TECHNIQUE

Les racines qui font l'objet de ce travail ont été étudiées depuis l'état primaire jusqu'à l’âge adulte ; des coupes ont été aussi faites dans les racines sèches du droguier de l’école de pharmacie.

IL est difficile de pratiquer des coupes dans les jeunes racines, à cause du peu de consistance des tissus. Il faut les durcir en les trempant pendant quelques jours dans l’alcool absolu. Mais il arrive souvent qu'elles se sont recourbées et tordues, elles se cassent dès qu’on veut les redresser. Pour parer à cet inconvénient, on doit les ramollir en les faisant macérer dans du grœænland.

Les racines sont ensuite placées entre deux morceaux de moëlle de sureau qu'on peut introduire dans un microtome. Puis on fait les coupes, soit transversales, soit longitudinales, selon le sens dans lequel la racine a été disposée.

Si c’est dans des racines sèches que l’on veut pratiquer des coupes, comme, par la dessiccation, les éléments anatomiques se plissent et se rétractent, on leur rend l'aspect qu'ils avaient à l'état frais, en faisant bouillir dans de l’eau distillée des fragments des organes que l'on veut examiner; quand ils sont suffisamment ramollis, on les laisse refroidir.

Si l’on remarque, après examen au microscope, que les tissus sont encore rétractés, il faut alors se servir du procédé

suivant qui est emprunté à M. le docteur Lemaire (1) :

(1) A. Lemaire, De la détermination histologique des feuilles médicinales. (Nancy, N. Collin, 1882.)

Je dne

« Un certain nombre de tranches sont mises dans de l’eau distillée additionnée de quelques gouttes d’une solution de potasse à 1/10, et contenue dans une petite capsule en porcelaine. L'appareil est chauffé. Grâce à cette opération, les cellules font disparaître les plis produits par la dessiccation. »

Les racines des Composées sont gorgées d’inuline, principe qui cristallise sous l’action de l'alcool et par la dessiccation. Les cristaux d’inuline gènent beaucoup l'observation. Pour les faire disparaître, j'ai profité de la propriété qu'a l’inuline de se dissoudre dans l'eau à 50° ou 55°.

Pour déterminer le rapport des éléments anatomiques, l'emploi des réactifs colorants est indispensable.

Les deux réactifs suivants ont été seuls employés :

1° La fuchsine dissoute dans l’ammoniaque, qui colore en beau rose les vaisseaux et les fibres (1).

2 La solution d’hématoxyline (2), qui teint en violet les membranes cellulosiques.

Pour colorer les cellules lignifiées d’une coupe par la fuchsine ammoniacale, il faut d’abord bien laver cette coupe dans l’eau distillée, puis on la trempe pendant quelques secondes dans la solution du réactif, on l’en retire, eton la remet dans l’eau. Au bout de quelques instants, la teinte rose apparait.

On agit de même pour l'hématoxyline; seulement on doit laisser dans le réactif la coupe qu'on veut colorer, jusqu'à ce qu'elle ait bien pris la teinte violette qu’il faut obtenir.

On peut, si l'on veut, faire agir sur une même coupe ces

deux réactifs ; le ligneux sera alors coloré en rose, et le bois

(1) Pour préparer la solution de fuchsine, on ajoute à un peu de teinture alcoolique de fuchsine, suffisamment d'ammoniaque pour obtenir une décoloration complète. (2) La solution d'hématoxyline se prépare en faisant dissoudre dans de l'eau une

certaine quantité de ce corps, et en ajoutant à cette solution une suffisante quantité d’alun pour la faire virer au violet.