I — METHODES DE DIFFUSION EN AGAR

APPLICATION AU TITRAGE D’UNE PÉNICILLINE INCONNUE

Méihode des cylindres — Dosage Heatley

Cette méthode a été décrite pour la première fois par FLorey et ses collaborateurs dans « The Lancet » : « Further observations on Penicillin ». Exposée en détail en-

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suite par HearLey, elle est actuellement décrite dans tous les livres traitant de la Pénicilline. Le détail en est notamment donné dans l’ouvrage de R. MarrTix, F. NiTri, B. Sureau et J. Berron auquel nous l’empruntons avec quelques modifications apportées par différents auteurs.

Principe : Cette méthode se base sur la rapide diffusion de la Pénicilline dans certains gels tels que la gélose nutritive par exemple. On place des tubes en verre, porcelaine ou métal sur une surface de gélose préalablement ensemencée avec un microbe sensible à la Pénicilline. Ces tubes sont remplis de solutions de Pénicilline de titres différents. La Pénicilline diffuse dans l’épaisseur de la gélose, tandis que cette même gélose constitue un filtre pour les germes qui peuvent être contenus dans le tube. Après un séjour de 18 à 24 heures à l’étuve à 37° on observe les faits suivants :

La surface de la gélose présente une culture microbienne unie et homogène.

Les tubes contenant les solutions de Pénicilline sont entourés d’une auréole claire dans laquelle tout développement microbien est arrêté.

Le diamètre de cette zone d’inhibition est, dafis certaines limites et pour certaines conditions expérimentales, proportionnel aux concentrations de Pénicilline placées dans les tubes. Une Unité de Pénicilline provoque une zone d’inhibition de 22 mm. environ.

Technique du dosage Matériel

I. Boîtes de Pérr: de modèle courant (2 em. de profondeur sur 9 cm. de diamètre). Il est important que le fond de ces boîtes soit parfaitement plan.

IT. Cylindres : On utilise trois types différents : — Les cylindres de porcelaine proposés par HEATLEY qui ont 10 mm. de longueur sur 8 mm. de diamètre exté-