PRINCIPALES RÉACTIONS COLORÉES
1° En solution neutre ou légèrement acide, le perchlorure de fer la colore en vert émeraude, virant au violet et au rouge par addition ménagée de potasse. Les colorations sont fugaces.
2 Les oxydants (chlore, iode, ferricyanure, nitroprussiate de soude et ammoniaque, action de l’air à la longue) colorent l’adrénaline en rouge, en violet et finalement en brun. Il en est de même avec l’eau iodée ; si on enlève l'excès d’iode par l’éther, la sensibilité est de 1/150.000°.
+ Le chlorure mercurique, en solution dans l’eau ordinaire, donne une coloration rouge (nous utiliserons cette réaction pour tenter un dosage colorimétrique dans les capsules surrénales du cobaye).
4° L’acide phosphotungstique, préparé suivant les indications de FoLiIN, donne avec l’adrénaline une coloration bleue intense. La sensibilité est de l’ordre de 1/3.000.000°, malheureusement cette réaction est commune à l’acide urique avec une sensibilité moindre toutefois (1/1.000.000°). :
Enfin, certaines diastases oxydantes (poche à encre de la sèche, tyrosinase de la russula délica) donnent une
coloration rouge.
(1) D’après HuGOUNENQ, Précis de chimie physiologique et pathologique. Collection TESTUT.
* ARTICLE II
Technique générale suivie pour lextraction et le dosage de l’Adrénaline dans les Capsules surrénales
1° Procédés d'extraction.
2° Dosage colorimétrique dans les capsules surrénales
fraîches du cobaye.
1° Procédés d'extraction
Ces procédés consistent en principe à broyer les capsules surrénales fraîches en présence d’eau acidulée par les acides sulfurique et chlorhydrique.
Gabriel BERTRAND (15) emploie l'acide oxalique en présence d’alcool à 95°. Nous donnons ici le principe de sa méthode : la liqueur traitée par l'acide oxalique et l’alcool, puis filtrée, est concentrée dans le vide pour chasser l’alcool, lavée à l’éther de pétrole, précipitée exactement par l’acétate de plomb et centrifugée. La solution limpide, faiblement colorée en jaune, est distillée dans le vide jusqu’à réduction à 100 cm° et additionnée d’un petit excès d’ammoniaque; l’adrénaline précipite à l’état cristallin. Elle est purifiée par reprise au moyen de l’acide sulfurique à 10 % et de l’alcool et reprécipitée par l’ammoniaque. L’adrénaline est alors lavée à l’eau et à l’alcool et desséchée dans le vide.
Il n’est pas nécessaire de suivre rigoureusement cette méthode si l’on veut simplement faire un dosage colo-
rimétrique de l’adrénaline. Octave BaiLzx (6) a donné
récemment, dans le Journal de Pharmacie et de Chimie, une méthode permettant le dosage rapide de l’adrénaline dans les poudres de surrénales. Cette méthode utilise une réaction colorée que GRIMBERT et LECLÈRE (70) avaient proposée pour la caractérisation de l’apomorphine en 1915 et que DENIGÈS (48), en 1918, a étendue à la recherche et au dosage colorimétrique de l’adrénaline. La sensibilité de cette réaction est de l’ordre du millionième.
Voici la technique à laquelle nous nous sommes arrêtés pour faire nos dosages colorimétriques dans les capsules surrénales du cobaye. Les chiffres trouvés figurent plus loin à la fin du chapitre.
Ces chiffres nous paraissent un peu faibles. Nous reprendrons plus tard la question afin de savoir si l’ex-
traction de l’adrénaline a été bien complète.
2° Dosage de l’adrénaline dans les capsules
surrénales fraîches
Les capsules pesées sont broyées avec dix fois leur poids de sulfate de soude desséché jusqu’à disparition totale des surrénales. On ajoute trois gouttes normales d’acide sulfurique normal, puis 4 cm° d’eau distillée ; on broie et on introduit le mélange dans un petit Erlenmeyer bouché à l’émeri. Avec 4 autres cm° d’eau distillée, ajoutés par petites portions, on rince le mortier et on verse dans l’Erlenmeyer. On mélange et on laisse un quart d'heure en agitant. On complète ensuite à 25 cm°
avec de l’eau distillée, on agite de temps en temps en
2 PERS laissant en contact 1/4 d'heure. Au bout de ce temps, on filtre.
On prélève 10 cm‘ du filtrat que l’on met dans un tube à essai contenant 1 gr. d’acétate de soude. On agite jusqu’à dissolution ;: on ajoute trois gouttes de solution de bichlorure de mercure à 5 %, on retourne le tube deux ou trois fois. Une teinte rose se forme assez lentement. On compare, après quinze minutes, avec une solution
titrée d’adrénaline à 0,01 %.
Adrénaline à 0,01 %...... 100 cm° Alcool à 99262 Re et re US OU CALE Acide sulfurique normal... 1 Cm Eau disfillées 02 0e Q. S. p° 100 cc.
MopDiFiCATION : En diazotant la naphtylamine 4; et copulant avec l’adrénaline on obtient une teinte ocre susceptible d’être appliquée au dosage de l’adrénaline dans les 25 cm° de filtrat avec plus de sensibilité que la réaction à l’acétate de soude et au sublimé corrosif.
Cette réaction obtenue par M. Jean REY, pharmacien, élève à l'Ecole du Service de Santé, n’a pas pu être étudiée à fond ; elle le sera au cours des mois qui vont suivre, ce qui permettra d’en déterminer exactement la valeur.
Voici, actuellement, le mode opératoire suivi :
On utilise une solution de naphtylamine z
Naphtylaminez scie 0,1 Aeide aceliqué. st enan 20 cc.
Faudistitée res; rs ee 5400 CT:
et une solution de nitrite de potassium à 10 %.