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que le liquide ait pris une couleur rouge pourpre intense. (Environ 4 cm3 de potasse sont nécessaires).
La précaution la plus importante est d'employer pour toutes ces solutions de l’eau fraichement distillée. Les récipients doivent être en verre exempt d'alcalis pour éviter la production de solutions colloïdales bleues. (On emploie de préférence le verre d'Iéna). Le plus grand soin doit aussi être apporté à la stérilisation des aiguilles à
ponction et des récipients qui contiendront le liquide CR.
Réaction. — II faut
1° Une solution de Na Cl à 0,4 % dans de l’eau fraiche-
ment distillée.
2°,12 tubes soigneusement nettoyés à l'acide chlorhydrique et stérilisés. Surtout ne pas employer de soude.
On met dans le premier tube o c. c. du liquide plus 1,8 c.c. de la solution de Na CI. On a ainsi une dilution de liquide CR au 1/10°. Dans les 11 autres tubes on met 1 C. ©. de la solution de Na CI. Puis on prend 1 cm3 du : mélange du premier tube et on le met dans le 2° tube ; puis : cm3 du 2° tube que l’on porte dans le 3° tube ; ‘de même pour les autres tubes. On a ainsi une série de dilutions du liquide CR de 1/10° à 1/20.000°. On ajoute à chaque tube 5 ce. c. de la solution d'or. Au bout de quelques minutes on peut lire les résultats décrits ci-après : = Le liquide normal ne modifie pas la solution colloïdale. Le liquide pathologique, au contraire, la précipite et produit des modifications dans sa couleur qui passe du pourpre au-rouge bleu, au violet, au bleu, au blanc bleuâtre, au blanc. Dans ce dernier-cas qui représente la réaction :
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la plus intense, l'or s’est disposé sous forme d’un précipité noir bleu au fond du tube.
Eicke représente la réaction par une courbe dont les abscisses donnent les degrés de dilution et les ordonnés le degré de précipitation.
Il est à remarquer que la précipitation avec les liquides pathologiques ne se produit pas avec les concentrations les plus grandes de liquide (1/10°) ; la précipitation maxima se présente toujours pour le même degré de dilution. dans chaque maladie et on obtient alors, des courbes pathognomoniques pour chaque affection.
On voit immédiatement les avantages de cette réaction : grande sensibilité (donnant par exemple des résultats dans la marche-de la syphilis, bien avant le Wassermann) ; d'autre part, diagnostic qualificatif des modifications du liquide. De plus, le résultat peut être donné avec une quantité minime, de liquide et peu. de temps après la ponction. Nous avons vu-par contre quels soins minutieux exige cette réaction, surtout pour ses préparatifs.
D'autre part, l'expérience a montré que la floculation s’observait avec le-maximum de régularité et de sensibilité quand on employait certaines suspensions colloïdales organiques dont l’état physique, à l'inverse des suspensions minérales, peut être facilement réglé.
La première en date de ces réactions organiques est
La réaction de Meinicke. — Meinicke avait observé que tous les sérums humains floculent lorsqu'on les additionne d’un extrait d'organes dilué dans l’eau distillée ; cette
floculation qui disparaît si l’on ajoute une solution de sel
DEN 1 vas marin et persiste dans les sérums syphilitiques, serait dûe suivant cet auteur à une combinaison des lipoïdes de l'extrait et de ceux qu'il croit propres aux sérums syphilitiques ; d’où le nom de « Réaction de combinaison des lipoïdes » qu'il donne à sa méthode.
Meinicke ‘a employé successivement deux procédés. Nous ne retiendrons que le dernier, plus simple et seul applicable au liquide CR.
. L'extrait, préparé avec du cœur de cheval est épuisé au préalable par l’éther puis repris par l'alcool. On laisse le mélange Extrait + Liquide pendant 24 heures à 37°. “à liquides syphilitiques présentent des flocons très nets.
Dans le même ordre d'idées fut élaborée, en Allemagne la réaction à la gomme-mastic, d'Emmanuel. Le réactif est cette fois une solution alcoolique de « Mastix » ou résine de lentisque. Cette méthode est moins recommandable, car l'expérience a prouvé qu'elle n'était pas toujours infaillible. (Notamment, d'après Laroche et Guillain dans la syphilis du névraxe et la méningite tuberculeuse : B. Institut Pasteur. 1920,-n° 24).
Pour terminer cette étude des « précipitations, nous allons décrire deux réactions que nous avons eues sous les yeux au laboratoire : La réaction de Sachs et Georgi que notre excellent camarade Corazzini étudiait avec les sérums syphilitiques pour sa thèse inaugurale, et la réaction dite « au benjoin collaïdal » que nous avons pu personnellement expérimenter.
Réaction de Sachs et Georgi. — On se sert comme réactif d'extrait de cœur de bœuf : le cœur débité en fi-
Ut
nes lanières est pulvérisé au broyeur après dessication à lPétuve à 55°.
On place o gr. 3 de cette poudre dans 20 em3 d'alcool à 95°, au bain marie pendant deux heures. On laisse reposer cet extrait brut pendant plusieurs jours. On l'étend alors avec de l'alcool et on l’additionne d’une solution alcoolique de cholesterine pure à r pour 100 dans les proportions suivantes : Extrait brut 100 gr., alcool 200 gr., solution de cholesterine, 13 €. c. 5.
Au moment de l'emploi on dilue encore très rapidement au 1/6° l'extrait cholestériné avec de l’eau physiologique. On obtient ainsi une émulsion opalescente.
La réaction s'exécute en ajoutant simplement à r eme du sérum du malade dilué au cinquième, et inactivé, o cmec 5 d'extrait dilué.
On emploie comme témoins d’une part 1 cmc de sérum dilué additionné de o cmc 5 d'une dilution d'alcool à 95° au r1/6° dans l’eau physiologique (témoin pour le sérum), d'autre part o cmc 5 d'extrait dilué additionné -de r cmec d’eau physiologique (témoin pour l'extrait).
On place ces tubes à l’étuve à 37°. Au bout de 24 et quelquefois de 48 heures on peut lire les résultats à la loupe : la réaction positive se caractérise par la présence de flocons clairs sur fond noir.
Cette réaction, avec laquelle Corazzini a trouvé 96 pour cent de résultats positifs chez des syphilitiques avérés, s'applique au liquide céphalo-rachidien avec une techni-
que identique.
Réaction au benjoin colloïdal. — Cette réaction est basée sur la propriété de certains liquides CR, pathologi-
CPE
ques, contrairement aux liquides normaux, de précipiter une solution colloïdale de benjoin. D’après ses inventeurs (Guillain, Laroche et Lechelle) elle est plus sensible que la réaction à la gomme mastic et moins su-
jette aux causes d’erreur que la réaction de Lange. On fait usage de deux solutions :
1° Une solution de chlorure de sodium chimiquement
pur dans l’eau distillée, à o.10 pour 1000.
>° Une solution contenant en suspension de la résine de benjoin, préparée de la façon suivante : On fait dissoudre 1 gr. de résine de benjoin dans 10 €. c. d'alcool absolu. On laisse cette dissolution s'effectuer durant 48 heures, on décante et on n'utilise que le liquide limpide ainsi obtenu ; on prélève o c. c. 3 de cette solution que l'on verse lentement dans 0 €. €. d’eau distillée, chauffée à 35° de façon à obtenir une suspension homogène. Cette dernière solution doit être fraîchement préparée.
Toute la verrerie qui servira à la réaction doit être d’une propreté absolue, lavée à l’acide chlorhydrique, rincée à l’eau distillée. Le liquide à examiner ne doit contenir aucune trace de sang accidentel.
La réaction s'effectue de la façon suivante
Dans une série de tubes à hémolyse, on verse
Dans le premier tube, o c. c. 25 de la solution de NaCL
à O,I1 pour 100.
Dans le 2° tube, o c. c. 5o de la solution de Na CE à 0,1 pour 100. À
Dans le 3° tube 1 c. c. 5o de la solution de Na=GCF à 0,1 pOur 100. | ie
Puis dans chacun des autres tubes, r c. c. de cette mê me solution saline.
- On ajoute ensuite en brassant soigneusement le mé-
lange
Dans le 1° tube o c. c. 35 du liquide CR à étudier. Dans le 2° tube o c. c. 5o du liquide CR à étudier. Dans le 3° tube o c. c. 50 du liquide CR à étudier.
Puis on prélève dans ce troisième tube 1 c. c. de la solution qu'il renferme ; on reporte ce c. C. dans le 4° tube On brasse et on prend de ce tube 1 €. ec. qu’on reporte! dans le cinquième tube ; on opère ainsi jusqu'au tube 15, on rejette le c. c. prélevé dans ce tube sans le reporter dans le tube 16 qui servira ainsi de étmoin.
Dans les tubes successifs on a ainsi des dilutions de liquide CR de 1/4, 1/8 et jusqu'à 1/16384. On verse enfin dans chacun des tubes 1 €. c. de la suspension de benjoin et on laisse la réaction s'effectuer à la température du laboratoire. La lecture peut être faite 6 à 12 heures après : dans les tübes positifs, la précipitation du benjoin est absolue, le liquide complètement clarifié ; dans les tubes négatifs l'aspect trouble subsiste.
Un liquide CR normal tantôt ne donne aucune précipitation, tantôt en donne une légère dans les tubes 6 et 7. Si au contraire le liquide CR est pathologique, la précipitation est complète dans un certain nombre de tubes dont l'emplacement dans la série est variable suivant la maladie causale.
Résultats
Liquide normal. — Albumine, o gr. 16. — Réaction au
benjoin négative.
