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dont le degré d’acidité est connu. Nous allons voir: quelles sont les conditions expérimentales à remplir dans le cas du dosage de l'adrénaline dans les: glandes surrénales fraiches.

a) Extraction. Il faut tout d’abord extraire l’adrénaline, complètement et sans l’altérer. Seul un milieu acide est capabie d’effectuer une solubiïlisation complète de Fadrénaline, tout en évitant son oxvydation.

Deux facteurs ont été envisagés : la quantitc

d'acide à employer et la durée de l'extraction. . Le. premier est facile à résoudre. La réaction est optima pour. une faible. acidité (nous avons adopté l'acide sulfurique centinormal) et cette acidité sera en tous cas égale pour le tube témoin et le tube en expérience.

Comme BaAILZY, nous avons fixé la durée de j’extraction à 30 minutes. Plusieurs expériences nous ont en effet montré qu’au bout de ce temps, lextraction est complète, et que l’adrénaline commence à diminuer au-delà de cette durée.

Les chiffres suivants en sont une preuve : sur un liquide d'extraction d’une surrénale de mouton, on dose ladrénaline aprés 30 minutes, 5 heures, 24 heures de contact. Les chiffres du colorimètre indiquent clairement une perte de 10 %, après une ex--

traction de 24 heures.

Durée de la Chiffres du colorimètre

maceration Témoin Extrait 30° 20 PRES SA 20 25.5.

CES a

b) Dosage. Le liquide extractif est un milieu complexe. La réaction de Bailly ne va-t-elle pas être: modifiée ?

1. Les réactifs agissent sur l'extrait filtré, incolore. comme sur la solution FT. Le sublimé donne un louche, suivi d'un trouble après quelques minutes! aussi fera-t-on précéder le dosage au colorimètre d’une centrifugation où d’une filtration.

2. L'influence du facteur acidilé est réglée puisqu'on se trouve dans les mêmes conditions pour le témoin et l’extrait, tous les deux en solution sulfurique centinormale.

- Au contraire le facteur « durée ») n’est pas le même pour ia solution témoin et l’extrait de surré-nale fraiche.

Lorsqu'il s'agit de la solution pure d’adrénaline,. ou d'extraits obtenus à partir de surrénales, fraiches ayant subi l’action du vide ou d’une température élevée, ou bien de poudre de surrénale du commerce. le maximum d'intensité est atteint en 3 à 5 minutes. Au coniraire, l’extrait de surrénale fraîche ne l’acquiert qu'après 25 à 30 minutes.

MancEAU [94], LEULIER et GoJoN avaient déjà noté ceite différence de comportement entre la surrénale fraiche et la solution témoin, ou la poudre de surrénale.

‘Aussi ne faut-il colorimétrer qu'après 25 à 30 minutes, et, en raison du manque de stabilité des colorations, le témoin ne peut étre mis en train qu'avec un décalage d'au moins 20 minutes sur l'ex-

trait, de facon à comparer deux intensités maxima

TE

Au contraire, la pulpe surrénale avant subi une aclion physique, comme celle du vide, de la chaleur ou du froid, se comporte comme la solution témoin, ou les poudres surrénales. Son maximum d'intensité est atteint en 3 à 5 minutes : la coloration faiblit ensuite rapidement, ainsi que le prouvent les chiffres suivants qui se rapportent à une pulpe ayant subi

l'action du vide sec pendant 24 heures.

Lecture après Adrénaline 0/00 de médullaire FH SREE AE 5’ |, 307 ge 7.40 7.20 15° 7.65 7.82 5.70 5.40 | 30° 4.30 5 4.10 4.30 |

Le fait est intéressant à signaler : les auteurs qu ont étudié l’adrénaline- virtuelle par la méthode de BaAILY (MOURIQUAND, LEULIER et Gogo [70], PAGET et LoHÉAC [114]) ne l’avaient pas remarqué. L’apparition très rapide de la coloration nous donnera un argument permettant d’étaver notre opinion sur l'état de l’adrénaline virtuelle.

3° L'emploi de la réaction de BAILLY comme méthode de dosage de l’adrénaline dans la surrénale est dominé par la question de la spécificité de la réaction.

Certains Pont accusée de manquer de spécificité. (MOLRELEI et Mazzocco |95]) et cest pourquoi la notion d’adrénaline virtuelle de MouriquaND et LEu- LIER à rencontré des adversaires sous le prétexte que

cette conception reposait sur les chiffres donnés par

la méthode de Barziy, MoiiNeLrr ct Mazzocco

95 | réfutent donc les conclusions de MouriQuanb et LEU- LIER : «il est évident, écrivent-ils, que par ce procédé l’intensité de la coloration n’est point due après 24 heures à la libération d’adrénaline, mais qu’elle est liée à la présence d'une substance formée dans ces conditions ».

— MouriIQUAND et LEULIER [103} ont essayé la méthode de BaAILLY sur une foule de substances organiques dont la plupart sont susceptibles de prendre naissance au cours de la putréfaction. Les solutions pures de toute une série de corps : tyrosine, alanine, phénylalanine, ornithine, histidine, tryptophane, bé- ‘taïne, lvsine, proline, cadavérine, leucine, créatine, cystine, sarcosine, arginine, sérine, valine, méthylguanidine, ainsi que les diphénols, pyrocatéchine, -résorcine, hydroquinone, donnent ou bien une réaction de BaiLLY négative, c’est-à-dire aucune coloration, ou bien des colorations diverses, sans rapport aucun avec celle que présente ladrénaline.

—— De même encore, les macérations de divers tissus (hépatique, splénique, rénal, entérique, hypophysaire, ovarien) frais ou desséchés pendant 24 heures n’ont donné aucune coloration par la méthode de Baïizzy. MouriqQuaxp et LEULIER [103] l'ont signalé, et nous l’avons à nouveau noté nous-même.

Sans doute, ne peut-on apporter qu’un faisceau de preuves négatives, mais elles nous ont paru suflisantes pour étaver la spécificité de la méthode. « Aucun fait chimique n’est venu infirmer cette réaction » (MOURIQUAND et LEULIER |[103]) qui doit être considé-

re

rée, dans les conditions expérimentales où nous nous: sommes placé, comme caractéristique de l’adrénaline:

—— Bien plus, cette méthode n’est certainement pas influencée par les produits de la putréfaction, puisqu’elle permet de suivre la disparition progressive de l’adrénaline dans la cadavérisation expérimentale (MoURIQUAND et LEULIER [99], LANGERON, PAGET et LOHÉAC |81]). Des expériences nouvelles nous ont permis de nous en rendre compte et de signaler qu’il en est tout autrement pour la méthode à l’iode. Nous résumons toutes nos observations à ce sujet dans le tableau suivant; elles concernent des lots de capsules identiques, conservés plus ou moins longtemps en.

milieu chloroformé et acide.

Apres seJOur A l'ecuve à

(41° dans l’eau physiolo- Après À la mort gique chloroformée séjour de | de acidulée 24 h. dans l'animal pendant le vide sec SR ER ANT ES 24 h. 5 jours À

A GT PP re 2 ET et NN) iode sublimé!iode subliméliode subliméliode subl!imé

Corticale

Bœuf : + .-.10.62:%0.501 (0.50 0.30.) 0/44% 0 Üü.45 0.40 Glande ent.

Vertes COAST OM OS DRE) Glande ent. |

NÉAUMRTE ONE ES AIURS NE CMOS ST TS RIESS

Variations du contenu adrénalinique des surrénales sous l'action de la chaleur douce et prolongée et du vide sec. Comparaison des résultats de la méthode à l'iode et de la: méthode au sublimé.

Lo

Comme nous lavions fait pour une solution pure, nous avons vérifié, pour les extraits, la sensibilité de la réaction et son exactitude, Ces caractères sont très satisfaisants.

Une fois en possession de tous ces facteurs et connaissant le déterminisme de la méthode de BaAILLY, nous Flavons appliquée au dosage de l’adrénaline dans diverses circonstances. Elle nous a permis au cours de nombreuses expériences d'étudier étroitement non seulement la répartition de ladrénaline dans la capsule surrénale des Mammifères, mais encore la libération de l’adrénaline surrénale apres

la mort.

B. APPLICATION DE LA METHODE DE BAILLY AU DOSAGE DE L’ADRENALINE LIBRE ET VIRTUELLE

Nous avons dosé l’adrénaline dans les deux zones distinctes des surrénales de divers Mammifères : nous avons voulu évaluer non seulement l’adrénaline décelable à la mort de l’animal, mais encore l’'adrénaline masquée qui n’est libérée qu'après la

mort.