I. — Matériel Tubes à hémolyse

Nous avons utilisé des tubes de 7 centimètres de long et de 10 millimètres de diamètre intérieur. Leur taille n’est pas indifférente ; en effet, le volume total de liquide étant de XV gouttes, il faut que la hauteur de la colonne de liquide soit assez haute pour avoir une bonne lecture, maïs il faut de plus que le diamètre soit assez large pour permettre une agitation complète des milieux en présence. Ces tubes sont soigneusement bouchés et stérilisés. Leur manipulation et leur remplissage suivant la technique bactériologique ordinaire entraîne une grosse perte de temps et des grandes possibilités d’erreurs dans

la mise en place des gouttes, aussi nous avons essayé de vérifier si le pourcentage des souillures éventuelles justifiait l'emploi de cette technique. Nous avons opéré en stérilisant les tubes bouchés dans de grandes boîtes, puis les bouchons étaient enlevés avec une pince flambée quand on répartissait les tubes sur les porte-tubes et mis dans de grandes boîtes de Prrri stériles. Ils étaient remis ensuite avec la pince flambée dès que la répartition des gouttes était faite, avant d’agiter. Ce procédé peut sembler incorrect, aussi, nous avons contrôlé après culture, le contenu des tubes. Sur trois cents contrôles effectués, nous n’avons trouvé qu’une fois un bacille gram positif dont la présence n’avait pas troublé le résultat et qui possédait un index de sensibilité voisin du staphylocoque standard. Ce procédé réduisant des trois quarts le temps du dosage, nous avons cru être autorisé à l'utiliser, quitte à contrôler tous les tubes nous semblant douteux.

Pipettes La même pipette Pasteur de diamètre assez gros doit servir pour effectuer un dosage, le volume des gouttes devant être naturellement le même.

Milieu

Il est important que le même milieu soit utilisé pour que les résultats soient constants et comparables. Le mieux est d’avoir une eau peptonée de composition nettement définie, facile à reproduire. Son pH doit être de 8,2-8,4. Les solutions de glucose à 30 % et de Phénol-Sulfone-Phtaléine à 15 % doivent être réparties en ampoules de 2 cc. et stérilisées.

On a avantage à préparer une quantité importante de tubes avec le mélange eau peptonée-glucose-P.S.P., à vérifier leur stérilité après séjour à l’étuve et à les stocker.

Souche de staphylocoque étalon

Nous nous sommes servi successivement de deux souches de staphylocoque Londres venant de l’Institut Pasteur. Ces deux souches avaient la même sensibilité à la Péni-