CONCLUSIONS GÉNÉRALES

Nous réunissôns ici l’ensemble des résultats obtenus au cours des divers traitements effectués. Rappelons que ces recherches ont porté principalement sur trois vaccins, vaccin huïleux complet, vaccin huileux acétone et vaccin acétone aqueux, que nous avons préparés à partir d’émulsions de bacilles homogènes provenant de cultures âgées de 48 heures.

Nous avons utilisé les produits d'extraction de ces bacilles par de l'huile d'olive lanolinée, après contact prolongé à l’autoclave à 1209, cette opération a porté tantôt sur des bacilles entiers (vaccin huileux complet), tantôt sur deS bacilles délipidés par traitements répétés à l’acétone (vaccin huileux acétone).

D'autre part, notre étude a porté sur des vaccins aqueux : émulsion en sérum physiologique de bacilles tués par la chaleur (à 1102, pendant 10 minutes), partiellement délipidés par l’acétone (vaccin acétone aqueux) et, enfin, un vaccin aqueux contenant les produits extraits par l’alcool méthylique selon la méthode de NÈGRE et BOQUET, et que nous employons tel qu'il est livré par l’Institut Pasteur, sous le nom d’Antigène méthylique dilué. L

Enfin sur les lapins préparés” par ces derniers traitements, nous avons fait l'essai de divers extraits bacillaires préparés aux Laboratoires de M. le Professeur HOLLANDE :

10) Extrait après précipitation par l'acide trichloracétique (1) selon une méthode inspirée de celle de Boivin;

(1) La préparation détaillée de cet extrait, effectuée par Monsieur . BESSIÈRE, chef de Travaux délégué de Microbiologie, sera donnée prochainement dans sa thèse de Doctorat d'État en Pharmacie.

20) Extrait acétonique de bacille homogène. | Voici les conclusions auxquelles nous ont conduites cès diverses recherches :

Vaccins huileux.

Vaccin huileux complet : Ce vaccin, employé préventivement, le traitement étant poursuivi après tuberculisation, n’a pas empêché l’infestation de l'organisme par les germes tuberculeux ; tous les animaux traités ont succombé après un temps variable, plus ou moins cachectiques, et leur autopsie a révélé chez tous, une atteinte très nette de divers organes : les poumons, plus ou moins hypertrophiés, présentent de nombreuses lésions, plus ou moins confluentes ; d’autres lésions, de taille et de forme variables, sont assez souverit observées sur la rate et les reins ; le foie est rarement atteint.

Cependant, à la faveur de notre traitement nous pouvons noter les faits suivants :

La survie des animaux traités est en moyenne un peu supérieure à celle des témoins ; elle a dépassé 5 mois chez un sujet traité par voie sous- ntance (lapin H) et qui avait reçu après tuberculisation de fortes doses de vaccin.

Les pesées sont nettement favorables à notre traitement après la chute initiale, le poids remonte régulièrement, puis subit une légère décrue bientôt suivie de relevée. A la tuberculisation, les poids chez presque tous les animaux traités sont supérieurs aux poids initiaux et la tuberculisation ne paraît pas arrêter cette ascension, alors que les témoins subissent une chute nette qui, chez deux d’entre eux, se poursuit régulièrement jusqu’à la mort; les deux autres présentent bien

une relevée, mais l’augmentation est faible, et la chute, qui a lieu environ deux mois après la tuberculisation, est rapide et bientôt suivie de mort.

Les animaux traités atteignent au contraire un poids maximum élevé, la chute est ensuite assez lente si l’on excepte la période qui précède immédiatement la mort ; chez l’un d’entre eux, H, cette chute est particulièrement lente, coupée de paliers et même de tentatives de relevées,

L'autopsie elle-même, si elle révèle des organes nettement atteints, nous montre une tendance à la localisation et à la sclérose des lésions,: que nous n’avions pas relevées chez les témoins.

La réaction d'agglutination ne démontre qu’un léger pouvoir antigénique, le taux des agglutinines s'accroît légèrement au cours du traitement préventif (réaction totale au 1/10, 1/15) et continue à augmenter aussitôt après la tuberculisation, sans présenter de chute sensible ; un mois après, les maxima relevés sont de l’ordre du 1/30, 1/40, et ne dépassent guère les valeurs obtenues parfois chez certains témoins, dont la plupart n’agglutinent qu'à 1/15 au maximum.

Ce. vaccin essayé d’ailleurs in vitro, sur du sérum tuber- Culeux d’origine humaine, ne paraît pas altérer considérablement le taux d’agglutination, ou tout au moins son action est assez irrégulière et ne paraît guère plus intense que celle de l’excipient seul, qui provoque des variations assez confuses de ce taux et dont il ne nous a pas été possible de dégager les indications.

Quant à la formule leucocytaire, bien que les fluctuations en soient assez confuses et que l’on n’observe pas de variations très nettes dans la période qui suit la tuberculisation, nous pouvons cependant noter, au moment de la mort, des phénomènes déjà observés : augmentation des polynucléaires et des monocytes, chutes des lymphocytes et par conséquent chute du rapport lymphomonocytaire qui parfois même est inversé. Seul le lapin H, ici encore, ne suit pas la loi commune et sa mort, à l'inverse des autres, est marquée par une forte valeur du taux des lymphocytes et par la diminution des polynucléaires

et des monocytes, avec un rapport Vi maximum.

__ Il est possible que le comportement spécial de cet animal,

qui ie distingue nettement des autres dans tous les domaines, soit dû à sa résistance particulière, à moins que l’on ne puisse attribuer une certaine influence au traitement dont il a seul été l’objet, consistant en doses croissantes, très fortes, de vaccin (jusqu’à un centimètre cube par injection) maintenues jusqu'à sa mort.

Le traitement curatif à l’aide de ce vaccin, après tubercu-

lisation par le bacille homogène, a été diversement supporté par les sujets d'expérience. Ceux qui ont reçu les injections sous-cutanées sont morts après un amaigrissement progressif ;

par contre, la voie intraveineuse nous a paru nettement plus

favorable, et les animaux ont dû être sacrifiés en pleine santé.

Chez tous, nous avons constaté à l’autopsie le bon état des organes ; ce vaccin n'a donc pas permis au bacille homogène de retrouver sa virulence ; celle-ci n’a pu tout au moins se manifester par des lésions apparentes sur les divers viscères.

Les taux d’agglutination semblent être dans l’ensemble quelque peu inférieurs à ceux des lapins traités préventivement..

Quant à-la formule leucocytaire, elle est caractérisée surtout par la valeur élevée du taux des polynucléaires, valeur qui augmente au cours du traitement et se maintient jusqu’à la mort ; le taux des lymphocytes a dans l’ensemble tendance à décroître et parfois, à la mort, devient inférieur à celui des polynucléaires ; mais, contrairement à la série préventive, nous constatons ici, en général, une chute des monocytes à la fin de l’évolution, se traduisant le plus souvent par une augmentation, au moment de la mort, du rapport lymphomonocytaire. Ce résultat, assez inattendu, est vérifié chez trois lapins sur quatre.

Vaccin huileux acétone : Quant au traitement curatif par le vaccin huiïleux acétone, bien que les déductions que nous puissions tirer soient nécessairement incertaines, car nous

n'avons disposé que d’un seul lapin, mort prématurément, il:

nous paraît à première vue assez favorable à l’animal ; celui-ci n’a présenté en effet à l’autopsie qu'une minuscule lésion douteuse sur un poumon, alors qu'un témoin, mort à peu près au même moment, avait déjà les poumons nettement envahis et une rate déformée par les lésions. Le taux d’agglutination n'a subi, ici encore, qu'une faible augmentation (agglutination totale au 1/15) et la formule leucocytaire n’a pas présenté de variations sensibles.

nd à, 5 ee À M LOU @ Vaccins aqueux.

Vaccin acétone aqueux : Des multiples essais de traitement entrepris, nous pouvons dégager les faits suivants : Ce vaccin, aux doses employées, s’est montré éminemment toxique et a provoqué, aù bout d’un temps variable, un amaigrissement plus ou moins rapide, aboutissant à la mort de l’animal ; l'effet est plus ou moins brutal selon les doses et l’on a pu avec des doses massives provoquer la mort rapide d’un animal de poids élevé avant même qu'il ait pu devenir cachectique.

D'autre part, ce vaccin est capable de créer des agglutinines {agglutination à 1/100, au minimum, pour le lapin X) dans le sérum des animaux traités, lorsque ces derniers peuvent résister un certain temps ; les doses faibles (lapin X : 160 millions) sont nettement plus favorables que les fortes, (280 millions chez le lapin IT) pour lesquelles le taux obtenu (1/30 au maximum) n’est jamais très élevé. Il semble d’ailleurs qu'un vaccin fraîchement préparé soit plus actif que lorsqu'il a été conservé quelques mois à la glacière ; le taux des agglutinines qu’il fait naître devient plus faible au fur et à mesure du vieillissement en même temps que la toxicité semble augmenter.

Remäarquons d’ailleurs que la mort dans ce cas ne semble pas influer dans l’ensemble sur le, taux d’agglutination qui présente parfois une courbe ascendante jusqu’au bout (lapin X), ou qui, tout au moins, conserve une valeur assez élevée à la mott (Cr : agglut. totale 1/60).

Sur ces animaux nous constatons aussi l’aciion toxique des extraits essayés aux doses employées, fortes, il est vrai extraits trichloracétique et extrait acétonique qui accélèrent l’amaigrissement de l'animal et précipitent l'issue fatale, résultats particulièrement sensibles pour le second. $

Au point de vue antigénique au contraire, leur action semble différente : l'extrait trichloracétique paraît renforcer la formation des agglutinines (le lapin X meurt avec un taux maximum, contrairement à son témoin Cr qui, à la mort, présente une certaine chute de ce taux).

Chez II par contre, les injections d'extrait acétonique sont

immédiatement suivies d’une chute brusque etætotale de l’agglutination, la réaction devient négative à la mort de l'animal qui survient le dixième jour après ce traitement. Il nous est difficile de suivre l'effet du vaccin acétone sur la formule leucocytaife, car la mort rapide des animaux ne nous à pas permis d'obtenir plusieurs résultats ; nous pouvons noter cependant la valeur élevée du taux des polynucléaires

(au début du traitement tout au moins) ainsi que du rapport L

, ce que nous constatons d’ailleurs aussi chez les animaux traités par l’antigène méthylique.

Les traitements par les extraits trichloracétique et acétonique conduisent, ici encore, à des résultats opposés : le premier provoque une polynucléose intense alors que le taux des monocytes s’abaisse à l’unité, donnant ainsi un rapport lymphomonocytaire une valeur très élevée à la mort de l’animal.

Pour le second au contraire, ce traitement est immédiatement suivi d’une diminution brutale des polynucléaires et des lymphocytes (de 43 à 13 et 50 à 15 respectivement), alors que la

monocytose devient intense (72) : le rapport = devient ainsi,

très faible et nettement inférieur à l'unité quand l'animal succombe.

Antigène méthylique dilué : Cet extrait paraît assez bien supporté par les animaux, mais se révèle incapable de faire croître de façon nettement appréciable le taux d’agglutination, même en employant des doses importantes. Ces conclusions s'opposent donc à celles de Mile GUERRE (Thèse de Doctorat en Pharmacie, Montpellier, 1940) qui a fait précéder , il est vrai, son traitement d’une injection intradermique de bacilles virulents, ce qui est la cause, sans doute, des taux très élevés obtenus par elle.

Ce résultat négatif nous a donc conduit à cesser ces injections et à continuer la préparation des animaux par du vaccin

acètone aqueux, et même à essayer un traitement mixte, alterné puis simultané avec ces deux vaccins,

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Vaccin acétone aqueux ét antigène méthylique dilué associés Lorsque le traitement à l’antigène est interrompu et remplacé par des injections de vaccin acétone aqueux, nous assistons à une poussée’d’anticorps très nette si le traitement à l’antigène a été assez court; le vaccin acétone agit alors comme s’il était seul (lapin Ci). Par contre, si le premier traitement a été assez prolongé, il paraît retarder l’action du traitement ultérieur : la croissance du taux d'anticorps se fait plus lentement, et est interrompue par la mort de l'animal qui, ici encore, ne se traduit pas par la chute de l’agglutination se produisant d'ordinaire à ce moment. Par contre la toxicité du vaccin acétone est toujours sensible, les animaux traités finissant toujours par mourir cachectiques.

Enfin le traitement mixte spécial essayé sur le lapin V.. (consistant en injections massives croissantes d’antigène, suivies d’injections croissantes de vaccin acétone, puis d’un traitement mixte avec les mêmes doses d’antigène que dans la première phase, accompagnées d’une dose fixe et élevée de vaccin acétone) s’est révélé par contre nettement favorable.

Ici encore, l’antigène méthylique paraît agir en retardant l’action du vaccin acétone dans sa création d'anticorps ; le taux d’agglutination augmente cependant, mais lentement et très régulièrement. Par contre la toxicité de ce second vaccin semble être neutralisée, l’animal supporte très bien son traitement, même lorsqu'il reçoit les doses fortes de vaccin acétone (o cc. 50) ; son/poids augmente régulièrement (après urie certaine chute aux premières injections de vaccin acétone) et est maximum quand il est sacrifié. A l'autopsie l'animal est gras, ses organes sont parfaitement sains.

La formule leucocytaire montre à ce moment une Ilymphocytose très nette traduisant un état de résistance de l'animal.

E # LA Le taux des monocytes est faible, le rapport Un est élevé, i2

taux de polynucléaires a une valeur normale (1).

(1) Il nous paraît intéressant de rapprocher ces résultats de ceux

Tous ces résultats semblent donc concorder en faveur de ce dernier traitement ; toutefois dans ce cas, comme dans la plupart des précédents, nous devons tenir compte du petit nombre des animaux traités, les résultats obtenus n'étant que de: indications qui demanderaient à être contrôlées sur un plus grand nombre de sujets d'expérience.

obtenus pour le lapin X qui reçoit en même temps que le vaccin acétone aqueux, l'extrait trichloracétique : nous assistons aussi à un

accroissement net du taux des agglutinines, mais ici une certaine toxicité

semble se manifester, par la chute régulière du poids qui se poursuit jusqu’à la mort. D'autre part, à cette date, la formule leucocytaire

mn EE révèle un rapport Ni très élevé, comme chez V,, mais par contre le

taux des polycucléaires, voisin de la moyenne pour Y,, est ici anotrmalement élevé (56 %).