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que aux gouttelettes huileuses, s’il s’agit d’huiie le vaseline, une teinte jaune brique.

Au lieu de colorer les préparations, on peut employer les réactions de solubilité et de saponification des différentes huiles. L'huile de vaseline est à peine soluble dans l’alcool et l’acétone, tandis que les graisses et les huiles végétales sont dissoutes par ces produits. Enfin, si on lave les étalements de sérosité avec une solution alcoolique de potasse ou d’éthylate de soude, les graisses et les huiles végétales disparaissent, tandis que l'huile de vaseline n’est pas intéressée et peut être colorée ultérieurement avec un de ses colorants électifs.

2°, —. EXTRACTION DE L'HUILE D'UNE TUMEUR ET ÉTUDE CHIMIQUE DE CETTE HUILE. — Il faut d’abort extraire la totalité des lipoïdes contenus dans le fragment de tumeur examiné ; ensuite, séparer l’insaponifiable et enfin, dans cet insaponifialiie, caractériser l'huile de vaseline, si c’est elle qui est en jeu.

a) Extraction totale des lipoides. — L’extraction iotale des lipoïdes peut être obtenue par léther anhydre agissant dans un appareil à épuisement de Soxhlet où de Kumagawa sur des fragments de tissus ayant d’abord macéré 24 heures dans l’alcoo! absolu. Cet alcool est repris et évaporé, puis son résidu sec est repris avec de l’éther. Les deux extraits retirés sont réunis en un seul qui renferme l'ensemble des lipoïdes à étudier. Cette méthode n’est pas strictement quantitative et ne donne pas

la totalité des lipoïdes contenus dans le fragment Htraitér. :

La méthode de saponification de KumagawaA est préférable, car elle donne, à coup sûr, la totalité des lipoïdes. Le tissu frais est dissous à chaud dans de la lessive de soude. Le liquide obtenu est acidifié, puis épuisé par l’éther dans une ampoule à décantation. L’éther évaporé donne un premier extrait, qui est repris d’abord par l’éther anüydre, puis après filtration et évaporation, par l’éther de pétrole. L’extrait obtenu contient les acides gras et l’insaponifiable.

b) Séparation de l’insaponifiable. — On emploie la méthode de KUMAGAWA qui consiste à dissoudre l'extrait total dans la potasse alcoolique. Les acides gras sont saponifiés. On ajoute ensuite de l’éther de pétrole qui se mélange entièrement au liquide obtenu, On ajoute de l’eau ; les savons de potasse demeurent dans la partie aqueuse tandis que l’insaponifiable total passe dans l’éther de pétrole. Cet éther séparé est lavé à la potasse alcoolique faible puis évaporé. On obtient ainsi un produit huileux fluide et incolore.

c) Séparation et caractérisation de l'huile de vaseline. — Ce produit ne contient pas encore que de l'huile de vaseline. Il faut le purifier et en extraire la cholestérine, ce qui est très malaisé, car on obtient difficilement de l’huile de vaseline pure.

On peut employer la digitonine qui précipite la cholestérine sous forme d’un complexe insoluble. Mais cette méthode, très bonne pour le dosage de la cholestérine est peu pratique comme procédé de séparation si on l’emploie sur des quantités importantes. Les méthodes dacétylation et de benzoï-

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lation ne peuvent pas être utilisées, car les éthers de la cholestérine sont solubles dans les huiles minérales. Le lavage à l’alcool ne permet pas non plus une séparation complète, mais en l’absence d’un procédé exact, c'est lui qu’il est préférable d’utiliser,; car il a l'avantage de la simplicité.

En conclusion, huile de vaseline obtenue par l’un ou l’autre de ces procédés, quoique privée de la plus grande partie de la cholestérine qu’elle contenait, re peut être considérée comme pure et contient encore des traces de produits organiques.

Elle se présente sous la forme d’un liquide visqueux, limpide et incolore présentant une légère fluorescence verdâtre, alors que l'huile de vaseline du commerce ordinairement employée ne présente aucune fluorescence. La densité pour cinq échantillons, provenant de différentes tumeurs, recueillis par JACOB et FAURE-FRÉMIET varie entre 0,86 et 0,88. Sur ces échantillons, ils ont vérifié l’insaponification en présence de l’éthylate de soude. De même, agitées avec de l’acide sulfurique, ces huiles Jjaunissent quelquefois, mais elles ne produisent pas de goudron. Agitées avec de l’eau de brome, elles fixent une certaine quantité de ce métalloïde, Chauffées plusieurs heures à l’ébullition et sous un réfrigérant à l’acide acétique, elles restent non modifiées et forment après refroidissement une couche huileuse surnageante. L’anhydride acétique, séparé et décomposé par l’eau bouillante, ne laisse pas de produit insoluble. Ces huiles non acétylables ct non saponifiables présentent bien tous les caractères des huiles de vaseline du commerce.