II. — Emploi de notre milieu

Plonger Le fond de la plaque de Roux (c’est-à-dire la partie de la plaque contenant le milieu solide) dans l’eau chaude.

Au bout de quelques instants, le milieu est complètement liquéfié. On retire la plaque de l’eau et on laisse un peu refroidir, de façon que le milieu reste liquide, tout en étant à une température aussi peu élevée que possible. Pratiquement, on laisse refroidir jusqu’à ce qu’on puisse prendre la plaque à pleine main et que la chaleur soit supportable : à ce moment-là, le milieu est à une température de 40°-44°.

Au moyen de la seringue, refouler alors dans la plaque de Roux 5 cc. environ de sang prélevé par ponction veineuse. Mêler au milieu momentanément liquide, en inclinant en tous sens la plaque, sans provoquer de bulles d'air.

Laisser refroidir et solidifier le milieu en abandonnant la plaque, à plat, sur une table ou sur un endroit plan.

Le milieu une fois complètement solidifié, nous obtenons une couche à peu près uniforme de 2 à 3 millimètres d'épaisseur.

Placer à l’étuve à 36°-37° en position horizontale. |

Au bout de 24, de 36 ou de 48 heures de séjour à l’étuve, les colonies seront suffisamment développées.

Celles-ci se détachent nettement, la plaque posée sur fond noir, en gris bleu, rose, ou rouge, suivant l’espèce microbienne.

DMC TRE III. — Difiérenciation et identification des germes cultivés.

1° ASPECT DES PRINCIPALES COLONIES MICROBIENNES DANS NOTRE MILIEU SOLIDE.

a) Bacille coli. — Colonies gris bleu, s'étendant au fur et à mesure de leur développement. Bords irréguliers. Quelque-

lois, lorsque les colonies sont incluses dans le milieu, il se

forme des bulles lenticulaires dues à la fermentation du lactose.

b) Bacille typhique et para. — Colonies rouges, qui, lorsqu'elles sont superficielles, s'étendent au fur et à mesure de leur développement. Bords nets.

c) Staphylocoque, streptocoque, diplocoques et coccus divers. — Colonies blanchâtres ou rosées, à bords plus blancs que le centre.

d) B. subtilis. — Colonies roses envahissant rapidement la surface du milieu. Bords irréguliers et légèrement bleuâtres.

e) Bacille diphtérique. — Colonies petites, punctiformes, presque translucides, de couleur rougeâtre.

Remarque. — Les colonies poussant à l’intérieur du milieu sont toutes de couleur uniforme, couleur rose, sauf les colonies du bacille coli, qui sont bleu pâle.