DANS LE MILIEU

ROSENTHAL, en 1903 et 1904, obtient le ‘premier des effets toxiques avec un filtrat de culture en bouillon. Cet auteur écrit : « Le meilleur milieu est un bouillon Martin légèrement alcalin. Avec une réaction acide, neutre, ou très alcaline nous n'obtenons que très peu de toxine ».

Top», en 1904, dit que plus le milieu est alcalin, plus la toxine est active. KLEIN, reprenant ces expériences en 1906, conclut à la possibilité de la formation d’un voile en bouillon Martin légèrement alcalin et obtient ainsi, plus rapidement un liquide aussi toxique que les filtrats des auteurs précédents. Lupke, la même année, après avoir essayé divers milieux, conclut que les résultats les plus favorables ont été obtenus avec des bouillons alcalins.

Doœrr, apporte plus de précision et publie, en 1906 également, que : « Pour obtenir l’optimum de toxine il faut ajouter au bouillon neutre 30 ce. de NaOH à 10 % par litre ». En 1907, cet auteur publie un ouvrage mettant la question au point. Depuis ce travail des méthodes nouvelles de dosage de la réaction des milieux ont permis d'y apporter plus de rigueur mais le principe ainsi que les résultats n’en ont été que confirmés. |

DoœrR répartit un même milieu dans des flacons semblables. Il en acidifie un, neutralise un second et alcalinise un troisième (indicateur : phénolphtaléine). Il constate qu'après divers temps de culture, c'est toujours le milieu alcalin qui est le plus toxique. Poursuivant ses recherches, il prépare une grande quantité de bouillon qu'il amène à la neutralité (indicateur : phénolphtaléine), puis répartit également son milieu dans cinq ballons. Dans le ballon À il ajoute 1 gr. de NaOH par litre, dans le ballon B 3 or., dañs le ballon C 4 gr., dans le ballon D 6 gr. et dans le ballon E 10 gr. Tous sont ensemencés de la même façon et mis à 35°. Des prélè-

vements sont faits à différentes dates et les doses mortelles optima des filtrats se montrent les suivantes : pour le milieu À : o ce. 3 par kilog. d'animal ; pour le B : o cc. o1 ; pour C : o cc. 05 et pour D: o cc. b. Le ballon Æ ne présenta des traces de culture que longtemps après et son contenu se montra alors complètement atoxique. DorkR conciut : « L'optimum d’alcalinité existe donc quand on ajoute à un bouillon de peptone neutre 3 grammes de NaOÏ par litre ». FUKUHARA, en 1919, écrit que : «5 % de soude normale au-delà du point neutre à la phénolphtaléine donne les meilleurs résultats ».

C'est en 1920, que l’on voit pour la première fois intervenir dans la question qui nous intéresse la mesure de la concentration en ions H libres. Mais Ozrrsrky et KLIGER, s'ils étudient la courbe des variations du « pH » par rapport à la courbe de production de toxine, ne publient pas de recherches sur le « pH » optimum pour l’ensemencement. Ce travail est publié pour la première fois 24 1922 par JonEsco-MuragsTi et GC. Popesco. Ces auteurs montrent qu'alors que la toxicité est nulle avec les pi inférieurs à 7,5 elle devient nette: à partir de 7.6, meilleure encore à 8, et arrive à son : maximum à 8,4.

Nous devons toutefois remarquer que ces auteurs ajustent au pH voulu leur milieu avant de le stériliser à 120°, température qui altère assez fortement la réaction. |

La même année, HrrszFELD communique au Comité d'Hygiène de la Société des Nations son « pre-

mier rapport sur la standardisation des sérums antidysentériques ». Nous y trouvons une étude complète de l'influence et des variations du « pH » el nous pouvons en déduire que le pH de 6,4 est mauvais, alors que 7,5 est bon et 8,4 meilleur encore. En 1923, YosniokA trouve également qu'une alcalinité nette est nécessaire, mais il s'exprime en degrés d’alcalinité que nous n'avons pu interpréter. L'étude de cette question ne peut être mieux close que par cette: courbe extraite du, « premier rapport sur l’étalonnage du sérum antidysentérique » fait par K. Smica, H. KawamuRraA et K: TsucHiyA pour le Comité d'Hygiène de la Société des Nations

en 1924.

Courbe représentant le pourcentage des animaux tués au cours de trois expériences.

PARC LE Conclusion : L'alcalinité optimum d’un bouillon est au pH 8,4.