METHODES STATISTIQUES DE DOSAGE BIOLOGIQUE DE LA SCILLE

Les méthodes que nous avons envisagées dans le chapitre précédent, quelles que soient leur fidélité et leur rigueur, nécessitent, pour être très précises, emploi d’un grand nombre d’animaux. Ce fait tient non seulement aux difficultés techniques et à la complexité de l’action pharmacodynamique, mais encore et principalement aux variations de sensibilité du matériel vivant.

Au contraire, les méthodes statistiques de détermination des pourcentages de mortalité ou d’activité par administration de doses variées, méthodes introduites dans la science par TREvVAN (143) et basées précisément sur les variations de sensibilité des animaux, offrent une plus grande sécurité pour le dosage biologique. TREVAN a montré en effet qu’il est possible d'admettre, tout au moins pour les doses voisines de la dose minimum mortelle, que le pourcentage des mortalités varie proportionnellement aux doses administrées. Partant de cette donnée on peut établir la toxicité ou l’activité d’une substance médicamenteuse sans avoir à en déterminer la dose minimum mortelle ou la dose minimum d’action.

En ce qui concerne la Scille, l’une de ces méthodes, déterminant les pourcentages de mortalité pour dif-

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férentes doses de drogue a été utilisée par BurN (16) sur la grenouille (méthode de TREVAN adoptée par le Codex britannique). Nous avons cru faire un travail original en mettant au point, pour la Scille, deux autres méthodes basées sur ce principe de TREVAN. L'une, qui nous est personnelle, consiste à déterminer le pourcentage d’arrêt de ventricules isolés d’escargot, maintenus dans des conditions de survie suivant la technique désormais classique de CARDOT (28, 29, 30). L’autre, basée sur le test de l'Américain HaxzLicKk (66), l'effet émétique des cardiotoniques sur le pigeon, à été mise au point par Burn (19) pour le dosage de la Digitale.

Dans le chapitre suivant, nous examinons successivement les essais effectués en utilisant ces deux méthodes.

MÉTHODE STATISTIQUE DE TOXICITÉ SUR LE VENTRICULE ISOLE D'HELIX POMATIA

Le ventricule isolé d’Helix pomatia permet au pharmacologue d’effectuer dans des conditions rigoureuses et économiques l'étude des cardiotoniques. Dans des travaux aujourd’hui classiques, le Professeur CARDOT (28, 29, 30) a montré en effet que cet organe peut, non seulement présenter une survie très longue dans les conditions qu’il a précisées, mais encore constituer un réactif biologique très sûr vis-àvis de divers poisons. Cet organe, dépourvu de tout élément nerveux, a permis ultérieurement d’effectuer de nombreuses recherches pharmacologiques (BINET, 9; DuBuisson, 45; Boyer et CARDOT, 28; CAHEN, 25) (Ci)

(1) L'étude théorique du cardioréglage a fait l'objet d’une récente monographie (38).

AO

En ce qui concerne les cardiotoniques et du point de vue qualitatif, cet organe a permis d'effectuer l'étude de l’action de divers glucosides (VirA, 147 ; BEAUNE, 6; BEAUNE et BALACEANU, 7). Il restait à transformer cette méthode en méthode quantitative, comme l'avaient fait, en utilisant un autre principe, pour le cœur de grenouille, ROTHLIN et OLrARO (124). A cet effet deux moyens pouvaient être tentés. Le premier consistait à établir un rapport d’accroissement de tonus ou d'amplitude des battements de ventricule d’Helix plongés dans diverses solutions de Scille. Il présentait l'intérêt d'utiliser comme test un effet physiologique et non toxique. Pratiquée par FREVAN, VAN Book et GappuM (144) sur l’oreillette de lapin, par Tapasxi (136) sur le cœur isolé de Rana nigra maculata, elle s’est révélée inapplicable sur le ventricule d’escargot, en raison d’une sensibilité très inconstante d’un même organe vis-à-vis d’une même dose de Scille, et des divergences de réactivité des différents ventricules vis-à-vis d’une même dose de Scille. Devant les échecs rencontrés dans l’application de cette méthode, nous nous sommes attaché à en mettre au point une seconde. Celle-ci, basée sur le principe de TREVAN, consiste à déterminer les pourcentages de cœurs arrêtés par une même dose de Scille. Ainsi, les différences de réactivité constituent le principe même de cette méthode de dosage de la Scille.

Pour effectuer ces recherches, nous avons suivi la technique physiologique d’isolement et de montage du ventricule d’Helix qui, mise au point par CARDOT, est d'exécution très simple.

A l’aide de cette technique, nous avons cherché à procéder au dosage biologique de la Scille et, à cet effet, à établir la courbe de toxicité en fonction des doses de poison. Cette courbe nous a permis le do-

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sage des poudres déjà essayées par les autres méthodes.

Ce chapitre comprend trois parties : lexposé des conditions expérimentales et de l’établissement de la courbe d’action, le dosage des poudres de Scille, enfin la comparaison des infusés aqueux et des teintures alcooliques préparées à partir de ces poudres.

8 1. — CONDITIONS EXPERIMENTALES

En ce qui concerne la méthode physiologique, nous avons suivi pour l'isolement et l’expérimentation sur le ventricule d’Helix la technique du Professeur CAR- DoT et nous nous sommes efforcé de la transformer en méthode quantitative. En ce qui concerne le mode d’épuisement optimum de la Scille pour la préparation du soluté destiné à l'essai sur le cœur isolé d'Helix, des essais systématiques ont été nécessaires.

Dans les méthodes précédentes, quelle que puisse être la supériorité d’une préparation aqueuse sur une colature alcoolique, la nature du véhicule était indifférente et n’empêchait pas le dosage. Au contraire il était permis de penser que l'essai sur le ventricule d’Helix, organe isolé, nécessiterait le choix d’une liqueur de nature particulière et bien déterminée. Cette hypothèse relevait en effet de deux faits contradictoires signalés par des précédents auteurs, à savoir d’une part la grande résistance de l’escargot aux cardiotoniques (A. J. CLarKk, 35), d’autre part la grande sensibilité pour l'alcool des cœurs d’autres poikilothermes, comme la grenouille (MaRsiGLiA, 105; RapNaï, 120; SANTESSON, 125; ToyosHimA, 142; TA- KAHASKI, 137). Ces deux faits, s’ils se confirmaient pour le ventricule isolé d’Helix, risquaient de rendre impraticable l’essai d’une teinture aussi concentrée en alcool et d’un Infusé aussi dilué que ceux utilisés dans les méthodes précédentes.

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Nous avons donc examiné successivement la méthode de dosage biologique et la méthode de pré-

paration de soluté destiné à l’essai sur le cœur isolé d'Helix.