CHAPITRE IV Premiers essais sur milieux dissociés

En Radiothérapie, GLOCKER a émis l’hypothèse que l’action biologique des rayons sur des éléments cellulaires est en relation avec la quantité des rayons absorbés; cette quantité serait ellemême dépendante du poids atomique de la substance en expérimentation et d’autant plus grande que ce poids atomique est plus élevé. Se basant sur cette théorie, ELLINGER et GANS ont étudié s’il était possible d’augmenter l’action des rayons X et de localiser celle-ci sur les parties malades en introduisant dans les tissus des substances à poids atomiques élevés. Les auteurs ont donc introduit dans les tissus des sensibilisateurs qui agissaient surtout par leur rayonnement secondaire. Employer dès à présent ces méthodes, aurait compliqué nos recherches; en effet, l'influence directe des éléments à poids atomiques élevés comme l’uranium, le thorium, le plomb, sur les microorganismes est connue; par quel moyen alors différencier l’action du radium et l’action de ces agents chimiques? Il fallait donc encore renoncer à cette méthode et résoudre le problème d’une autre manière.

GRŒDEL prétend que l’action des rayons ionisants sur les cellules se manifeste à travers le milieu qui les environne; selon lui, elle dépendrait surtout de ce milieu. Les travaux de SCHNEIDER, effectués pour vérifier ces hypothèses nous ont alors donné l’idée d'étudier l’action du radium sur l’Aspergillus fumigatus en culture sur des milieux dissociés. Afin d’obtenir un maximum de dissociation moléculaire, nous avons employé pour nos premiers essais le chlorure de sodium, car ce sel possède à la fois un grand pouvoir électrolytique et est sans influence prononcée sur les champignons inférieurs, de plus sa présence n’occasionne pas de rayonnement secondaire.

Pour être fixé sur la concentration de la solution de chlorure de sodium à employer, il nous fallait considérer deux conditions essentielles : tout d’abord un maximum de dissociation du milieu, ensuite un optimum de croissance et de fructification de lorganisme. |

Calcul du degré de dissociation du milieu. — Te rapport de la conductibilité d’une solution donnée à la conductibilité maxima est égal à la partie dissociée en ions du produit dissous. Au moyen d’un certain nombre de mesures effectuées sur des solutions d’un corps à des concentrations différentes on peut donc trouver la conductibilité maxima en construisant la courbe correspondante.

Si nous désignons par À v la conductibilité d’une moléculegramme du produit dissous dans v litres d’eau et par À # la conductibilité de la même quantité à une dilution infinie, nous aurons :

À V 12 ÿ ; ; = — partie dissociée en ions du produit.

Mais À v et À + dépendent de la concentration de la solution, du solvant et de la température.

Nous employons une solution aqueuse à + 32° et nous obtenons pour les concentrations différentes :

10 N aNe À cn 0 97 147

La dissociation de Na C1 normal à + 320 est donc

Sel ds pe 66 À © 147

La solution normale de Chlorure de sodium renferme 58,5 grammes de chlorure de sodium par litre, c’est-à-dire 5,85 pour 100; la solution demi-normale contient 2,925% de Na Cl par litre; la dissociation de cette solution est à + 320 environ de 0,7 ou autrement dit: pour 100 molécules de Na CI, 70 molécules sont dissociées en ions Na et Cl. Elle nous donne donc une dissociation très favorable. De plus son pH est très voisin de celui de notre milieu non dissocié (pH — 4,8).

Pour vérifier nos hypothèses nous avons constitué une gamme de milieux à doses croissantes de 0,5 % jusqu’à 10 % de chlorure de sodium; nous y avons ensemencé l’organisme en essai et procédé journellement à des examens macroscopiques et microscopiques. Sur ces milieux nous avons constaté les faits suivants après 6 jours de culture :

Milieu : 0,5% jusqu’à 2% : Bon développement avec voile à la surface du milieu, dont part dans la profondeur du liquide un mycélium à filaments enchevêtrés d’aspect blanc, ouaté.

Milieux 3% : Très bon développement; voile très épais ne formant presque pas de mycélium dans la profondeur du milieu; appareils reproducteurs décelables le quatrième jour, d’aspect normal.

Milieu 4% et 5% : Développement plus faible.

…. Miheu 6% et 7% : Développement très faible, voile à peine visible; mycélium nuageux dans la profondeur du milieu.

Milieu 8% à 10% : Développement presque nul.

Ainsi c’est le milieu renfermant 3%, de chlorure de sodium qui nous a donné un maximum de croissance et de fructification. Pour toutes ces raisons nous avons alors résolu d'employer comme milieu dissocié des solutions de glucose et de saccharose renfermant 3% de chlorure de sodium. Le mode opératoire était identique à

celui employé dans le chapitre précédent et nous avons effectué nos recherches de nouveau par la voie de l’irradiation discontinue dont les périodes étaient réparties comme pour les milieux non dissociés et par le moyen d’irradiations massives et continues pendant 24 heures à la dose de 7,2 millicuries à 2 où 3 millimètres de distance entre les tubes de radium et les cultures. Les résultats

obtenus dans ces expériences sont encore exprimés dans le tableau suivant.