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La plupart de ces expériences n’ont d’ailleurs apporté que des résultats négatifs ou, du moins, inutilisables pour nous.

En effet, les auteurs qui ont étudié l’hémolyse défibrinaient le sang, conservaient les globules rouges dans une solution de chlorure de sodium légèrement hypotonique, de façon à étudier le globule lui-même, isolé de son milieu ; tandis que nous cherchons à agir sur le sang complet avec son sérum et sa fibrine, fibrine qui nous donne la coagulation et sérum qui, comme Hédin l’a mon-. tré, exerce un rôle protecteur sur les globules rouges. |

En outre, la conservation des éléments blancs est assez difficile à obtenir, si lon veut garder leurs caractères morphologiques et chromatiques.

Nous avons successivement expérimenté les agents globulicides, chimiques, organiques et les alcaloïdes. |

Dans les recherches des cellules de certains organes, foie, pancréas, rein et dans la recherche des cellules de tumeurs, nous avons essayé d’utiliser l'action toxique des alexines en nous servant de liquides hémolyÿsants venant d’autres espèces animales.

Nos recherches, dans leur ensemble, sônt d'accord avec celles des auteurs qui se sont

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occupés de ces questions, sauf cette restriction que la présence du sérum avec le chlorure de sodium et les autres sels minéraux, la fibrine, l’action même des globules blancs modifiaient l’action de certaines substances globulicides.

Cette action globulicide elle-même, suivant les sujets malades, était modifiée par le changement de conditions de milieu.

Aussi, l’inconstance de ces résultats permet de ne pas les rapporter en détail. Nous relaterons seulement les faits précis enregistrés pour l'examen du sang, pour l'examen des liquides hémorrhagiques : hémoptysie, urines, pleurésie, liquide céphalo-rachidien.

Pour le sang. — Toutes les fois que nous avons cherché à obtenir une hémolyse totale par action osmotique, nous avone obtenu un résultat incomplet et généralement lent.

L'eau distillée n’agit que par hypotonicité, elle dissout la matière colorante, comme nous l'avons déjà dit, mais non le protoplasma, qui reste une gène. Aussi ne sommes-nous pas surpris des inconvénients signalés par MM. Nathan-Larrier et Bergeron avec lhydro-hémolyse qu’ils ont appliquée, alors que nous l’avions déjà signalée, utilisée et abandonnée.

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- ‘Il faut donc une substance plus active qui, cependant, n’altère pas trop le protoplasma.

Les glycosides sont impraticables, parce qu'ils déterminent de trop grandes altérations cellulaires sur les autres éléments du sang.

Les sérums hémolytiques qui nous avaient été conseillés par M. Carnot ne peuvent être utilisés que comme recherche de curiosité de laboratoire. La difficulté d'obtenir et de garder des sérums hémolytiques équivalents d’une façon constante sont un premier inconvénient. Mais ils ont, en outre, le défaut d’altérer les globules blancs.

Il aurait été intéressant d’obtenir ainsi la diflérenciation de cellules d'organes circulant dans le sang comme cela doit se produire dans la généralisation de certaines tumeurs.

Nous n’avons jamais pu obtenir de résultat satisfaisant.

Il ne restait donc d’utilisable, pratiquement, que les agents chimiques.

Tous ont été employés en solution liquide assez diluée et agissent pour la plupart par laction combinée de phénomènes osmotiques et chimiques.

L'hypothèse émise par Nolf présenterait même une explication assez satisfaisante si on la com-

plétait.

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Le stroma du globule rouge normalement impé-nétrable et au contenu et au milieu, se laisse pénétrer par une substance étrangère qui le modifie de telle sorte qu'il augmente son affinité pour l’eau. Il deviendrait ainsi pénétrable pour l'hémoglobine qui passerait dans le milieu extérieur, et aussi pour le corps chimique qui peut agir jusqu'à sa désintégration.

Il est aussi utile de se rappeler que la température agit sur la rapidité de l’hémolyse, c’est vers 37° qu'on obtient les meilleurs résultats.

Après avoir essayé les différents corps chimiques : chlorure de sodium en solutions très hypotoniques, urée, chlorure d’ammonium, fluorure d’ammonium et de sodium, bromure de sodium, chlorure de potassium, iodure de potassium, cyanure de potassium, etc..…., nous nous sommes arrêté à l'acide acétique et à l'alcool. Leur action est certaine et leur utilisation est courante.

La solution acétique a été utilisée d'abord en Allemagne pour la numération rapide des globules blancs. Quant à l'alcool, Nikiforoff et Gabritschevsky ont signalé son action globulicide, mais sans l'appliquer.

L’acide acétique peut être employé à dose assez faible, au maximum 0,50, 0,30, 0,25 p. 100.

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L'alcool doit être celui employé pour les dissociations, 2 volumes d’alcool à 90° pour 1 volume d’eau disüllée ; on peut diminuer la quantité d’alcool, mais jamais l’augmenter, car il exerce alors une action coagulante.

La coagulation est en effet, nous l’avons déjà vu, un des plus gros inconvénients de l’examen direct d’un certain volume de sang.

Mais il est facile de l’éviter lorsqu'on examine le sang lui-même, soit en faisant agir une solution à 1 p.100 d’oxalate ou de citrate de potasse, soit plus simplement en faisant le mélange progressivement de façon à mettre en contact une petite quantité de sang avec une grande quantité

de liquide érythrolytique.

Pour les liquides hémorrhagiques. — Les conditions de l'hémolyse immédiate se trouvent 101 modifiées suivant que l’on aura un liquide sanglant rejeté à l'extérieur, hémoptysie hématémèse, hématurie ou au contraire une hémorrhagle interne dans la plèvre, le péritoine ou les

méninges.

HéÉMORRHAGIES EXTERNES.— Lorsque le sangest recueilli à sa sortie pour être examiné de suite et

qu'il est presque pur, les conditions restent les