EPAISSEUR S

2 cm 3 cm 4 cm 5 cm de la couche 1 cm D en p. 100... 50 25 12%; 6,25 3,125 D en fraction 0,5 0,25 0,125 0,0625 0,03125

décimale ....

D exprimé par les puissances de la 1 2 3 transparence (30) NE Se L CURE pour 1 cm...

Cet exemple permet de reconnaître la loi suivante : si D, est la transparence observée pour une épaisseur de couche de 1 cm., la transparence Ds observée pour une épaisseur de couche de s centimètres est :

Gi) Ds = (D:)°

AU

En prenant les logarithmes des deux membres de cette équation, on aura :

(2) log Ds — s log D,

La transparence D lue sur le tambour du photomètre n’est donc pas une fonction linéaire de l’épaisseur de la couche s. La loi de proportionnalité ne vaut que pour les logarithmes.

De l’équation (2), on tire :

(3) 10 D, — log Ds

La transparence Ds est toujours plus petite que 1, le logarithme de cette valeur serait, par conséquent, toujours négatif. Pour éviter l'emploi des nombres négatifs, on utilise le logarithme changé de signe, et l’on appelle extinction E cette nouvelle grandeur.

É = (— log D)

L’extinction, comme la transparence, correspond à une certaine épaisseur de couche.

On appellera coefficient d'extinction « K » la valeur de l'extinction pour une épaisseur de couche de 1 cm. Les valeurs de l’extinction (et du coefficient d'extinction) se calculent à partir de la transparence mesurée au moyen des tables de logarithme, ou se lisent directement sur les tables dressées par Purrricx. Les modèles récents de photomètre portent sur leurs tambours une graduation en extinction, comme nous l’avons signalé plus haut.

Détermination de la concentration.

On peut déterminer la concentration, soit par multiplication des lectures photométriques par un coefficient numérique, quand la loi de BEER s’applique; soit à l’aide d’une courbe d’étalonnage, ou ce qui revient au même, avec des tables d’étalonnage.

Détermination de la concentration à l’aide de courbes d'étalonnage.

Ce procédé est très commode. Il suffit d'effectuer une fois pour toutes, des mesures sur une série de solutions de concentration connue convenablement échelonnées. On porte ensuite les concentrations en abscisses sur du papier quadrillé en millimètres et les lectures correspondantes en ordonnées, et l’on relie les divers points par une courbe. Par précaution, il est prudent d'inscrire aussi sur cette feuille l’épaisseur efficace des cuves et le filtre à l’aide duquel la courbe d’étalonnage a été établie.

Lorsqu'on établit la courbe d’étalonnage avec l'extinction E ou le coefficient d'extinction, la ligne reliant les divers points est une droite passant par l’origine, si la loi de BEER est valable.

Détermination de la concentration à l'aide du calcul.

Suivant la loi de BEER, les coefficients d’extinction de deux solutions de la même substance ont entre eux le même rapport que les concentrations. Si K, est le coefficient d’extinction d’une solution de concentration connue c;, on peut calculer la concentration €, d’une solution donnant, avec le

ds

même filtre, le coefficient d'extinction K, au moyen de la formule suivante :

co

Mais le calcul de la concentration au moyen de cette formule n’est possible que si la loi de BEER est rigoureusement applicable; sinon le dosage devra être fait avec des courbes d’étalonnage déterminées empiriquement.

Technique du dosage de l'acétone dans l'urine selon Urbach.

Cet auteur ne donne pas de technique de dosage de l’acide B-hydroxybutyrique. La condensation de l’acétone et de l’aldéhyde salicylique s’effectue en milieu alcoolique, comme dans la vieille méthode de CzonKka [11].

Voici le mode opératoire donné par l’auteur : à 100 cm° d'urine prélevée sur les urines de 24 heures, on ajoute, dans un ballon à distiller, 200 cm° d’eau distillée et 5 cm° d'acide sulfurique concentré. On distille pendant 20 minutes. Le distillat est reçu dans un ballon à long col garni préalablement de 25 cm° d’eau distillée. On complète le distillat à 200 cm. On en prélève 2 cm*, que l’on mélange à 2 cm* de lessive de potasse à 63,6 gr. p. 100 cm* et à 1 cm° d’une solution d’aldéhyde salicylique à 10 p. 100 en poids dans l’alcool à 95°. On chauffe ce mélange au bain-marie à 50° C pendant exactement 20 minutes (pas davantage), en agitant fréquemment jusqu’à apparition de la couleur rouge. On refroidit, et l’on complète à 15 cm.

On procède ensuite à l'examen photométrique avec filtre S-53, sous une épaisseur de couche de 20 mm. puis, à titre de contrôle, avec filtre S-50 sous une épaisseur de couche de 5 mm. avec une solution de compensation préparée de la manière suivante : 10 cm° de solution alcoolique d’aldéhyde salicylique + 20 cm° de lessive de potasse, et 120 centimètres cubes d’eau distillée.