide des bouillons phéniqués, des fioles contenant 15 centimètres cubes de peptone à 2/100.

Ces fioles sont mises à l’étuve à 36 degrés pendant 8 jours et servent à la recherche de l’indol.

Si cette recherche donne un résultat positif, on en conclut la présence du B. coli dans l’eau traitée.

Si le résultat est négatif, il n'ya pas de B. coli. Voici comment on opère :

Dans un tube à essais on introduit environ 9 centimètres cubes de culture ; on ajoute 3 gouttes d’une solution aqueuse à 2 pour 1.000 de nitrite de soude. On fait tomber ensuite 8 à 4 gouttes d’acide sulfurique pur. On porte à l’ébullition que l’on maintient quelques secondes.

S'il se produit une coloration rouge, on doit considérer la recherche du B. coli comme positive.

S'il n’y a pas de coloration, c’est qu'il n’y a pas d’indol et, par conséquent, pas de B. coli.

On ensemence ensuite, à l’aide des bouillons phéniqués, des tubes contenant 10 centimètres cubes de gélose lactosée et tournesolée (gélose de Wurtz).

Le B. coli a la propriété de faire fermenter la lactose, ce qui provoque le décollement de la gélose dans le tube et fait rougir la teinture de tournesol.

On complète la recherche du coli bacille et du bacille d’'Eberth dans une série de milieux, tels que :

Lait ;

Milieu d’'Elsner ;

Strie sur pommes de terre ;

Peptone sur laquelle on fait de suite l’épreuve du séro-diagnostic.

>RÉLÉVE- MENT

DATE

91 juin 1912

27 juin 1912

{er juillet 1912

8 octobre 1912

Borne-fontaine| 350 B. albus liquefaciens. A BE à ja : ' éant. nt. ant. :

PI. du Théâtre.| 12e jour M. aurantiacus. % , PS M. luteus.

Bac. megatherium.

Borne-fontaine| 220 Bac. albus. Nr We Néant P : : éant. | Néant. éant. ure.

Bd Charner. | 15e jour M. candidus.

Sarcina lutea.

. 10 B. mesentericus ruber.

Sortie du ! : : ’ 1 e 15e jour B. mycoïdes. Néant. Néant. Néant. |Exct pure désaturateur. 4 sporul.: 6 M. candicans.

Bac. aerophilus.

Bac. flavus.

B.-F. rue du 450 : 5 . ’ NY B. mesentericus vulgatus.| Néant. Néant. Néant. Pure. Port. 15e jour :

Bac. luteus.

M. aurantiacus.

Vibrio aquatilis.

Bacillus stolonatus.

Eau filtrée dans! 41.200 B. mycoïdes. , ; J ; É : J Néant. | Néant. Néant. |Ass. pure le bassin. 15e jour B. luteus.

Cladothrix chromogenes.

M. aurantiacus.

B. mycoïdes.

Eau à la 42 B. aerophilus.

sortie du 15e jour B. luteus. Néant. | Néant. Néant. |Très pure désaturateur. |sporul.: 7 B. mesentericus vulgatus. M. aurantiacus.

B. albus non liquefaciens.

Eau à la 9 B. subtilis.

Borne-fontaine Place de la Mairie.

15e jour

M. candidus.

B. subtilis.

B. albus.

B. megatherium.

M. flavus desidens.

M. candicans.

Néant.

Pure.

DATE

Ath LIEU Nombre de Recherche Paclirios | Dario qe du germes | ESPÈCES DÉTERMINÉES du : Conclusio: PRÉLÈVE- SE à ., Ipathogène‘| putrides PRÉLÉVEMENT | par cms coli-bacille