DOSAGE DES CENDRES

avec soin sur un filtre. Les liquides réunis sans perle sont évaporés, et le résidu est desséclié.à 200“ et pesé. (Poids des sels solubles A.) Le filtre avec le charbon est séché et remis dans le creuset également séché, on brûle au rouge vif et on pèse ; la cendre traitée par l’acide cblorhydrique étendu et chaud se dissout, sauf le charbon échappé à la combustion qu’on lave, sèche et pèse, pour le déduire du poids total des cendres insolubles B.

Dosage du liquide A. — Solution aqueuse des sels solubles :

S'il est acide et contient du phosphate de chaux ou de magnésie, on le sursature avec de l’ammoniaque ; on filtre, on lave, on sèche et on pèse le dépôt après combustion du papier, et on l’ajoute à la mas.se B.

Le liquide filtré ou le liquide primitif, si l’opération précédente n’olait pas nécessaire, ne contiendra plus de chaux ni de magnésie, s’il renferme de l’acide phosphorique, ou inversement. Dans le premier cas, on ajoute un petit excès d’acide azotique et de l’azolale d’argent; le précipité de chlorure d’argent est filtré, lavé et pesé avec les précautions voulues.

Le liquide filtré est débarrassé de l’excès d’argent par l’acide chlorhydrique, filtré de nouveau et précipité par un excès de'chlorure de barium à chaiLX. Le précipité de sulfate de baryte lavé, séché et calciné pour brûler le papier est pesé. On enlève l’excès de baryte au liquide par l’acide sulfurique, et on évapore à set après filtration. Le résidu contenant l’acide pbosphorique et les alcalis est traité par l’acide nitrique chaud, et un morceau d’étain

CIIIMIK PBYSiOLOfilQVe.

pur, égal à 3 ou 4 fois le poids de l’acide phosphorique présumé. L’acide slaiinique formé retient tout l’acide phosphorique, on le sépare par fillration (C). Le liquide desséché avec quelques gouttes d’acide sulfurique donne le poids des alcalis à l’état de sulfates, après calcination du résidu. Les sulfates alcalins redissous dans l’eau (peu) sont précipités par le bichlorure de platine avec les pré* cautions voulues, et le chloroplalinate de potasse recueilli sur un filtre taré d’avance est lavé et pesé après dessiccation.

Soient x la potasse et y la soude,

S le poids trouvé des sulfates et P celui du chloroplatiiiate, on aura :

5,19.1 . I = P, et I,8l9x + 2,290y S.

L’acide stannique C est dissous avec le filtre dans l’eau régale ; la solution sursaturée par l’ammoniaque est additionnée d'un excès de sulfliydrate d'ammoniaque et le litiuide filtré est précipité par le sulfate de magnésie. Le précipité de phos|)hate animoniaeo-magnésien est filtré, lavé avec de l’eau ammoniacale et calciné ; le poids donne l’acide phosphorique à l’état de pyrophosphate de magnésie. (Méthode de M. Rcyiioso modifiée par M. Girard.)

Dans le second cas (absence d’acide phosphorique), ou ajoute du chlorhydrate d’ammoniaque, de l’ammoniaque et de l'oxalate d’ammoniaque ; ou laisse reposer douce heures, on filtre l’oxalate de chaux qu’on calcine après lavage à l’eau chaude pour peser la chaux à l’état de

DOSAGE DSS CENDRES.

itil

carbonate. Le liquide est additionné de phosphate d’am* moniaque, au bout deduuKe heures on Hllre le phosphate ammoniaco-magnésien, le liquide filtré et évaporé à sec est débarrassé d'acide phosphorique, et les alcalis sont dosés comme plus haut d’après le procédé Reynoso et Girard.

Dosage de la dissolution B. — On évaporeà sec, on re* prend par l’acide azotique chaud avec un fragment d’élain. L'acide stannique filtré et lavé retient du fer et tout l’acide phosphorique ; on le dissout dans l’eau régale, la solution sui-saturée d’ammoniaque et de sulfhydrate d’ammoniaque donne le fer à l’état de sulfure. Ce sulfure est redissous dans l'acide chlorhydrique avec un peu d'acide nitrique et précipité à l’étal d’oxyde par l’ammoniaque. L’acide phosphorique se dose comme plus haut (méthode Girard). Le liquide séparé de l’acide stannique donne le fer (partiel) par l'ammoniaque ; on l’ajoute à l'autre partie déjà précipitée. Il ne reste plus qu’à précipiter successivement la chaux cl la naagnésie par l’oxalale d’ammoniaque et le phosphate de soude.

Nous n’avons indiqué ici que la marche à suivre pour le dosage des parties constituantes minérales; pour les détails opératoires, la manière de peser cl en général de traiter les précipités partiels, nous renvoyons aux ouvrages spéciaux d’analyse, et notamment à celui de .MM. Gerhardt et Chancel.

La silice se dose à part en suivant la marche tracée pour sa détermination qualitative.

Il en est de môme de l’acide carbonique des cendres

CHIMIE PHT8IOLOGIQUE.

qu’on dose par différence en le chassant par l’acide chlorhydrique d’un échantillon de cendres obtenues par une combustion immédiatement complète, après avoir toutefois pris la précaution de restituer l’acide carbonique qu’une température trop élevée a pu enlever au calcaire ; il suffit pour cela de chauffer les cendres avec du carbonate d'ammoniaque jusqu’à expulsion de l’excès.

On met la cendre ainsi préparée et bien pesée dans une petite fiole A, qui se ferme par un bouchon percé de deux orifices; dans l’un, est fixé le tube courbé et plongeur d’une petite picette à acide B, construite avec un tube d’essai, et dans l’autre, s’adapte un tube dont l’extrémité

libre s’engage dans un tube plus large rempli de chlorure de calcium C {fig. 2).

Le tube B est rempli d’acide sulfurique étendu.

Après avoir taré l’appareil, on aspire pour faire passer l’acid» dans la fiole, et, lorsque la réaction est terminée, on aspire encore une fois pour chasser l’acide carbonique qui remplit l’appareil, et on détermine la perte éprouvée.

MATIÈaeS OHGAMQL'tS.

La dialyie et la dlffaeloa enTiaa|[4e« comme méthodee d’aDalyse phyeloloalaae-

La dialyse et la diffusion *peuvent être considérées comme des méthodes d’analyse destinées à recevoir des applications importantes en physiologie.

S’agit-il d’opérer la séparation d’un colloïde et d’un eristallolde mélangés, sur une plaque en gutla percha, on dispose un anneau d’un diamètre de 0“,200 à 0“,250 et de 0",075 de profondeur, on le ferme avec une feuille de papier parchemin (papier modihé par l’action de l’acide sulfurique, il se trouve dans le commerce), de manière à donner à l’appareil la forme d’un tamis. On y verse une couche de 0”, 01 2 de la solution sur laquelle on veut opérer, et on fait flotter le tout sur une quantité relativement considérable d’eau. Le cristalloïde passe seul à travers le septum. (Moyen de séparer le sucre, l’urée, les sels, etc., de l’albumine ou autres corps semblables.)

On opère la séparation des cristalloïdes d’inégale diffusibilité en introduisant leur solution au moyen d’une pipette au fond -d’une éprouvette étroite pleine d’eau. La substance la plus diffusible monte et se sépare de plus en plus des autres. (Obahab.)

Matières orsanlqaes. Caractères, leur reckerche et lear dosage dans l’orKaalsme.

Subxlances hydrocarbonées. — Glycogène. — Il prend

464 CHIHIB PHTBtOLOGIQl'E.

uno coloration violette ou rouge marron par l’iorle, se transfbrme en glucose par l’ébullition avec l’aride sulfiirique étendu. Pour son dosage, on détermine par Tun des procédés suivants la quantité de sucre formée.

Glucose. — Ce n’est que dans les cas de diabète que l’on peut trouver le sucre dans l’urine et le doser sans préparation préalable.

Lorsque la quantité de glucose dans l’urine est faible, on ajoute de l’acétate de plomb, on filtre et on précipite le liquide par l’ammoniaque. Le précipité obtenu, bien lavé, est décompose par l’acide oxalique, on filtre, on sature par le carbonate de chaux, on filtre de nouveau. Le liquide acidulé avec un peu d’acide acétique est cva|)oré à sec au bain-marie, le résidu repris par peu d’eau donne une liqueur propre aux déterminations qualitatives et quantitatives, si toutefois on a mesuré l'iirine et pris les précautions nécessaires pour ne rien perdre. (Bhcem.)

Pour la recherche du sucre dans le sérum ou tout autre liquide albumineux, on neutralise avôc de l’acideacétique, un coagule par la chaleur, on filtre, on lave. Le liquide est évaporé à sec et repris par l’alcool absolu. La solution additionnée de potasse alcoolique donne un précipilé visqueux, épais (glucosate de potasse), qui, dissous dans l’eau, servira aux déterminations qualitatives et quantitatives.

(Leiihanm.)

On reconnaît la glucose en solution : 1° par sa saveur sucrée; 2° par la fermentation avec la levùre (dégagement d’acide carbonique, formation d’alcool ). C’est le caractère le plus certain quand on peut le mettre en pratique, .t* F.n

■ATltaES OKiQAmQDBS. 46 S

l’absence de toute autre substance active, par la déviation qu’elle imprime au rayon polarisé. On ne peut appliquer ce procédé qu’à l’urine diabétique ; le liquide doit être décoloré par filtration sur du noir animal, ou par précipitation par le sous-acétate de plomb. 4’ Par la réduction à chaud du sous-nitrate de bismuth en présence de la potasse caustique. Ce sel noircit sous l’influenCe du sucre de raisin. Il n’en faut qu’une pincée avec un petitfragment de potasse pour déceler la glucose. (Boettger.) 5° Au moyen de la liqueur de Fehling (tartrate de cuivre alcalin). La glucose chauffée à 100° avec ce réactif le réduit énergiquement et précipite de l’oxydule rouge de cuivre (Cu*0). On prépare la liqueur de Fehling en dissolvant :

Sulfate de cuivre criatalliaë, très-pur et sec a-ts'.SS

Eau 300 ,00

On mélange avec une solution de 1 73 grammes de sel de Seignette pur dans 480“ de lessive de soude caustique à 18°,o AB, on étend à un litre. Cette solution sert aiissi au dosage : 10“ valent 0",0.^ glucose. 6° Chauffée avec ,1a potasse caustique en solution aqueuse, la glucose donne une liqueur brune. 7° Par la preuve de Trommer, elle se rapproche de l’essai par la liqueur de Fehling, et consiste à ajouter au liquide à examiner d’abord de la potasse, puis quelque peu de sulfate de cuivre. La solution d’un beau bleu doit se troubler par la chaleur et déposer de l’oxydule rouge de cuivre.

Pour le dosage on emploie : 1° le saccharimètre de M. Soleil, mais dans les 'cas de diabète seulement et

C8IIUB PBTSIOU>«QBK.

après décoloration de l’urine^ 100 divisions de l’échelle correspondent à une colonne liquide de 0”,20 è 223,97 de glucose par litre d’urine (1).

2*LaliquenrdeFehling, en se servant soit de l’orine, soit des extraits préparés comme il a été dit ei-desaus ; dans ce dernier cas, on étend le produit saoeharifère de manière à foraoer 50 ou 20 ou 1 0“, selon la masse dont on dispose. On met pour l’essai 10 ou 3 ou 2‘%5 de solution de cuivre dans une petite fiole en verre blanc, on chauffe au bain de sable, et on ajoute goutte à goutte avec une burette la liqueur sucrée tant qu’il se forme un précipité jaune rougeâtre et tant que la liqueur est colorée en bleu. Lorsque le point est atteint, on Gltre et on essaye par l’hydrogène sulfuré si le liquide renferme encore du cuivre. S’il n’y a plus de précipité noir, on recommence l’essai en s’arrêtant à 0",5 avant la limite supérieure trouvée en premier, on filtre à chaud après addition d’un peu d’eau ; le liquide filtre doit encore renfermerdu cuivre, on continue à verser le sucre par gouttes, et on arrive à saisir exactement le point d’arrêt. Le volume de liquide qui précipite 1“ de solution de cuivre contient 0*',00o de glucose. Nécessairement il faut être exercé pour réussir.

Nous ferons remarquer en passant que parmi les principes de l’organisme l’acide urique se comporte vis-à-vis de la liqueur de Fehling comme la glucose.

(I) Pour les détills opératoires et la desoiiplion de l’appareil, consulter les rroiVés de /^riTUc, la Chimie deRegnault et la brochure de M. Clerget, annexée t tous les appareils construits par M. Ouboscq-Soleil, et extraite des Annales de chimie, 3* série, t. XVI.

MATIÈRES OlGAmQl'ES. 467

Lactose. — La lactose réduit la solution de Fehling et le sous-nitrale de bismuth en présence de la potasse. Elle fermente moins vite que la glucose ; l’acide nitrique la convertit facilement en acide mucique peu soluble dans l’eau et insoluble dans l’alcool. L’examen des cristaux la distingue du sucre de raisin, quand il est isolé sous cette forme. Le dosage de 1a lactose se fait par la liqueur de Fehling absolument comme celui du sucre de raisin ; mais il faut se rappeler que 10 parties lactose = 7 sucre de

raisin sous le rapport du pouvoir réducteur. La recherche qualitative et quantitative du sucre de lait ne se fait que pour le lait. Ce liquide additionné d'acide acétique est chauffé à 60”, le coagulum filtré ; le petit-lait peut être directement employé. Pour avoir le sucre en nature, il faut évaporer dans le vide sec, reprendre par l’alcool chaud, filtrer, concentrer à sirop, ajouter un peu d’alcool absolu et abandonner à cristallisation.

Inosine. — Scherer indique une réaction qui permet de reconnaître facilement ce corps observé dans l'urine dans certains cas de diabète. La matière à examiner est chauffée avec de l’acide nitrique sur une lame de platine ; avant l’évaporation complète on y ajoute de l’ammoniaque et unegouttede chlorure de calcium, et on dessèche aveeprécaution, la masse prend une belle coloration rouge rosée. .Mais, avant d’appliquer la réaction de M. Scherer, il faut isoler l’inosine dans un état de pureté relatif.

A cet effet on coagule le liquide organique par la chaleur en neutralisant préalablement par l’acide acétique, on précipite d’abord par l’acétate neutre de plomb ; lé

468 CHIMIE PBTSIOLOGIQCE.

précipité est séparé par filtration, le liquide additionné de sous-acétate de plomb donne un nouveau dépôt dans lequel se trouve l’inosine. Ce dépôt est lavé et décomposé par l’hydrogène sulfuré, on filtre et on concentre le liquide jusqu'à ce que l’addition d’alcool y produise un trouble persistant. Arrivée à ce point, la solution est traitée par son volume d’alcool fort, éclaircie par la chaleur et abandoimée à cristallisation ; l’inosine se dépose sous forme de prismes rhomboïdaux d’un angle de 138° 52' insolubles dans l’alcool froid, ne réduisant pas la liqueur de Fehling et donnant la réaction de Scherer.

Pour la détermination quantitative, il faut recueillir les cristaux et les peser ; elle n’est par conséquent qu’approchée.

Graisses. — La recherche des graisses dans un liquide ou un organe se fait en évaporant le liquide à sec ou en desséchant l’organe. La masse pulvérisée est épuisée par l’éther, la solution évaporée donne un résidu qu’on traite successivement par l’eau et l’alcool faible ; la partie non dissoute représente la substance grasse. Ce résidu peut renfermer plus ou moins de cholestérine ; dans les cas où la proportion de cette dernière n’est pas trop faible, on pourra isoler la cholestérine en le traitant par l’alcoo 1 bouillant et en abandonnant la solution à l’évaporation spontanée ; la cholestérine se sépare sous forme de tables rhombes d’un angle de 100° 30'. Elle se colore en bleu par l’acide sulfurique et l’iode ou par le chlorure de zinc et l’iode ; si elle n’est pas pure, cette coloration peut être violette, verte ou rouge. L’acide sulfurique cou-

MATIÈRES 0RGA1UQDE8. A69

centré colore les cristaux en rouge vers les bords.

Matières protéiques et leurs dérivés. — Albumine. — 11 ne peut être question ici que de la détermination de l’albumine sblnble. Le clinicien n’a à se préoccuper de sa présence que dans Turine et dans les exsudations séreuses. On reconnaît l'albumine dans un liquide clair : 1* par te trouble qui se manifeste (flocons plus ou moins volumineux, blancs) lorsqu’on le chauffe à lOO”, après l’avoir neutnüisé au besoin par l’acide acétique jusqu'à trèslégère réaction acide ; 2° par le précipité blanc floconneux qu’y détermine l’acide nitrique (quelques gouttes). Les précipités obtenus dans ces deux réactions doivent présenter les caractères des matières protéiques. (Coloration jaune par AzO*, HO devenant orange par l’ammoniaque. — Coloration rouge par le nitrate acide de mercure. — Odeur de corne brûlée par la calcination sur la lame de platine. — ChaulTés sur une lame de platine avec de l’acide nitrique, ils doivent donner un résidu bulleux très-combustible devenantjaune rougeâtre par la soude à froid et brun sale à chaud. (Scuereb).

Dosage. — En l’absence du sucre ou de toute autre substance active, le procédé le plus sûr et le plus expéditif est fondé sur l’emploi de l’appareil de Soleil. (Becquerel.) L’albumine dévie à gauche le plan de polarisation. (Pouvoir spéciCque = 37° 36', d’après Becquerel.) Deux solutions contenant des poids égaux, l’une de glucose et l’autre d’albumine, examinées au polarimètre sous des longueurs égales donnent à très-peu de chose près la même déviation en valeur absolue, mais en sens inverse. 11 est

CBWIE PBTtlOLOGtQDI.

facile de se régler d’après cela. Le sucre (glucose) et l'albumine dans Turine peuvent se déterminer simultanément par le saccharimètre. A cet clTet, on mesure la déviation initiale, puis on coagule l'albumine et ou détermine la glucose par son pouvoir rotataire. (Hoppb.) Un calcul trèssimple donnera l’albumine. La méthode chimique repose sur la propriété fondamentale de l’albumine de se coaguler par la chaleur vers 100°. Lorsque le liquide albumineux est alcalin, comme cela arrive dans le sérum, il faut se garder de le chauffer sans précaution. 11 convient de tenir compte des obsenations faites par Scherer à cet égard. Le liquide, s’il est trop concentré, doit être étendu d’eau et neutralisé, même très- légèrement acidifié avec de l’acide acétique, puis porté à l’ébullilion au bain-marie, dans un petit vase à précipités. L’albumine se sépare alors en flocons faciles à recueillir et à laver sur un filtre taré. La graisse entraînée peut être éliminée par de l'alcool bouillant. Les matières minérales sont déterminées par incinération après la pesée. Dans la pesée il faut observer toutes les précautions prescrites par les livres d’analyse à propos des substances hygroscopiques. (Sécher à 120°, laisser refroidir dans l’exsiccateur et peser le filtre entre deux verres de montre qui s’aqustent bien l’un sur l’autre.)

Fibrines. — Pour la recherche des diverses variétés de fibrines insolubles, nous renvoyons à ce qui a été dit pages 33 et 34, et pour son dosage dans le sang voir Amlyse du sang.

Caséine. — Le procédé suivant présente seul quelque

VATIÈaSS OBCANIQDKg. 47 i

garantie lors«[u’il s’agit de démontrer avec certitude la présence de la caséine dans un liquide organique autre que le lait. ■ '

La liqueur est portée à l’ébullition avec addition d’un peu de sel ammoniac ; le précipité est séparé parle filtre; une partie du liquide refroidi est mélangée à du sulfate de magnésie ; s’il y a un trouble, un filtre de nouveau, et la liqueur filtrée est portée à l’ébullition ; l’apparition d’un précipité sera déjà un indice assez sûr de la présence de la caséine. Ce résultat doit être confirmé par l’essai suivant. On ajoute à une partie du liquide coagulé par la chaleur avec le sel ammoniac, un morceau de membrane interne fraîche çt bien lavée de l’estomac de veau, et on maintient une à deux heures à 30 ou 40° ; au bout de ce temps, tonte la caséine, s’il y en a, est coagulée. (Lehuann.)

bans le lait, il suffit dé verser quelques gouttes d’acide acétique pour précipiter la caséine, ou mieux de la coaguler directement par la caillette fraîche.

Titsui à gélatine. — Les tissus à gélatine se reconnaissent par la propriété qu’ils ont de donner par une ' epetion prolongée avec de l’eau des solutions qui renferment de la gélatine ou de la chondrine.

La gélatine en solution se reconnaît aux réactions suivantes :

1° Elle précipite par le tannin, le sublimé corrosif et l’alcool.

2* Elle ne précipite pas par le sous-acétate de plomb, l’acide acétique et le cyanure jaune en présence de l’acide acétique.

CHIHIK PHT8IOLOGIQDB.

3° Les solutions concentrées prennent par le refroidis* sement une forme gélatineuse.

La recherche de la gélatine dans le sang a une certaine valeur dans le diagnostic, puisque Scherer en a trouvé dans certains cas de leuchémie.

Le sérum est coagulé avec addition d’acide acétique par la chaleur; le liquide filtré est évaporé à consistance sirupeuse, dansle cas de la présence de gélatine, il se prendra en gelée et précipitera des flocons blancs par l’alcool.

La chondrine gélatinise aussi et précipite par l’alcool, mais elle se distingue de la gélatine, parce que ses solutions précipitent par l’acide acétique;, le précipité est insoluble dans un excès de réactif, soluble dans les sels alcalins ; elle précipite par les acides minéraux étendus et l’alun, le précipité se dissout dans un excès de réactif. L’acétate de plomb donne également un précipité.

Principaux dérivés des substances protéiques. — Hé~ mâtine. — Elle se distingue de tous les autres corps par sa couleur, la présence de quantités sensibles de fer dans ses cendres, ses solutions alcalines sont d’un rouge brun foncé ou brun verdâtre, selon l’état de concentration, et deviennent brun clair après addition d’acide sulfurique. Pour rechercher l’hématine en présence d’autres produits organiques (albumine, fibrine, etc.), on dessèche la matière à examiner, et on la traite par l’alcool acidulé avec de l’acide sulfurique.

Le dosage de l’hématine n’a d’intérêt que pour le sang (voir Analyse du sang). Sa détermination qualitative est

MATIERES ORflANIQDR».

utile toutes les fois qu’il s’agit de décider si un Nquidc organique est on non mélangé à du sang.

Acides de la bile. — Les acides tauro et glycocholiquè se caractérisent par la réaction de Pettenkofer (coloration rouge violette par l’acide sulfurique et le sucre) ; il ne faut cependant pas perdre de vue que l’acide oléique la donne aussi. L’acide taurocholique se distingue de l’acide glycocholiquè, puisqu’en l'absence de sulfates ou de matière protéique ou après élimination de ces corps, il donne de l’acide sulfurique par la déflagration avec du chlorate de potasse et du carbonate de soude pur. Ces essais peuvent se foire directement avec la bile ; mais quand il s’agit de déterminer la présence de ces corps dans un autre liquide (sang — urine — contenu de l’estomac et de l’intestin), on procède de, la manière suivante. Le liquide, débarrassé de produits albumineux par coagulation à 100* en présence d'un très-léger excès d’acide acétique et d’un sel alcalin (SO*,NaO), est précipité par le sous-acétate de plomb. Le précipité étant additionné d’une solution de carbonate de sonde, on dessèche et reprend par l’alcool absolu. La solution évaporée donne un résidu qu’on traite par un peu d’eau; la liqueur ainsi préparée servira à la réaction de Pettenkofer. (Nbukohn.) Quelques gouttes sont versées dans une petite capsule en porcelaine avec deux à trois gouttes d’acide sulfurique (l'"SO®,IIO -f- 4'HO) et une petite pincée de sucre, on cbaniTe doucement, il doit se former une couleur pourpre violette. S’il y a lieu de croire que les acides biliaires ont pu se décomposer en leurs dérivés insolubles dans l’eau, mais solubles dans

CHIMIK PBTglOLO«ie<IB.

l'alcool OU dans l’élher, ce n’est ■ pins d«n» l’extrait aqueux, mais dans les extrsdts alcooliques ou étbérés qu’il faudra chercher des produits capables de fournir la réaction de Pettenkofer. .

Piyments biliaires. — Parmi les pigments biliaires, le plus iraportanl est la bilifulvine (hématoïdine). Quelle que soit la matière sur laquelle doit porter l’examen (urine; sérum, contenu de l’estomac ou de l’intestin-, etc.), on peut employer le procédé suivant dû à Valentiner : la masse liquide, ou demi-liquide ou solide, est agitée avec le tiers de son volume de chloroforme, la solution de la bilifulvine dans le chloroforme est soutirée, filtrée au besoin sur un filtre mouillé avec du chloroforme et évaporée. On peut obtenir ainsi le pigment en nature et souvent même en cristaux. Cette même solution, concentrée au besoin, est très-propre à donner la réaction caractéristique de Gmelin ; en y versant de l’acide nitrique chargé de vapeurs nitreuses, la bilifulvine passe successivement par les teintes suivantes : vert foncé, bleu, viidet, rouge orange. Il n’est pas toujours nécessaire de traiter préalablement par le chloroforme (urine ictérique, même albumineuse, très-foncée; vomissements biliaires sans mélange de résidus d’aliments ; bile ) , pour déceler la bilifulvine. On verse simplement le liquide dans une éprouvette à pied, étroite et profonde, puis au moyen d’un entonnoir à long col, on fait arriver en dessous l'acide nitrique nitreux ; par suite du mélange progressif, U se formera des zones colorées dilféremmenl ; en allant de bas en haut, les teintes sont : l’orangé, le rouge, le

H4TI&RES ORCAnitfUES. 47U

violet, le bleu et le vert. La recherche de la bilifulvine est très-importante pour le diagnostic médical, parce qu’elle permet de conclure avec certitude à la présence des produits biliaires dans la matière soumise à l'expérience; taudis que la détermination des acides de la bile est beaucoup plus difficile et dounc le plus souvent des résultats négatifs, en dehors de la bile elle-même ou du contenu de l’intestin grêle.

Le clinicien n’a aucun intérêt à procéder à l’examen d’un liquide au point de vue de la biliverdine. Elle se dissout en vert dans l’alcool chaud en présence des acides (Scbverdfeger) et se décolore par l'acide nitrique nitreux sans les changements de teinte de la bilifulvine. On doit la chercher surtout dans le précipité fourni par l’acétate basique de plomb. Scherer précipite la naatière colorante par le chlorure de barium ; le précipité est décomposé par le carbonate de soude et le liquide filtré précipité par l’acide chlorhydrique, la matière colorante est lavée et dissoute dans un mélange d’alcool et d’étber.

Tyrosine et leucine. — Ce que nous avons dit dans le précédent chapitre de l’apparition anormale de ces deux . corps dans l’urine, le sang, le foie et d’autres organes, rend assez évidentes l’utilité et l’importance, au point de vue médical, des analyses faites dans le but de rechercher ces produits.

S'agit- il d’un organe parenchymateux, le tissu, finement haché, est mis à digérer avec le double de son volume d’alcool et exprimé au bout de vingt-quatre heures; le liquide est évaporé à consistance sirupeuse, et le résidu

CHIMIE rarSIOLOfilQDI.

repris par l’eau est successivement précipité par l’acétate neutre et par le sous-acétate de plomb (ce dernier dépôt peut servir à la recherche de l’inosine). Le liquide filtré et pui^é de plomb par l’hydrogène sulfuré est concentré à consistance sirupeuse et abandonné à la cristallisation. La leucine se sépare sons forme de grains globulaires (agglomération de cristaux), et la tyrosine en houppes doubles d’aiguilles accolées par leur sommet. (Nbceohm.) Dans le sang, on coagule l’albumine par la chaleur après addition d'un peu d’acide acétique, le liquide filtré est également précipité par l’acétate neutre et basique de plomb, puis concentré à consistance sirupeuse. Quant à l’urine, on la précipite directement par les sels de plomb , le liquide filtré est évaporé.

Comme caractères de la leucine, on peut employer 1" l’odeur d’amandes amères qu’elle développe sous l’influence d’un mélange de peroxyde de manganèse et d’acide sulfurique étendu (cyanure de butyle) ; 2" la réaction de Scherer. Il prescrit d’évaporer sur la lame de platine avec de l’acide nitrique et de chauffer le résidu peu coloré avec une goutte de soude caustique ; elle donne un liquide oléagineux plus ou moins coloré, peu adhérent à la lame et se réunissant sous forme de globule. (L’acide hippurique donne le même caractère.)

La tyrosine offre trois réactions assez caractéristiques : 1* Celle de B. Hoffmann. L’azotate de mercure colore en rouge à chaud une solution de tyrosine qui n’est pas trop étendue.

2° D’après Piria, la tyrosine mouillée au fond d’une ‘

NATIÂBES ORGANIQUES. 417

capsule avec de l’acide sulfurique concentré se dissout à une douce chaleur avec une coloration rouge fugace. La solution étendue d’eaq, neutralisée par le carbonate de baryte et filtrée, prend une coloration violette sous l’influence du perchlorure de fer, si toutefois il n’y a pas trop de leucine en présence.

3° La réaction de Scherer permet de déceler la tyrosine même en présence de la leucine, et de plus elle a l’avantage d’être extrêmement simple. La substance soupçonnée être de la tyrosine est chauffée, avec de l’acide nitrique sur une lame de platine, il se développe une couleur jaune orangé, le résidu de l’évaporation est brillant, jaune, transparent; par addition d’un peu de soude caustique, il devient jaune rougeâtre à froid et 6run noirâtre à chaud.

La leucine et la tyrosine ne peuvent se doser qu’ep nature .

La xanthine, l’hypoxanthine, la xanthoglobuline, la créatinine et la créatine n’ont aucune valeur séméiotique au moins jusqu’à présent ; nous indiquerons cependant en quelques mots comment il faut les rechercher dans un organe, dans le sang ou l’urine.

Le tissu haché et mélangé à du sable est additionné d’alcool, de manière à former une bouillie claire ; le mélange est chauffé et exprimé. Le résidu est encore digéré quelques heures avec de l’eau à 50° et exprimé de nouveau. Les deux liquides sont mélangés ; on distille l’alcool, on filtre, on concentre, et on précipite successivement par l’acétate neutre, par le sous-acétate de plomb, et enfin par l’acétate de mercure. Les deux deraiers préci-

478 CHIMIE PHYSIOLOGIQUE

pités décomposés par l’hydrogène sulfuré donnent des liqueurs A qui contiennent l'inosine, la xanthine et l’hypoxanthine’. Le liquide B, filtré de ces précipités, peut après concentration servir à la recherche de la créatirie et de la créatinine. (Staedeler.)

La solution A dépose les deux premiers corps après concentration et refroidissement. Leur séparation ne peut s’effectuer que par un procédé qui exige passablement de matière, elle est fondée sur l’inégale solubilité de leurs combinaisons chlorhydriques dans l'acide chlorhydrique, (le chlorhydrate d’hypoxanthine est pins soluble que l’autre). (Scherer.)

L’hy[ioxanlhine chauffée sur la lame de platine avec de l’acide nitrique donne un résidu blanc jaunâtre, mat, non boursouflé ; il se colore en jaune rougeâtre par la soude et par l'évaporation, il ne prend une teinte rouge violacé sur les bords que si l’hypoxanthine est mélangée de xanthine. Ce dernier corps donne dans les mêmes circonstances un résidu jaune intense après élimination de l’acide nitrique et une magnifique coloration violette par l’évaporation avec la soude.

La xanthoglobuline trouvée par Scherer dans le foie des ictériques, dans l’urine humaine normale, et par Fox dans le foie de bœuf normal, se présente sous forme de globules arrondis, jaunes, à texture cristalline. A froid, 3,800 parties d’eau dissolvent 1 partiede xanthoglobuline; il en faut 400 parties pour 1 partie, è chaud. Elle est soluble dans l’ammoniaque, d’où elle se dépose en globules durs, peu solubles dons l’acide chlorhydrique froid. Chauf-

MATIÈRIS 0R6AKIQCM. 47'J

fée sur la lame de platine avec de l’acide azotique, elle donne un résidu jaune^ mat, non transparent, qui devient rouge foncé par la soude à froid ; à chaud, la couleur di&paratl ou devient d’un brun sale. (Scrireb.) On ne connaît pas encore exactement sa composition.

Le liquide B dépose par refroidissement et lorsqu’il est suffisamment rapproché des cristaux de eréatine, et l’eaa mère additionnée de chlorure de zinc donnera des Cristaux de chlorure double de zinc et de créatinine. Le meilleur caractère de la eréatine est sa forme cristalliuc. Elle réduit à l’ébullition l’oxyde de mercure. Ses cristaux sont fixes et perdent leur transparence à 100°.

Pour la recherche de ces produits dans l’urine, on précipite de même et successivenaent par les deux acétates de plomb et l’acétate de mercure, etc. Dans le sang, on fera de même après coagulation de l’albumine. (Méthode de Staedeler.) Pour le dosage de la créatinine dans l’urine, Neubauer prescrit de rendre l’urine alcaline (300*°) par addition de lait de chaux, de précipiter les phosphates par le chlorure de calcium. Au bout de deux heures le liquide est filtré et évaporé rapidement au bain-marie presque à sec ; on mélange encore chaud k 40“ d'alcod à 95 °l,. Au bout de cinq heures on filtre en lavant le dépôt à l’alcool, on ajoute à la liqueur 0^‘,5 de chlorure de zinc dissous d’une densités 1,2. Le mélange est couvert et abandonné trois à quatre jours dans un endroit frais ; les cristaux formés sont recueillis sur un filtre taré, lavés à l’akool, séchés et pesés. Les autres produits (eréatine, xanthine, etc.) sont pesés en nature après cristallisation.

UtlMIB PaTSiOtOeiQCI.

4ao

Acide urique, sa recherche dans le parenchyme des organes, lesang et Furine. — Le tissu haché et traité par l’alcool, puis exprimé, est épuisé par l’ean ; le liquide est successivementprécipitéparracétateneutre.puisparracétate basique de plomb. Ce dernier dépôt est décomposé en présence de l'eau par l’hydrogène sulfuré, la liqueur filtrée dépose par concentration des grains cristallinsd’acideurique.

Dans le sang on opère de même après coagulation de l’albumine.

Dans l’urine la détermination est plus facile ; on évapore 100“ d’urine à sec, on lave à l’akool chaud, puis à l’eau acidulée avec de l’acide chlorhydrique. Le résidu représente l’acide urique qu'on peut en même temps doser en le recueillant sur un filtre taré, lavant à l’alcool et è l’éther et en séchant à H 0°.

Le meilleur caractère de l’acide urique, à côté de sa forme cristalline, est la manière dont il se comporte avec l’acide nitrique. Ces deux corps chauffés ensemble sur une lame de platine donnent im résidu rouge qui devient bleu violacé intense par addition de soude et à chaud.

Acide hippurique. — On n’a guère è le chercher que dans l’urine ; à cet effet, on mélange l’urino avec la moitié de son volume d’un mélange de2 volumes eau debaryle saturée et de 1 volume solution de nitrate de baryte saturée. Après filtration le liquide est exactement neutralisé avec de l’acide nitrique étendu et additionné de perchlorure de fer, neutre autant que possible. Le précipité jaune rougeâtre est de l’hippurate de fer. On peut le décomposer par l’ammoniaque, Qltrer, chasser l’exoès d’akali par l’éva-

HATIÈRBS ORGANIQUES.

poration, précipiter par l’acétate de plomb, décomposer l’hippurate de plomb par l’hydrogène sulfuré, filtrer et concentrer pour obtenir l’acide en nature et sous forme de cristaux. Dans ces essais il faut opérer sur l’urine fraicbe ; si elle a eu le temps de s’altérer, le précipité par le pcrchlorure de fer ne sera plus que du benzoate de fer. Les meilleurs caractères de l’acide hippurique sont ta forme de ses cristaux (prismes allongés), et sa décomposition en acide benzoïque, par l’ébullition avec de l’acide cblorhydrique.

Wreden dose l’acide hippurique au moyen d’une liqueur normale de perchlorure de fer.

Préparation de la liqueur normale. — On neutralise 0*',b d’acide hippurique pur avec du bicarbonate de soude, et on étend à 2o0". 50“ de cette solution contiennent 0‘',1 d’acide; on les mesure avec une pipette jaugée, puis on y verse avec une burette une solution de perchlorure de fer neutre, en essayant de temps en temps pour juger du terme de l’essai : à cet effet on met un morceau de papier josepb imhibé de cyanure jaune sur une assiette, on le recouvre d’un douWe de papier à filtre, et on le presse avec une baguette [trempée dans l’essai; une coloration bleue du papier intermédiaire indique un excès de fer en solution, et partant la précipitation complète de l’acide. Soit M, le volume du perchlorure employé (M doit être < 10"), il correspond à 0",1 d’acide hippurique. On l’étendra d’assez d’eau pour qu’il occupe un volume de 10" — 0,1 acide hippurique.

Dosaqedaîis P urine. — 60" d’urine sont précipités par

SI

CaiMlE PaV$IOLOGlQl'E.

4Si

30 ou 60" de la solution bai ytique précédente, selon l’étal de concentration ; on filtre et on mesure un volume correspondant à 30" d’urine (73" dans le premier cas, 100" dans le second); après neutralisation par l’acide nitrique étendu, l’essai se poursuit comme pour le titrage de la solution de fer; le maximum d’erreur que comporte ce procédé est de 13 milligrammes pour 50" d’urine. Celle méthode peut encore s’employer avecl’urme putréfiée, puisqu’un équivalent d’acide hippurique donne un équivalent d’acide benzoïque qui précipite la même quantité de fer.

Urée. — Nous avons à nous occuper en détail de la recherche et du dosage de l’urée dans l’urine, le sang et les liquides parenchymateux ou séreux, comme intéressant particulièrement le physiologiste et le médecin.

Pour démontrer avec certitude la présence de l’urée dans un organe ou un liquide, il convient d'isoler ce corps tout au moins sous forme de nitrate d’urée, et, si c’est possible, par l’intermédiaire de ce dernier à l’état d’urée pure. On arrive facilement à ce résultat, si la quantité de substance dont on dispose n’est pas trop minime, en décomposant parle carbonate de baryte les cristaux de nitrate d’urée, en évaporant à sec et en reprenant par l’alcool absolu. S’agit-il d’un organe, la matière hachée tinement est digérée pendant douze heures, avec deux fois son Volume d’alcool, le liquide exprimé est concentré à sirop, le résidu repris par l’eau est précipité par l’acétate elle sous-acétate de plomb, le liquide filtré débarrassé du plomb par l’hydrogène sulfuré est concentré à sirop, le résidu est repris par l’alcool absolu, et enfin le liquide alcooliitue concentré

MAnÈRES ORRANIOCES. 483

est additionné d’acide nitrique; le précipité de nitrate d’urée peut être examiné a«i microscope, transformé partiellement en urée ; sur la lame de platine il ne doit pas donner de résidu. M. J. Picard prescrit la marche suivante pour la recherche de l’urée dans le sang, ainsi que pour sa détermination quantitative. Le sang (t 00 à 150") est mélangé au sortir de la veine à son volume d’alcool fort (96 acidulé avec quelques gouttes d’acide acétique et chauffé au bain-marie. Le coaguliim exprimé dans une toile est délayé une seconde fois dans l’alcool et exprimé de nouveau. Les liquides sont évaporés rapidement an bain-marie avec addition de 2 à 3 grammes de plâtre. Le résidu est misé digérer avec de l’alcool filtré, et le liquide filtré est évaporé à sec ; le résidu traité par un mélange d’alcool et d’éther (2’’ alcool -)- 1 éther) lui cède de l’urée, des graisses, de l’extractif et des traces de sel marin; on évapore, on distille et on reprend par l’eau; les matières extractives sont précipitées par le sous-acétate de plomb ; le liquide filtré est débarrassé du plomb par l’hydrogène sulfuré et concentré ; il peut servir ators, soit au dosage de l’urée par le nitrate de mercure (voir plus loin), soit à la précipitation par l’acide nitrique. On a fait à ce procédé (Redlinghausen) le reproche de déterminer la transformation partielle de l’urée en carbonate d’ammoniaque, et de ne pas éliminer tout le sel marin qui gêne dans le dosage par la méthode de Liebig : il est en tous les cas trop long. Après la coagulation par l’alcool et l’évaporation, on pourrait reprendre par l’eau, précipiter par l’acétate et le sous-acétate de plomb. Le liquide filtré et débarrassé du

CHIMIE PUTSIOLOGtQDE.

plomb par l’hydrogène sulfuré serait alors évaporé, et le résidu repris par l’alcool absolu.

Rien n’est plus facile que de démontrer la présence de l’urée dans l’urine; il suffît de concentrer au sixième, et d’ajouter de l’acide nitrique pur, on verra se former un dépôt abondant de nitrate d’urée.

Les propriétés de l’urée qui peuvent servir à la caractériser le mieux sont : la forme cristalline du nitrate et de l’urée elle-même, la volatilité complète de ces deux produits sur la lame de platine ; sa précipitation par 1 acide nitrique, l’acide oxalique, le nitrate de mercure en solution neutre, et, en l’absence de carbonate d’ammoniaque, le dégagement des gaz azote et carbonique sous l’influence de l’acide nitreux ou hypochloreux (en l’absence des sels ammoniacaux).

Le dosage de l’urée se fait dans les liquides préparés comme il a été dit plus haut, par la méthode de Liebig, lorsqu’il s’agit du sang ou d’un organe.

Dosage de l'urée dans l’urine. (Méthode de Liebig.)

Les opérations à faire sont les suivantes :

1“ Mesurer 50" d’urine, ajouter 25" de solution barytique B, filtrer et essayer par une goutte de solùtion B si tout l’acide phosphorique est précipité ; si le liquide se trouble encore, verser 25" de B dans le liquide et fîltrer sur le même filtre, laisser égoutter sans laver.

2° Mesurer avec une burette de Mohr 1 5 ou 20“ de l’urine barytique, valant 10“ urine ordinaire (suivant qu’on a employé 25 ou 50" de solution B), laisser couler dans un vase à précipiter, neutraiiser avec de l’acide nitrique