II. — Préparation du Pus aseptique

1° Méthode de Hiss et Zinsser

Paicip HansoN Hiss et HANS ZINSSER pratiquent chez des chiens, des lapins ou des cobayes une injection intrapleurale bilatérale d’aleurone. Ils obtiennent au bout de vingt-quatre heures, un liquide trouble et épais, souvent sanguinolent, qu'ils retirent par ponction pleurale avec une aiguille de fort calibre. La quantité de liquide recueilli varie, chez les lapins, de trente à soixante centimètres cubes. Après avoir procédé à une bonne centrifugation et décanté le sérum, le culot cellulaire est lavé dans une solution de chlorure de sodium à 0,85 pour 100.

Pour obtenir la mise en liberté des extraits cellulaires contenus dans les globules de pus Hiss et ZINSSER soumettent ensuite leur produit à des congélations successives, suivies de dégel rapide.

Abandonnant d’ailleurs bientôt cette méthode, ils se contentent d’agiter très énergiquement, et pendant suffisamment longtemps, le culot cellulaire, dans une égale quantité d’eau distillée; le liquide obtenu est porté, pen-

dant quelques heures à la température de 37°5 C., puis conservé à la glacière jusqu’à son emploi. Les auteurs font remarquer que les leucocytes du chien et ceux du lapin se comportent différemment en présence de l’eau distillée. Les leucocytes du lapin ne sont pas transformés d’une façon marquée, quant à leur morphologie tout au moins, par leur passage et leur séjour dans l’eau distillée; ils ne présentent aucune tendance à la lyse et l’aspect macroscopique de la préparation ne devient jamais gélatiniforme. Les leucocytes du chien, au contraire, paraissent se dissoudre dans l’eau distillée, en donnant naissance à une liqueur homogène ne précipitant que très peu. Les leucocytes du lapin, eux, ne peuvent être pareillement transformés qu’en présence d'ammoniaque ou d’une solution concentrée de chlorure de sodium,

2° Méthode de Bridré

BRIDRÉ, désirant obtenir un pus rigoureusement stérile, exempt de tout corps microbien et de toute toxine, pense que le pus d’abcès de fixation réalise ces conditions. Il crée donc, chez le cheval, des abcès artificiels en injectant, sous la peau du poitrail, un centimètre cube et demi d'essence de térébenthine qui provoque en quatre ou cinq jours la formation d’une collection purulente. Après rasage des poils, badigeonnage éner-

gique de la peau à la teinture d’iode, l’auteur ponctionne l’abcès soit à l’aide d’une aiguille de très fort

pe

calibre, soit à l’aide d’un trocart. Il recueille le pus dans un récipient stérile et le dilue dans de l'eau physiologique phénolée à 5 pour 1000 pour assurer la conservation du produit.

Le rapport dans lequel est faite la dilution est le suivant :

PusEiie MO SPA RP RIRE 6 cms Eau physiologique phénolée ....... 24 cms

Il s’agit donc d'une dilution au cinquième.

BrocQ-RoussEu, comme BRIDRÉ, recueille le pus provenant d’abcès artificiels à l'essence de térébenthine chez le cheval. Sa technique est sensiblement la même que celle de BRinrÉ, créateur de la méthode; elle en diffère toutefois par le titre de la dilution dans l’eau physiologique, et présente, en outre, sur elle, l’avantage de réduire au minimum la teneur en élément étranger, le phénol; en effet, l’auteur ramène de 5 pour 1.000 à 1 pour 1.000 le titre de l'eau physiologique phénolée dans laquelle il opère la dilution du pus.

Voici d’ailleurs comment il procède :

Il fait choix, comme sujet fournisseur, d'un cheval adulte, préalablement éprouvé avec succès à la malléine, ne manifestant aucun signe de maladie et présentant une température normale.

Après avoir coupé les poils au niveau du poitrail, il pratique, à dix centimètres au-dessous de la carène sternale, une injection de deux centimètres cubes d’essence de térébenthine dans le tissu conjonctif souscutané.

Le lendemain, la région est le siège d’une énorme luméfaction avec œdème déclive infiltrant les mem-

ol

bres antérieurs. Au bout de quatre à cinq jours, le pus est collecté dans une poche fluctuante. Il procède alors à la récolte, à l’aide d’un appareil aspirateur de Potain muni d’une aiguille de fort calibre (trois millimètres), dont le flacon garni de billes de verre, contient une quantité connue d’eau physiologique phénolée à 5 pour 1.000, le tout stérilisé à l’autoclave.

Après avoir rasé la peau, à la partie inférieure de la poche purulente, il désinfecte à la teinture d'iode et implante l'aiguille reliée à l’appareil de Potain où le vide a été fait. Le pus s'écoule dans le flacon. On recueille suivant les sujets de cinquante à deux cents centimètres cubes de pus. Le flacon est alors porté à la glacière où il séjourne pendant huit jours, au cours desquels il est soumis, journellement, pendant dix minutes, à une forte agitation.

Il dilue ensuite le mélange de manière à étendre le pus vingt-cinq fois, par addition d’eau phénolée au titre nécessaire pour que la concentration phéniquée de la dilution soit ramenée à 1 pour 1.000.

Le mélange, bien homogénéisé par agitation, est alors réparti en ampoules, aussitôt fermées à la lampe. Toutes ces opérations sont effectuées, bien entendu, sous le convert d’une asepsie rigoureuse.

La stérilité du pus est éprouvée, avant la répartition en ampoules, par l'examen direct au microscope, par les cultures en milieu aérobie et anaérobie, par inoculation du culot de centrifugation de vingt centimètres cubes à un cobaye.

C'est de cette dernière préparation que nous avons fait choix pour nos essais personnels de pyothérapie,

OS

grâce à l'obligeance de M. Broco-RoUssEU ; cette préparation paraissait, en effet, nous donner les garanties

les plus nombreuses de sécurité.