PRINCIPE DE LA MÉTHODE

La solution renfermant de la monoiodotyrosine et de la tyrosine est soumise à l’action des réactifs y provoquant le développement de la coloration (réaction de MILLON, technique de LuGG). On mesure ensuite l’absorption du milieu à deux longueurs d'onde voisines des sommets respectifs des bandes caractéristiques des dérivés de la monoïodotyrosine et de la tyrosine (fig. 2) au moyen du photomètre de PULFRICH. Les positions approchées des maxima étant respectivement 9200 À pour la monoiodotyrosine et 4800 À pour la tyrosine, on procède à deux mesures successives en lumière filtrée par les écrans S;3 et Sy, sélectifs au voisinage de ces deux longueurs d'onde. Soient M et m les valeurs du coefficient d’extinction d’un mélange inconnu établies sous une épaisseur

HN Vus

donnée (2 cm dans nos essais). On détermine par ailleurs dans les mêmes conditions celles propres à des solutions isomoléculaires de monoiodotyrosine et de tyrosine pures renfermant

Leg]

0.60 0,40 0,20 Le 1 Mes a Per tte À 6000 5500 5000 4500 4000 Fig. 2. — Spectre d'absorption des produits de la réaction de MIcLoN sur la monoiodotyrosine et sur la tyrosine pures. Abscisses : longueurs

d'onde (Â). Ordonnées : coefficient d'absorption (:) des solutions 1.10-2 mM sous 2 cm d’épaisseur.

une quantité connue C de chacun. Soient T et t d’une part, I et i d'autre part les coefficients d'absorption des quantités C de monoiodotyrosine et de tyrosine en lumières filtrées par les écrans S;3 et S,7. Les quantités x de monoiodotyrosine et y de tyrosine présentes dans le mélange initialement étudié peuvent être calculées à partir des équations

(Me tx — é(2) = os + a

Or, l'intensité de la réaction de MILLON donnée par les deux acides aminés purs suit la loi de BEER-LAMBERT entre des valeurs de C allant de 0,15 à 0,90 10°? mM pour la monoiodotyrosine et de 0,12 à 0,60 10°? mM pour la tyrosine, comme en témoignent les données du Tableau V.

Des courbes d'étalonnage de la réaction colorée des deux acides aminés en lumière filtrée par les écrans S;3 et Syy peuvent être établies à partir de ces valeurs. Comme le montre l’examen de la figure 3, elles sont constituées par des droites

pratiquement convergentes vers l’origine et se prêtent à une

MNGE ILES