RÉACTIFS

1. Acétone pour analyse de Prolabo ; 2. Ether anhydre pur à 66° de Prolabo ; 3. Mélange à parties égales des deux réactifs précédents.

Ces liquides sont refroidis avant l’usage dans de la glace pilée jusqu’à ce que leur température soit voisine de +1°.

De même-le tube dans lequel s’opère la précipitation des albumines est refroidi de la même façon avant l’usage, puis entre chaque centrifugation.

PRÉCIPITATION DU SÉRUM. — Le sérum est décanté, centrifugé, décanté à nouveau. 1 cc. de ce sérum, non chauffé, mesuré à la température du laboratoire, est introduit dans un tube à centrifuger de 70X19 mm. préalablement taré (pesée à 1/2 mmg. près) et mis à refroidir dans la glace pilée. Quelques minutes suffisent pour faire descendre la température jusqu’à LOL

Faire couler 5 cc. d’acétone froide dans le tube en agitant vivement et continuellement. Centrifuger immédiatement pendant une minute à 3.000 tours.

LAVAGE DES ALBUMINES. — Décanter le liquide acétonique. Introduire une petite quantité d’acétone neuve froide (0 cc. 5 environ). Délayer le culot d’al-

bumine avec une spatule de verre, le tube plongeant dans la glace pilée.

Ajouter encore un peu d’acétone, délayer à nou- Veau, puis ajouter environ 4 cc. d’acétone en agitant continuellement avec la spatule. Centrifuger une minute à 3.000 tours. Décanter l’acétone. Introduire une petite quantité du mélange acétone-éther froid, délayer avec la spatule, le tube plongeant dans la glace pilée, ajouter à nouveau 0 cc. 5 d’acétone-éther, délayer, ajouter enfin en agitant 4 cc. environ d’acétone-éther, décanter.

Faire de même deux lavages successifs à l’éther anhydre. |

Le culot d’albumine doit être blanc (sauf pour les sérums ictériques ou très hémolysés). Le tube avec le culot d'albumine est mis à létuve à 36° jusqu’au lendemain (15-20 heures).

Le tube et son contenu sont alors pesés à nouveau, ce qui donne par différence le poids de la pastille d’albumine correspondant à 1 cc. de sérum.

Il. — Réaction de floculation par l'acétate de cuivre

Pulvériser la pastille avec un petit agitateur dans le tube même où elle a été préparée. Ajouter 1 cc. d’eau salée à 3 p. 1.000. Brasser pendant quelques minutes, attendre et si, après 15 minutes, la dissolution n’est pas complète, brasser à nouveau.

Une heure après la première addition d’eau salée,

ajouter une nouvelle quantité d’eau salée à 3 p. 1.000 telle que le taux d’albumine soit le 1/6 du taux moyen du sérum, soit 80/6 gr. par litre. Pour obtenir ce résultat :

— pour un poids de pastille de 80 mmg. ajouter 5 cc. d’eau salée ;

—— pour un poids n (en mmg.) ajouter nX0,0625 (en centimètres cubes) que l’on mesure avec une burette de précision.

Centrifuger, décanter et distribuer 0.5 cc. du liquide dans un tube 13X60 et ajouter 2 fois 0,5 cc. d'une solution dans l’eau distillée d’acétate de cuivre à 1 gr. 50 pour 100 ce. de solution.

Agiter le tube, boucher, laisser deux heures à +20° centigrades et, après agitation par renversement du tube, faire la lecture au photomètre.