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NEUROTOXINES DES VENINS 589
NEUROTOXINES DES VENINS
Les recherches de tous les auteurs qui se sont occupés du venin des Serpents ont établi que parmi les diverses substances actives dont ces venins sont composés, il en est une qui agit spécialement sur le système nerveux, déterminant les symptômes que nous avons précédemment expo: sés, et qui peuvent à eux seuls entraîner la mort.
Le venin des Colubridés, et particulièrement celui des Hydrophiinés, se montre le plus riche en neurotoxine, tandis que celui des Vipéridés et de quelques Elapinés en contient moins, mais par contre est très riche en ferment coagulant et en hémorrhagine.
BRuNTON et FayrErR pensent que la cause directe de la mort par le venin des Serpents, qu'elle qu'en soit l'espèce, résulte de son action sur le tissu nerveux, et que les neurotoxines se rencontrent en assez grande quantité dans les venins de Daboiïa, de Crotale, de Pseudechis et de Notechis. Werr-MircneLzz, qui établit la nature complexe du venin de Crotale, pense que ce venin contient au moins deux substances toxiques, l’une résistant à la chaleur et agissant principalement sur le système nerveux, l’autre qui se détruit par le chauffage à 8o°, et qui détermine les lésions locales. A. J. Wazz attribue les cas de mort rapide par le venin de Daboia à un principe neurotoxique agissant électivement sur les centres et déterminant ainsi les convulsions qu'on observe en pareil cas ; mais LamB a précisément montré que ces cas relèvent d’une autre mécanisme, la thrombose, et C. J. Martin a fait des constatations analogues avec le venin de Pseudechis porphyriacus ; toutefois l’auteur montre que ce venin contient en même temps une proportion assez forte de neurotoxine.
C. Prisarix à établi que le venin de Vipère aspic contient au moins trois substances actives, indépendantes les unes des autres, et séparables par des moyens purent physiques : l’échidnase à laquelle est due l’action locale, l’échidno-toxine ou neurotoxine qui agit spécialement sur le système nerveux, et l’échidno-vaccin, substance non toxique, mais douée de propriétés vaccinantes. L’échidno-toxine est détruite ‘par un chauffage à 7° prolongé pendant 15 minutes, ou à 8o° pendant 5 minutes.
CazLMETTE trouve que le venin de Naja tripudians entraîne la mort en attaquant d’abord les novaux des nerfs accessoires hypoglosses, et alors les origines du pneumogastrique dans le bulbe ; les symptômes observés sont ceux d’une paralysie bulbaire. Il détruit par la chaleur la substance à action locale et sépare les protéides coagulables du venin. La neurotoxine reste presque inaltérée dans le liquide clair, tandis que les principes phlogogènes, devenus inertes, sont séparés des protéides coagulés.
Propriétés générales des neurotoxines
KanTHAcKk, A. J. Wazz, FRASER, WoLFENDEN, C. J. MARTIN, C. Pur:- SALIx, LamB, FLexNER, Nocucnr et Noc, et tous ceux qui se sont occupés
des venins, ont confirmé la résistance plus ou moins marquée de la neurotoxine aux agents d'atténuation, et principalement à la chaleur, et à l’ac tion de l'alcool.
D'après Weir-Mrrcuezr, et ReicnertT, KaANTHaCk. C. J Marin, les neurotoxines des venins sont de nature protéique et appartiennent à la classe des albumoses et des peptones. Elles ne précipitent ni par la dialyse, ni par une ébullition rapide ; elles passent au filtre de porcelaine gélatiné sous la pression de 50 atmosphères, d'après C. JF Marrin. L'action neurotoxique est détruite par une ébullition prolongée ; mais la réaction protéique persiste, ce qui indique clairement que les albumoses des venins ne sont pas identiques à celles qui proviennent de la digestion des protéines ; elles en différent par l'existence de certains radicaux capables d'attaquer les tissus nerveux, et par leur moindre résistance aux températures élevées. La toxicité de l’albumose des venins peut déjà être perdue à la température de 75°, maintenue pendant un quart d'heure (venin de Vipère aspic, d’après C. Pmsazix), ou résister à la température d’ébullition pendant un temps très court ; le venin des Colubridés a généralement sous ce rapport une résistance plus grande que celui des Vipéridés ; toutefois, d’après BEAUIEAN, le venin de Bitis arietans résisterait à la température de 100°, maintenue pendant 30 minutes. Les solutions concentrées résistent mieux que les solutions très diluées. Le venin sec résiste aux températures extrêmes de + 13° et de —— 191°. Les rayons solaires, qui atténuent les solutions de neurotoxine, ne modifient pas le venin sec.
En présence des substances fluorescentes, les solutions de neurotoxine perdent graduellement leur activité quand elles sont exposées à la lumière solaire. Les courants de haute fréquence, lémanation du radium et la filtration sur porcelaine, réduisent l’activité des neurotoxines du venin de la Vipère aspic (C. Paisarix).
Rappelons brièvement que les substances qui agissent sur la toxicité des venins, le chlore, le brome, l’iode (à l’état de trichlorure), le permanganate de potasse, les hypochlorites alcalins, le chlorure d’or, détruisent la neurotoxine ; le nitrale d'argent, le bichlorure de mercure, le chlorure de fer, le sulfate de cuivre, les acides tannique et picrique, précipitent les principes neurotoxiques comme ils précipitent les protéines, mais ne peuvent empêcher l’action d'une dose mortelle de venin.
Dans les réactions dues aux agents modificateurs des venins, il est assez difficile de séparer les hémolysines des neurotoxines, de sorte qu'il en est résulté parfois quelque indécision dans l'appréciation de leur importance relative en ce qui concerne le mécanisme de la mort. Toutefois les analyses biologiques délicates ont permis de déduire que rarement les hémolysines à elles seules pourraient entraîner la mort. Nocuonr fait remarquer avec raison, que certains animaux tels que le bœuf, la chèvre, le mouton, qui sont complètement résistants à l’action hémolytique, sont très sensibles aux effets neurotoxiques. Même dans les cas où les animaux
NEUROTOXINES DES VENINS 591
sont sensibles aux hémolysines, la mort peut survenir avec une quantité de venin à peine suffisante pour dissoudre une quantité insignifiante de sang. De plus, quand le venin est porté directement sur les centres nerveux et qu'il y produit les symptômes connus, l'hémolyse est exclue en tant que gravité des symptômes, car elle est presque nulle. D'après L. Rocers, les Hydrophiinés (Enhydrina et Distira), ont un venin qui contient une neurotoxine plus active que celle même du venin de Cobra, et cependant l’hémolysine contenue dans la dose minima mortelle suffirait à peine à détruire la 1/200 partie de la masse totale du sang de l'animal qui l’a reçue.
En ce qui concerne le venin de Crotale, FLexxer et Noëucur ont pu en isoler la neurotoxine en faisant d’abord séjourner le venin à la température de zéro pendant 50 minutes sur des globules lavés de cobaye, qui en retiennent les sensibilisatrices, puis chauffant ensuite à 35° pendant so minutes le liquide séparé par centrifugation, pour en détruire l'hémorrhagine.
Recherches physico-chimiques ayant pour but de séparer les Hémolysines, les Neurotoxines et les Hémorragines des venins
FLEexNER et NoGucur ont montré que les hémolysines résistent moins bien à la digestion peptique que les neurotoxines. Mais les premières recherches d’une certaine étendue furent faites par P. Kxes : En agitant une solution aqueuse de venin avec une solution de lécithine dans le chloroforme, il obtint un corps nouveau, le venin-lécithide, exclusivement hémolyiique, mais pas du tout toxique. Après centrifugation du mélange, le précipité de venin-lécithide étant séparé du liquide surnageant, KYes constala que ce liquide possédait toute la toxicité de la solution venimeuse. Il avait ainsi réussi à séparer les deux substances, jusque-là inséparables.
Von DunGErn et Coca préparèrent le lécithide par le même procédé, et confirmèrent les résultats de Kyes ; toutefois, dans l’une de leurs expériences, la solution venimeuse contenait encore une certaine quantité d'hémolysine, tandis que dans d’autres, l'hémolysine était complètement précipitée.
MorGEexroTH, modifiant un peu la méthode de Kyes, substitue l'alcool méthylique au chloroforme dans la dissolution de la lécithine.
Le venin-lécithide ainsi obtenu n'élait pas seulement hémolytique, mais aussi un peu neurotoxique. Cette différence apparente est due, d'après Kyes, à l’adhérence des principes neurotoxiques au précipité obtenu de celte manière, les alcools faibles contenant assez d’eau pour tenir en solution un peu de neurotoxine, et au moment de la précipitation du lécithide par l’éther, la neurotoxine étant entraînée mécaniquement.
En. Fausr, enfin, en traitant le venin de Cobra par des moyens purement chimiques, en isole une substance active qu'il appelle ophiolorine. Il obtient cette substance de la portion non coagulable et non dialysable
du venin de Cobra, qu'iltraite avec 10 pour 100 d'acide métaphospho rique, lequel précipite toutes les substances donnant la réaction du biuret. Le filtrat contient seulement les substances protéiques libres et actives du venin, que l’on précipite par l’alcool.
C'est une poudre jaunâtre, amorphe, soluble dans l’eau et qui mousse par agitation. Cette ophiotoxine est légèrement acide, non dialysable, et Fausr lui attribue la composition brute CIH#O, en la rattachant au même groupe que les sapotoxines ou toxines du venin de crapaud. Son activité est 3 fois plus grande que celle du venin naturel ; mais les soluions s’atténuent facilement ; elles deviennent tout à fait inactives quand on leur ajoute de l'hydrate de soude. Bien qu'on en maintienne l'acidité par addition d'acide métaphosphorique, la solution devient plus ou moins complètement inactive par l’évaporation. L'ophiotoxine est beaucoup moins résistante à la chaleur que le venin de cobra, car elle s’atténue déjà vers la température de 40°, La dose de o milligr. 0,85 à 1 milligr. par kilog de lapin ne détermine d’abord aucun symptôme dans les 15 à 20 premières minutes, puis on voit la respiration diminuer et l'animal s'affaiblir ; la paralysie apparaît d’abord dans la région postérieure du corps, et s'étend graduellement à l'avant. Il survient de la dyspnée, la paralysie devient plus complète et la respiration s'arrête au bout de 45 à 60 minutes ; le cœur continue quelquefois à battre. Les symptômes sont les mêmes après injection intraveineuse : chez le chien, toutefois, la paralysie est plus prononcée, et la mort survient en moins d’une heure aux doses de o milligr. 1 à o milligr. 15 par kilog d'animal inoculé. Chez la grenouille, la dose de o milligr. 03 introduite dans la veine abdominale, paralyse le sujet en 10 minutes ; mais la mort n'arrive qu'en 12 à 16 heures Il se produit, outre la paralysie centrale, une paralysie périphérique. L’excitabilité électrique des muscles est néanmoins conservée.
Par la voie sous-cutanée, l’ophiotoxine est 30 à 4o fois moins toxique que par la voie intraveineuse. Per os, elle ne détermine que des symptômes bénins : salivation, nausées, vomissements et diarrhée chez le chien ; diarrhée légère seulement chez le lapin.
L'ophiotoxine n'est que modérément hémolytique, et il est à remarquer qu'elle attaque directement les hématies, alors que le venin en nature a besoin de sérum ou de lécithine pour hémolyser les globules de bœuf, de chèvre ou de mouton.
Fausr pense que l’ophiotoxine existe à l’état d'éther composé d’albumose ou de peptone, dans le venin, et que sous cette forme, elle est plus stable et plus facilement absorbée par les tissus. L'auteur n’a pas essayé sur elle l’action du sérum antivenimeux.
Opérant sur le venin de Lachesis flavoviridis, IsmizAKkA tenta par une autre méthode de séparer de l'hémorrhagine la neurotoxine et l’hémolysine. À cet effet, il agite la solution de venin avec du chloroforme pendant une dizaine de minutes et sépare le précipité par centrifugation. Le liquide surnageant est de nouveau traité par le chloroforme et séparé du
AU
