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obtention d’une liqueur limpide. Le filtrat — qu’il est bon de diluer au 10e par exemple — ne précipite pas par le réactif de référence.
Deuxième point : nous prenons du sérum débarrassé des globulines par le sulfate Am, on filtre : le filtrat ne précipite pas par le sulfate Meg.
2) Supériorité du sulfate Mg sur le sulfate Am en néphélémétrie : Les suspensions obtenues sont opalines. très homogènes et stables.
Après un certain temps : 1-2 heures, le précipité s’agglomère en petits flocons mais une simple agitation lui restitue son apparence première.
3) Influence du degré de saturation du sulfate Mg dans l'eau : Le sulfate Mg doit être cristallisé, pur, etsa solution saturée pré-
parée à froid aura une densité de 1.28 à 15'. A des densités inférieures la précipitation n’est plus quantitative.
Ainsi, 4 tubes contiennent 0 cc, 1 d'un même sérum + 2cc,9 de solutions magnésiennes de densités décroissantes, soit: 1.28 1,25 1,20 1, 15. La densité optique du trouble mesurée après une heure donne respectivement : 64202642 58,6! 54,3.
4) Influence de la durée de contact :
La lecture doit être faite après une heure : au-dessous les D. O. d’un trouble donné sont un peu inférieures, au-dessus et jusqu’à 12 heures, elles demeurent constantes.
Technique arrêtée :
Dans un tube à hémolyse, on met, mesuré à la pipette de précision : Sérum frais LT | Solution magnésienne 2 cc, 9 On agite fortement et on fait la lecture au photo-colorimètre de Bonnet-Maury, écran 15 avec rallonge.
Cette dilution, au 30e, a été choisie de façon à ce que les sérums normaux fournissent des troubles dont la concentration en particules suspendues demeure assez faible pour se prêter à un bon dosage opacimétrique (loi de Rayleigh).
Dans le cas de sérums pathologiques, de néphrose lipoïdique par exemple, dont la teneur élevée en globulines se traduirait par des D.0. supérieures à 85, opérer sur une dilution plus haute — au 60e par ‘exemple — du sérum avec le réactif. On divisera par deux à ce moment les chiffres donnés par la courbe d'étalonnage.
Courbe d'étalonnage :
L’étalon à été un sérum dont le taux en globulines a été déterminé avec toutes les précautions voulues par la méthode gravimétrique selon Machebœuf (en substituant aux filtrations des centrifugations,
pour nous conformer aux recommandations de Baudouin-Lewin).
La courbe, construite à partir d’une dizaine de points satisfait à très peu près la loi de Beer-Lambert : en ordonnée sont inscrites les D.0. et en abcisse les résultats en grammes de globulines par litre de sérum (cf. la reproduction que nous en donnons). (1)
Confrontation avec la méthode de référence : la gravimétrie.
Ci-dessous un tableau de comparaison portant sur les sérums que nous avons étudié au point de vue des Protéines totales : Rappelons que les sérums 1 et 2 sont des sérums normaux, le 3 appartent à une néphrose, le 4 à une cirrhose du foie avec ascite, le 5 à un cancer gastrique.
Tubes 1 FA 3 L 5 Gravimétrie 28,4 34,1 38,2 L4,8 31 T. directe 29,4 32,1 40,6 48 39,1
T. indirecte 29,7 32,6 39,1 46,1 38
La concordance est aussi bonne que possible : les écarts attei- EUpas au maximum 3 à 7% pour la technique néphélémétrique dite irecte et 2 à 3% pour la technique dite indirecte. Celle-ci se caractérise par sa plus grande précision et c'est à elle, évidemment que vont nos préférences. Cependant la méthode directe, en raison de
sa très grande simplicité et de sa rapidité, nous parait dans la pra-
tique clinique également recommandable car elle fournit des!
résultats qui ne laissent pas d’être satisfaisants
(1) Voir graphique page 40.
