PASSAGE DU SPIROCHÈTE A TRAVERS LES FILTRES BACTÉRIENS

Le passage à travers les bougies filtrantes des spirochètes est un fait extrêmement discuté, nié même par certains auteurs. [l semble cependant démontré, à l'heure actuelle, que le leptospire de Inata et Ido possède des formes ültrables. Ces auteurs réussirent, après filtration d'une émulsion de foie riche en spirochètes à travers des bougies Berkefeld V, N, W, à inoculer avec succès 15 cobayes sur 28 essais. Martin et Pettit, en utilisant la bougie Chamberland L,, obtinrent des résultats comparables etse demandèrent si le spirochète ne passait pas à travers les bougies filtrantes sous la forme des corpuscules qu'ils avaient remarqués dans leur culture.

Dans toutes nos expériences les bougies utilisées étaient les bougies L,-L, ; la bactérie associée servait de bactérie-contrôle, des essais préliminaires nous ayant montré qu’elle était retenue par le filtre.

La filtration du spirochète que nous étudions dans ce mémoire ne peut être réalisée qu'à condition de suivre une technique rigoureuse; toutes les cultures ne contiennent pas des formes filtrantes (il n’y a qu’à se reporter à l'étude du cycle évolutif de cet organisme pour le comprendre), seules les granules sont susceptibles de passer à travers les filires. I faut mouiller abondamment le filtre et diluer la culture ; mais il ne nous parait pas nécessaire de por:er le taux de dilution au delà du 1/15°. L'on doit filtrer sous basse pression. Le filtrat doit

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ris

être réparti dans le minimum de tubes sous huile de vaseline.

L'étude de la filtration de ce spirochète révèle un certain nombre de faits importants:

1° Que l’on prenne du milieu de culture neuf f/tré et qu'on le centrifuge à grande vitesse ; l'examen du culot de centrifugation ne montre que quelques corpuscules animés de mouvements browniens.

Si l’on répète cet examen avec le filtrat d’une culture de spirochètes diluée pour la filtration au 1/10°, on cest frappé, malgré la dilution, de l'abondance des granules ;

2° Le filtrat est divisé en deux parties égales réparties dans les mêmes conditions, dans des tubes identiques sous huile de vaseline, par exemple dans 12 tubes ; six sont laissés tel que, dans les six autres on ajoute, avec un fil de platine, une lrace de culture en milieu liquide de la bactérie associée, préalablement isolée à l’état de pureté depuis plusieurs mois.

Dans les tubes ne contenant que du filtrat seul, on assiste vers la troisième semaine à une modification de l'aspect du milieu, dans lequel l'examen à l’ultra-microscope révèle des corpuscules de dégénérescence analogues à ceux que nous avons déjà décrits.

Parmi les tubes dans lesquels on a ajouté de la baetérie, il en est dans une proportion variable de 1 à 2 sur 6, dans lesquels l'examen révèle au bout d’un mois la présence de spirochètes typiques ne différant en rien des spirochètes normaux.

Nous avons pu réussir, deux fois sur lrois essais, le passage à travers le filtre du spirochète étudié ici.

Cet organisme possède donc des formes filtrables et il suffit, pour voir réapparaitre les formes typiques, de réajouler la bactérie avec laquelle il vit en symbiose. Indiquons de suite que nous apporterons encore, comme preuve de l'existence de ces formes susceptibles de passer à travers un filtre, le pouvoir pathogène de ce filtrat.

Ayant démontré la nécessité de la présence de la bactérie, nous avons cherché à vérifier quelle était la substance nécessaire au développement des spirochètes. Nous avons filtré Ja culture de spirochètes, après dilution au 1/10 dans le filtrat d’un milieu de culture préalablement ensemencé avec la bactérie seule, dans les conditions indiquées plus haut. Nous

es

n'avons obtenu aucune culture de spirochètes après passage à la bougie filtrante : les produits de sécrétion bactériens ne sont donc pas la condition nécessaire et suffisante pour permeltre l’évolution du germe.

De même l'addition de bactéries tuées par un chauffage à + 56° après filtration ne permet aucun développement. La présence de la bactérie vivante est indispensable au développement en cullure de ces spirochètes.

La possibilité d’avoir comme matériel d'expériences un filtrat contenant des granules vivants susceptibles de déterminer la maladie nous a incité à essayer de préciser davantage les propriétés biologiques de ce filtrat.

Ce filtrat est tué par un chauffage à 56°, il ne contient donc pas de formes de résistance. Les éléments contenus dans ce filtrat sont fragiles. Une expérience le démontre : il suffit dans un essai de filtration de retarder l'addition de la bactérie de deux jours, pour empècher tout développement des spirochètes.

On observe au bout d'un mois dans les filtrats des corpuscules analogues à ceux déjà indiquées au moment de l'étude du spirochète visible et colorable; nous Les considérons comme des formes de dégénérescence, car si on ajoute à cette date la bactérie on n'obtiendra jamais, quelle que soit l’abondance des corpuscules, une culture de spirochète.

De l’ensemble de ces expériences, un fait se dégage : le spirochète possède des formes filtrables granulaires et la présence d'une bactérie vivante est indispensable à son développement in vitro.

Ayant terminé l'étude de cet organisme et avant de commencer l'étude de la bactérie associée, nous devons essayer de le classer parmi les organismes similaires : au point de vue morphologique il rappelle, avons-nous dit, Jusqu'à un certain point le 7reponema pallidum et le spirochett cumiculi; une propriété biologique le différencie : la résistance à la saponine. Sans créer un genre spécial, et étant donné nos connaissances actuelles sur les organismes :spiralés, nous croyons pouvoir le classer dans les Spirochétidés.