DE QUELQUES RÉACTIONS SÉROLOGIQUES

En même temps que nous poursuivions sur des lapins des traitements au vaccin huileux complet (1), des réactions sérologiques sur sérum humain étaient effectuées avec ce même vaccin pour compléter son étude et essayer de mettre en lumière sa composition. je

Nous avons pu constater en effet, au cours des traitements vaccinaux, que des injections répétées de vaccin provoquaient une augmentation du taux d’agglutination, légère le plus souvent, mais cependant très nette chez certains sujets c'est ainsi que deux d’entre eux, I, (vaccination par voie intraveineuse) et H (vaccination par voie sous-cutanée) ont vu leur taux d’'agglutination totale, primitivement de 1/5 à peine, passer à 1/15 en 72 jours de traitement ; une agglutination partielle était encore visible à des dilutions assez élevées (au 1/60 pour I;).

Ce vaccin apparaît donc comme possédant un certain pouvoir antigénique, susceptible de provoquer la formation d’anticorps dans le sérum d'animaux traités. C'est pourquoi il nous a paru intéressant de mettre en contact in vitro notre vaccin avec un sérum contenant des anticorps tuberculeux et de voir ce que devient, après ce traitement, le pouvoir agglutinant de ce sérum vis-à-vis du bacille tuberculeux.

(1) Rappelons que nous désignons par ce terme une dilution à taux déterminé, dans de l’huile-lanoline stérile, de l'extrait de bacille homogène obtenu selon une technique exposée dans notre premier chapitre. La dilution utilisée correspond à 100 millions de bacilles par centimètre cube. x

Nous avons utilisé pour cela le sérum de certains malades, tuberculeux avérés, à divers stades de la maladie ; les mêmes recherches étaient aussi effectuées sur du sérum d’individu normal, enfin chaqtie réaction effectuée sur l’huile-vaccin, était accompagnée d’une réaction-témoin sur l’huile-lanoline vierge.

La technique suivie a été la suivante

Le sang, prélevé par ponction veineuse au pli du coude, est aussitôt porté à la gladfère où il séjourne un certain temps pour permettre au sérum d’exsuder, Celui-ci est recueilli avec une pipette stérile, centrifugé si besoin est. Il doit être parfaitement limpide, car.son opalescence a rendu parfois la lecture de la réaction très difficile, c'est pourquoi nous avons été amenée par la suite à prélever le sang sur le sujet à jeun.

Quand le sérum est prêt, une réaction d’agglutination préliminaire est effectuée à l’aide d’une émulsion à 40 millions de bacilles homogènes par centimètre cube, selon la méthode habituelle, pour nous renseigner sur sa richesse en agglutinines et déterminer dans quel domaine de la gamme de dilution ïl convient d'opérer.

Dans deux petits tubes coniques on introduit ensuite 2 cc. de sérum; on ajoute dans le premier 1 cc. d’huïle-vaccin, et dans le second 1 cc. d’huile-lanoline vierge ; les deux tubes, hermétiquement bouchés au liège, sont abandonnés quelques heures à la glacière. On constate alors la présence d’un abondant précipité blanchâtre à la surface de séparation des deux liquides ; on agite énergiquement les tubes de façon à réaliser un mélange intime entre le sérum et l'huile, et l’on obtient ainsi une émulsion opalescente qui se détruit d’ailleurs assez rapidement. |

Cette opération est renouvelée à trois reprises, à intervalles égaux au cours de 24 heures, les tubes étant entre-temps abandonnés à la glacière ; on constate que le mélange devient de plus en plus épais, et l’émulsion de plus en plus stable, sans doute -par suite de l'abondance du précipité qui, après

‘épa’ation, se trouve en suspension dans l'huile aussi bien que dans le sérum.

Après repos, au bout de 24 heures, le sérum (situé à la partie iffférieure) est recueilli à l’aide d’une pipette très fine, en évitant le plus possible d’entraîner de l'huile. On ztejette d’ailleurs les 2 où 3 premières gouttes qui s’écoulent, et la pipette est soigneusement essuyée à l’aide d’un papierfiltre stérile, avant de recevoir le sérum prélevé dans un tube à hémolyse.

Une céntrifugation prolongée est ensuite effectuée pour séparer le précipité qui donne tin aspect-trouble au liquide et qui se trouve après cette opération rassemblé à la surface en un abondant dépôt blanchâtre. On recueille à nouveau le liquide à la partie inférieure à l’aide d’une fine pipette en évitant d'entraîner le précipité, et sur ce sérum limpide or pratique à nouveau une agglutination. On opère ainsi sur les deux fractions de sérum agitées respectivement avec l’huilevaccin et l'huile vierge, et une 3° agglutination est effectuée sur du sérum primitif intact conservé à la glacière. On compare le lendemain les trois résultats.

Les sérums tuberculeux étudiés ont été prélevés sur des malades hospitalisés dans les Cliniques Saint-Eloi (pavillon Laënnec) ou au Sanatorium de Bon-Accueil.

Dans notre exposé nous noterons par les lettres $, SH, SHV les résultats des trois agglutinations effectuées simultanément, et correspondant respectivement au sérum pur, au sérum agité avec de l’huile-lanoline, et au sérum agité avec l’huilevaccin,

a) SÉRUM NON TUBERCULEUX TÉMOIN.

> I/agglutination préliminaire n’a pu être effectuée.

Dilutions SH SHV 1/5 HELLO HAE +++ ++ 1/10 RER HE +HF++— 1/15 RL H++—— 1/20 RES CR + — 1/30 RE SERRES ‘1/40 +————