CHLORURES

— puis -j-

(1) — signifie diminution.

+ do augmentation, = do quantité normale.

do disparition.

d. Recherche deï albumine. — L'albumine est coagulée par Tacide nitrique et par la chaleur. Quel que soit le réactif qu'on emploie, on constatera toujours au préalable l'état d'acidiléou d'alcalinité de l'urine à l'aide d'un papier de tournesol. Si l'urine est acide, on procédera à l'épreuve sans crainle^ d'erreurs; si au contraire elle est neutre ou alcaline, on acidulera légèrement jusqu'à réaction sur le papier de tournesol bleu. On a conseillé dans le but de dispenser de cette épreuve préalable par le papier de tournesol, d'aciduler indistinctement toutes les urines par une goutte d'acide nitrique portée à l'aide d'une baguette de verre. Cette méthode est mauvaise : en effet, si Turine est neutre, il est vrai que la goutte d'acide donnera le degré d'acidité nécessaire ; mais si l'urine est fortement alcaline, cette goutte d'acide ne suffira souvent même pas à la neutraliser ; et enfin si l'urine est déjà acide, Bence-Jones a montré que l'addition d'une goutte d'acide nitrique empêche la précipitation de l'albumine par la chaleur. L'essai de l'urine par le papier de tournesol sera donc toujours pratiqué; nous en signalerons riraportance à propos de l'épreuve par la chaleur.

A. Recherche de V albumine par Vadde nitrique ordinaire. — L'urine étant contenue dans un verre à expérience ou dans un tube à épreuve, on ajoute peu à peu une quantité d'acide égale à peu près au quart de son volume : à mesure que l'acide traverse l'urine, il détermine selon la proportion d'albumine soit une coagulation en masse du liquide, soit un précipité floconneux plus ou moins serré, soit seulement une opalescence, soit enfin une l^ère teinte rouge. Dans le cas de coagulation en masse il n'y a ni doute ni erreur possible; mais si l'urine est faiblement albumineuse et que l'on verse d'emblée un excès d'acide, on n'obtient ni précipité ni opalescence, ou plutôt l'albumine se coagule et se redissout en même temps sans apparaître aux yeux de l'obser-

M. JEANNEL. Diagnostic. ^

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U, A.., ^ «, >, rt, iâilmmitie par la ehaletir. — L^albon.,,v so o,vvo>lo -^ 7& dt^jx^s : lors donc que Ton porte W«^ I unno .ilb«nunouM> À cotte température et à plus forte ».MM>n ,i„ ,).^s^«^ ou oUim un précipité dont la masse j^« '•« <\\m\iw xsrioni ^>lon la proportion d'albumine. »<^'^.luob ,,,w„,.io d\tlhuuineest faible, le trouble léser ! ;• '<nudo osi duVuilo à m^nnaitre; l'artifice suivit "••><-r<'^ |vu^ t;,svJionox> ,H^ laisse place à aucmi doute.

L'urine suspecte est mise dans un tube à épreuve que Ton emplit à moitié; au lieu de chauffer la totalité de la colonne liquide en présentant à la flamme d'une lampe à alcool le fond du tube, on chauffe et on expose à la flamme seulement les couches supérieures du liquide et par conséquent le milieu du tube : la coagulation de Falbumine n'a lieu que dans la zone chauffée qui se trouble plus ou moins, et Ton juge aisément par comparaison la différence entre les deux couches de liquide, dont l'inférieure reste claire et transparente.

Lorsque l'urine est acide, l'essai par la chaleur ne laisse aucune place à l'erreur, mais lorsqu'elle est neutre ou alcaline elle peut être chargée d'albumine et ne donner aucun précipité par la chaleur.

L'urine neutre ou alcaline peut au contraire ne pas être albumineuse et donner par la chaleur un précipité constitué par des phosphates terreux. Il suffit d'aciduler l'urine pour dissoudre ce précipité qui est floconneux et peut être confondu avec celui que donne l'albunriine.

On comprend dès lors qu'il est nécessaire de ^s'assurer avant tout de la réaction acide, neutre ou alcaline du liquide. On a proposé d'aciduler l'urine à l'aide de l'acide acétique : cet acide a l'inconvénient de dissoudre l'albumine à chaud et de précipiter la mucine : les acides azotique ou chlorhydrique sont préférables.

Tels sont les réactifs usuels de l'albumine, on pourrait d'ailleurs employer également l'alcool et l'acide phé nique, et le nitrate acide de mercure.

X^e dosage rigoureusement exact de l'albumine dans les urines exige des manipulations chimiques trop longues et trop compliquées pour qu'on puisse les appliquer couramment à la clinique médicale. Le procédé approximatif suivant donne des résultats presque toujours suffisants ; pour l'essai au moyen de l'acide azotique, on emploiera toujours les mêmes quantités, par exemple

388 £XAMEM DES URINES.

100 d'urine et 10 d'acide : si Ton a recours à la chaleur, on fera bouillir pendant un temps toujours égal 100 grammes d'urine; on laissera reposer dans un verre gradué; l'épaisseur du dépôt rassemblé au bout de 24 heures indiquera la quantité d'albunune. Si les données obtenues ne sont pas absolument exactes, elles sont du moins parfaitement comparables et c'est ce qui suffit au clinicien, e . Recherche du sucre (glucose) dans r urine . — De nombreux procédés ont été recommandés pour le diagnostic clinique du diabète sucré, nous les étudierons successivement.

a. Procédé de Moore. — On verse dans un tube à essai parties égales d'urine et d'une solution concentrée de potasse caustique ; on fait bouillir en ne chauffant que les couches supérieures du liquide. Si la liqueur est sucrée, on voit apparaître dans la zone chauffée . une coloration brune plus ou moins foncée, suivant la proportion de sucre. Celte coloration, due à la formation d'acide mélassique, augmente par le refroidissement. On peut aussi bien employer la soude ou la chaux caustique. Il se produit souvent un précipité blanc de phosphates terreux qui ne nuit en rien à la réaction. Quoi qu'il en soit, dans le cas d'une urine peu sucrée, la coloration brune n'est souvent pas d'une netteté indubitable et d'ailleurs l'intensité de la coloration ne permet d'obtenir, quant aux proportions de glucose, que des notions très-vagues.

b. Procédé de B'àttger. — Bôttger verse dans un tube à épreuve parties égales d'urine et d'une solution de carbonate de soude à 1/3; il ajoute environ 1 gramme de sous-nitrate de bismuth et porte le mélange à l'ébullition. Si la liqueur est sucrée, le sous-nitrate da bismuth réduit par le sucre devient gris ou noir. On conclut selon l'intensité de la coloration.

Un procédé analogue consiste à préparer à l'avance une solution alcaline de sous-nitrate de bismuth (0^,5

de sous-nitrate de bismuth, 0^%5 d'acide tartrique, 4 grammes d'eau, chauffer et ajouter une solution de potasse caustique jusqu'à ce que le mélange devienne limpide ; conserver à l'abri de l'acide carbonique de l'air. Pour faire l'essai, on porte à l'ébullition un mélange à parties égales d'urine et du réactif; s'il y a du sucre, la réduction du bismuth est instantanée. Mais la réaction, d'ailleurs très -sensible, n'est réellement caractéristique que si l'urine ne contient ni hydrogène sulfuré, ni albumine, ni gomme, ni fer, ni plomb, ni mercure, ni cuivre; car tous ces corps donnent aussi une coloration noire en présence du sous-nitrâte de bismuth. Il faut donc s'assurer de leur absence ou les éliminer par des essais ou des manipulations préalable?.

c. Réactifs cupriques. — Il y en a plusieurs, mais tous aboutissent à la même réaction : la réduction du protoxyde de cuivre en oxydule avec formation d'un précipité rouge brique en présence de la glucose.

i" Procédé de Trommer. — On verse dans un tube à essai environ 10 grammes d'urine, puis un volume égal de solution de potasse caustique; s'il se forme un précipité blanc de phosphate terreux, on filtre; on laisse tomber dans le mélange limpide quelques gouttes d'une solution étendue de sulfate de cuivre : un précipité bleu vert d'oxyde de cuivre hydraté apparaît aussitôt. On agite; si l'urine est sucrée, le précipjité se redissout en donnant à la liqueur une teinte bleu d'azur. On chauffe sans faire bouillir : l'oxydule de cuivre se précipite et forme un dépôt rougeâtre caractéristique. Le procédé est d'une grande sensibilité ; le réactif cupro-potassique, ainsi préparé au moment de l'expérience, ne varie pas et se montre d'une fidélité inconnue aux liqueurs de Bareswill et de Fehling.

Si l'on n'a pas ajouté une quantité suffisante de sulfate de cuivre, il reste uii excès de potasse qui, par la chaleur, donne à la liqueur sucrée une coloration brune; mais la

précipitation de Toxydule de cuivre n'en est pas entravée. Jaccoud a modifié quelque peu le procédé de Trômmer : il ajoute d'abord à l'urine le sulfate de cuivre et fait bouillir : aucune modification ne se produit ; continuant à chauffer, il verse goutte à goutte la potasse : le précipité bleu se forme et se redissout en colorant la liqueur pour faire ,place au précipité rouge.

Dans tous les cas, il faut éviter de faire bouillir la liqueur; si l'on chauffe en effet jusqu'à l'ébuUition l'urine avec la solution de sulfate de cuivre, il peut, même en l'absence de sucre, y avoir réduction de l'oxydule de cuivre par d'autres corps organiques. C'est pour éviter cette source d'erreur qu'on a proposé de faire l'essai à froid; il suffit alors d'abandonner le mélange d'urine et de solution de cuivre alcaline pendant 12 à 24 heures; le sucre seul est capable d'opérer la réduction dans ces conditions.

^ Procédé de Bareswill. — Bareswill prépare d'avance la liqueur cuivrique alcaline et assure la solubilité de l'oxyde de cuivre hydraté en ajoutant au mélange une certaine proportion de bitartrate de potasse* et de carbonate de soude.

3° Procédé de Fehling. — Fehling, au lieu de bitartrate de potasse et de carbonate de soude, emploie le tartrate neutre de potasse et de soude.

Voici la formule de la liqueur qui porte son nom :

Faites dissoudre, d'une part :

Sulfate de cuivre cristallisé pur 34 gr. 631^

Eau 200 gr.

D'autre part.

Tartrate de potasse et de soude 173 gr.

Lessive de soude (densité 1,12) 500 gr.

Ajoutez peu à peu la solution cuivrique à la solution alcaline. Filtrez, complétez à \ litre avec :

ïjLw distillée i Q. s.

La liqueur titrée dite de Fehling est d'un bleu intense; elle est préparée de telle sorte que 10 centimètres cubés sont décolorés par 0»%05 de sucre; elle est très-comniode pour le dosage du sucre dans l'urine (1).

Les liqueurs de Bareswill et de Fehling s'altèrent par l'action de la lumière et précipitent alors toutes seules par la chaleur. Aussi doivent-elles être conservées dans des flacons noirs. En outre, il est nécessaire de temps en temps de les éprouver en les faisant bouillir avec une solution de glucose titrée à 1/100, ou encore avec de l'urine non sucrée. Les liqueurs de Pavy; de Bernard, de Donaldson, de Magnes, sont analogues et prêtent aux mêmes considérations.

d. Réactif de Maumené. — Maumené imbibe des bandelettes de mérinos blanc d'une solution aqueuse de bichlorure d'élain et les fait sécher dans une éluve. Pour faire l'essai, on mouille l'une de ces bandelettes avec l'urine suspecte et l'on chauffe. S'il y a du sucre, le sel d'étain est réduit et colore la bandelette en noir.

e. Réactif de Krause et de Luton. — Une solution concentrée de bichromate de potasse contenant de l'acide sulfurique libre prend, sous l'influence de la chaleur, en présence d'une urine sucrée, une belle teinte verte ou vert-bleue. Mais le sucre n'est pas le seul corps contenu dans l'urine qui donne lieu à cette réaction.

f. Réactif de Net^bauer et Vogel. — Réduction du

(1) Pour opérer ce dosage, on verse dans une burette graduée de 5 centimètres cubes d'urine et Ton ajoute 15 centimètres cubes d*eau distillée. On verse dans un ballon 10 centimètres cubes de liqueur titrée de Fehling, on étend avec 20 centimètres cubes d'eau, on chauffe. Lorsque le réactif cuivrique entre en ébuUitîon on y fait tomber goutte à goutte Turine contenue dans la burette, jusqu'à ce que tout le sel de cuiyre soit réduit et précipité. On reconnaît ce point à la décoloration complète du réactif dans lequel l'hydrogène sulfuré ni le cyanure jaune ne doivent produire aucun t;'ouble.

L'opération terminée, on lit sur l'échelle de la burette la quantité d'urine employée, soit 4 centimètres cubes. 4 centimètres cubes d'urine étendue de 3 fois son volume d'eau, par conséquent 1 centimètre cube d'urine a réduit 10 centimètres cubes de liqueur et contient par conséquent 0e%05 de sucre..

nitrate d'argent ammoniacal par Turioe sucrée, même observation que pour le précédent.

g. Réactif de Pettenkofer, — Pettenkofer mêle à l'urine un peu de bile de bœuf et ajoute lentement un volume égal d'acide sulfurique. Le mélange prend une belle couleur pourpre s'il y a du sucre.

On n'a pas toujours sous la main de la bile de bœuf. D'ailleurs ce procédé ne saurait être quantitatif.

h. Réactif de Mulder. — On fait bouillir l'urine avec une solution de carmin d'indigo rendue alcaline ayec du carbonate de soude (sulfindigotate de soude). On obtient une coloration verte, puis rouge pourpre, si l'urine contient peu de sucre*; une coloration rouge d'emblée, passant plus tard au jaune, si la proportion de sucre est forte.

En somme, le réactif de Trômmer et en second lieu le réactif de Bôttger pour l'analyse qualitative^ la liqueur titrée de Fehling pour l'analyse quantitative, aboutissent aux résultats les plus sûrs : il est cependant des cas où ils ne donnent pas la certitude; il faut alors avoir recours à la fermentation.

i. Ferment atio7i. — Pour la fermentation on introduit l'urine dans un ballon avec de la levure de bière et on maintient dans une étuve à la température de 30 ou 40^ S'il y a présence de sucre, il se dégagera de l'acide carbonique et il se produira de l'alcool.. L'é tu ve qu'exige ce procédé de recherche et les délais qu'il entraîne le rendent inapplicable à la cUnique.

Le polarimètre décèle aussi des traces de glucose dans l'urine; mais cet instrument n'est pas approprié aux exigences des recherches cliniques.

f. Recherche des matières colorantes de la bile. — L'urine qui contient les pigments de la bile en certaine proportion se reconnaît facilement à sa forte coloration brun-rougeâtre, ou brun-verdâtre, ou encore vert-foncé

OU vert-pré ; elle mousse par Tagitation et colore en jaune ou en vert le papier à filtrer.

De nombreux procédés ont été proposés pour mettre en évidence ces matières colorantes.

1"* Acide nitrique du commerce. — On verse dans un ven^e à expérience une certaine quantité d'urine, puis goutte à goutte, le long des parois de l'acide nitrique du commerce qui contient un peu d'acide hypoazotique. L'acide, plus dense que l'urine, gagne le fond du verre où il forme une couche nettement séparée. Au niveau du contact de l'acide et de l'urine, on voit apparaître, si ce dernier liquide contient des pigments biliaires, une zone verte qui passe par le bleu, le violet, le rouge acajou, pour aboutir au jaune. Ce jeu de couleur n'est pas constant; d'ailleurs la couleur verte qui se montre la première est seule caractéristique; l'uroxanthine, pigment naturel de l'urine, peut en effet, ainsi que l'a remarqué Neubauer, donner lieu aux colorations rouges et violettes.

Lorsque la quantité de pigments biliaires est faible, la réaction ne se produit souvent qu'au bout de plusieurs heures ; on aura donc soin de ne pas se prononcer trop tôt.

Si même cette quantité est extrêmement faible, le procédé est infidèle, la réaction ne se fait pas.

S"" Acide nitrique et acide sulfarique. — Neubauer emploie un mélange à parties égales d'acide nitrique et d'acide sulfurique; le réactif ainsiobtenu est un peu plus sensible que le précédent,

3** Procédé de Brucke. — Brûcke emploie aussi les deux acides, mais successivement. Il verse d'abord quelques gouttes d'acide nitrique, qui fait apparaître la teinte verte ; puis lentement, le long du verre, 20 à 30 gouttes d'acide sulfurique concentré, qui tombe au fond et fait naître le jeu des couleurs. Ce procédé n'a aucune sensibilité particulière.

i"" Procédé de Kiihne, — Kûhne comnience par verser

39i EXAMEN DES URINES.

dans le verre une couche de quelques centimètres d'acide nitrique; il ajoute ensuite l'urine goutte à goutte à l'aide d'une pipette; on voit apparaître un anneau d'un beau vert qui va croissant et changeant de couleur à mesure que la quantité d'urine augmente; le procédé doit sa sensibilité à ce que, dès le début de l'expérience, l'urine se trouve en contact avec un excès d'acide.

5° Procédé de Heller. — On mêle à Turine une petite quantité d'albumine liquide, et on en mouille le fond d'une assiette en porcelaine blanche, puis on verse quelques gouttes d'acide nitrique. L'albumine se coagule en flocons dont la couleur verte tranche nettement sur le fond blanc de lassielte.

6° Procédé par le chloroforme. — Le chloroforme agité avec une urine contenant des pigments biliaires prend une couleur jaune très-sensible, lorsque l'urine est fraîche ; mais cette réaction devient infidèle lorsque l'urine est restée exposée à l'air. Le chloroforme en effet ne dissout qu'un des pigments biliaires : la cholépyrrhine, et n'a aucune action sur la biliverdine; or au contact de l'air la cholépyrrhine se transforme en biliverdine.

Un résultat positif permet donc d'affirmer la présence de pigments biliaires; un résultat négatif doit toujours être contrôlé par l'épreuve de l'acide azotique. Le procédé par le chloroforme n'a par conséquent aucun avantage sur les précédents.

T Procédé de Jaccoud. — J'accoud emploie l'acide azotique fumant au lieu de l'acide azotique du commerce. Deux ou trois gouttes de cet acide, que l'on laisse tomber sur l'urine, à l'aide d'une baguette de verre suffisent à manifester la réaction et produisent une teinte verte des plus éclatantes. La sensibilité de ce procédé est extrême.

8° Procédé d'Otto RosenbacL — Otto Rosenbach mouille du papier à filtre avec l'urine suspecte, soit en plongeant le papier dans lurine, soit et mieux en filtrant

EXABIEN DES URIISES. 395

l'urine, puis sur ce papier il laisse tomber une goutte d'acide azotique concentré; au point de contact apparaît de la façon la plus évidente un jeu de couleur rouge, violet et bleu. Ce procédé est à la fois très-sensible et trèssimple.

En résumé, le procédé ordinaire par l'acide azotique du commerce suffit pour la majorité des cas ; le procédé de Jaccoud sera employé dans les cas douteux.

g. Recherche du sang dans Furine. — Lorsque l'urine contient une quantité notable de sang, elle est albumineuse et prend une teinte rouge ou rosée qui d'ailleurs n'est pas absolument caractéristique; le microscope en révélant la présence des globules sanguins, permet seul un diagnostic certain. Les globules ne restent intacts que dans les urines acides ; ils se désagrègent et se dissolvent dans les urines alcalines. Alors l'ébullition, après addition de quelques gouttes d'acide acétique, permet de reconnaître la présence du sang; elle détermine un coagulum, ce coagulum séparé par filtration colore en rouge l'alcool aiguisé d'acide sulfurique, en cédant à ce dissolvant l'hématine qu'il contient.

L'ébullition simple donne encore un coagulum roux ou brun, qui, desséché et calciné, laisse du peroxyde de fer.

Un troisième procédé est le suivant : on mêle dans un tube a essai parties égales de teinture de gayac et d'essence de térébenthine, on agite jusqu'à émulsion; on ajoute l'urine qui gagne le fond du vase. Il se produit un précipité blanc, puis jaune sale, puis vert, si l'urine ne contient pas de sang ; bleu et même indigo si l'urine contient la moindre trace d'hématine. Celle réaction est d'une extrême sensibilité.

h. Recherche du pus dans V urine. — Le pus se précipite par le repos au fond du vase en un dépôt léger, nuageux

(I) Revm des sciences médicales, 1875, t. V, p. 71.

blanchâtre, et d'aspect caractéristique. L'ammoniaque transforme ce dépôt en une masse gélatineuse. Le microscope, mieux que n'importe quelle réaction, permet un

Fig. Wï. — Oxalate de chaux.

diagnostic précis, en découvrant la forme des globules du pus.