S 1. — TECHNIQUE

La méthode des coupes est encore celle qui m'a fourni les meilleurs résultats. J'ai fait usage de la plupart des réactifs indiqués par les auteurs qui se sont occupés de la spermatogenèse dans d’autres groupes, et, après un nombre convenable d'essais, j'ai éliminé de ma technique tous les fixateurs à base d'acide osmique pour n'utiliser que les composés chromiques ou picriques.

Les liqueurs chromo-chlorhydrique et picro-chlorhydrique, suivant les formules déjà indiquées au début de ce travail (p. 15), m'ont donné d'excellentes préparations, employées avec des teintures variées, safranine, carmin boraté, hématoxyline, etc. Dans cet ordre d'observations je n’ai pas abandonné le liquide de Roure auquel je n'ai substitué les autres réactifs que pour la démonstraion des figures nucléaires.

J'ai mis en usage, aussi, les observations sur le vivant qui, à cer- Lains égards, présentent de réels avantages sur la méthode des coupes par laquelle les éléments sont loujours plus où moins altérés dans leur forme, par les nombreuses opérations que les pièces doivent subir avant d'être examinées. Mais il est indispensable de dissocier les bryozoïdes, afin de mettre en liberté les éléments sexuels, et alors des altérations d'un autre ordre se produisent, qui entrainent des résultats erronés, si on ne les soumet au contrôle

plus scrupuleux de l'observation sur les coupes. Ces deux méthodes se complètent donc l'une l'autre, et ce n'est que dans cet esprit que j'ai pratiqué les observations sur le vivant.

$ 2. — DÉVELOPPEMENT DES SPERMATOBLASTES

Dans les espèces transparentes el sur des colonies fraîches (PT. VI, fig. 7, sp), ou sur des préparations en masse d'espèces calcaires décalcifiées (PI. VI, fig. 1, sp), ou mieux encore, sur les coupes histologiques, on constate l'existence dans la cavité générale des bryozoïdes en voie de reproduction sexuée, d'un nombre plus ou moins grand de petiles masses arrondies à saillies périphériques, müûriformes, libres ou bien retenues dans les mailles du plexus mésenchymateux. Ce sont des amas de spermatoblastes à différents élats de développement. Quelques-unes de ces pelites masses sont pourvues à leur périphérie d'un grand nombre de prolongements filiformes disposés radialement. Sur le vivant, ces prolongements s'agitent à la manière de fouets vibratiles, el chacun d’eux se dégage finalement de la masse commune pour se déplacer librement au sein du liquide de la cavité générale: ce sont les spermatozoïdes.

Sur les coupes, les morules spermatoblastiques se montrent constituées par une masse de protoplasme, limitée par une membrane dont la périphérie est occupée par un certain nombre de noyaux, à chacun desquels correspond un soulèvement de la membrane donnant à l'ensemble l'aspect müriforme que je lui déjà attribué.

Lorsque, dans une même espèce, on vient à comparer les dimensions des noyaux appartenant aux diverses masses spermatoblasliques, on remarque qu'elles varient légèrement autour de trois tailles principales : les uns sont grands (6 & à 7 w 5); d’autres, moyens (4x 5 à ou); d'autres, petits (3u à 3u5). Ces trois tailles correspondent à trois générations différentes de spermatoblastes, auxquelles je donnerai les noms de prolospermatoblastes aux plus grands, dedeutospermatoblastes aux moyens et de tritospermato-blasles aux plus petits, pour employer une terminologie adoptée par Sabatier (93-96).

Ne m'occupant plus, maintenant, que de la Lepralia Pallasiana, on distingue facilement ces trois générations dans la figure 12 (PI. VIII), qui représente une portion de coupe sagiltale et latérale voi-

sine de la paroi dorsale d'un bryozoïde de cette espèce. Si l'on recherche l'origine de chacune de ces morules, on ne tarde pas, par l'examen comparé de coupes pratiquées dans des bryozoïdes jeunes ou dans des bryozoïdes adultes renfermant un jeune polypide, à se convaincre qu'il existe une filiation entre ces trois générations el qu'elles dérivent successivement d’une cellule primitive, la cellule spermatoblastique initiale. Celle-ci, par des divisions successives du noyau, auxquelles le protoplasme ne prend pas part, produit une première génération de noyaux, les prolospermaltoblastes. Ces derniers se divisent à leur tour et fournissent une deuxième génération, les deutospermatoblastes. Enfin, ceux-ci se divisent encore el donnent la {roisième génération, les frifospermatoblastes, qui, par des différenciations ultérieures, se transforment en spermatozoïdes.

La cellule spermatoblastique initiale dérive directement de la différenciation d'un élément mésenchymaleux appartenant au réseau pariétal. Elle conserve, tout d'abord, ses relations avec ce dernier et grossit beaucoup. Son noyau s'accroit, devient arrondi et se montre constitué par des granulations chromatiques très fines qui, distribuées également et d'une manière {rès dense dans tout le noyau, donnent à ce dernier une très grande réfringence et un aspect presque homogène, comme si la chromatine se trouvait dissoute dans le caryoplasme. Ce noyau fournit, par des divisions successives, un nombre variable de noyaux-filles situés au sein du protoplasme de la cellule primitive et dont la forme et les rapports réciproques sont assez particuliers (PL IX, fig. 14,15et 16); ils sont polvédriques et se montrent distribués sur les coupes suivant des plans de clivage.

Je n'ai pas observé le processus par lequel s'opère la division du noyau dans la formation de ces amas ; mais, leur aspect chivé el leur structure très finement granuleuse m'ont fait supposer que leur multiplication devait s'effectuer par un procédé analogue à celui décrit par Sabatier (93) sous le nom de Division directe par voie de pulvérisation nucléinienne, à propos du mode de division des noyaux du blastème testiculaire des Crustacés Décapodes.

Ces divisions prennent fin à un moment donné et la cellule iniliale se trouve transformée en un amas de noyaux séparés les uns des autres par des zones étroites de protoplasme. Celui-ci s'accroil alors très rapidement, de manière que les noyaux peuvent s'éloigner de plus en plus les uns des autres. Ils perdent leur forme

polvédrique en même temps que leur aspect clivé, s’arrondissent el se portent vers la périphérie de la masse protoplasmique, dont 1ls soulèvent la membrane progressivement jusqu'à faire fortement saillie à l'extérieur et former une sorte de grappe dont les grains sont brièvement pédiculés (PL IX, fig. 17). La structure du contenu nucléaire se modifie pendant ce déplacement centrifuge. L’homogénéité et la réfringence que présentaient les noyaux pendant la période de leur division disparaissent, el la chromatine, moins finement et moins régulièrement granuleuse, se dispose sur les mailles d'un réticulum assez serré. Ainsi se constitue une première génération de noyaux aux dépens du noyau de la cellule initiale, baiïgnant dans une masse protoplasmique commune, le protoplasme fortement accru de la cellule initiale, qu'entoure encore la membrane de cette dernière. Ces noyaux sont dépourvus de toute couche deprotoplasme propre et, si je les désigne sous le nom de protospermaloblastes, ce n'est que pour indiquer qu'ils représentent la génération cellulaire à laquelle Sabatier à donné le nom de spermaltoblastes de première génération où protospermatoblastes dans les Crustacés Décapodes et les Sélaciens ; mais ils en diffèrent en ce que ceux-ci possèdent déjà, à ce stade, un corps protoplasmique individuel.

Cel amas prolospermatoblastique, une fois parvenu à cel élat, devient indépendant du lissu mésenchymateux et peut tomber dans le liquide de la cavité générale ou bien encore être retenu contre les parois du bryozoïde par les mailles du plexus. Les saillies périphériques deviennent de moins en moins proéminentes, leur pédicule se réduit et la forme morulaire du massif (PL IX.fig.18) succède à la forme en grappe. Dans chacun des noyaux, la chromatine prend des aspects variés, constituant autant de phases précédant la division cynélique, mais dont je n'ai pas recherché la succession. La figure 19 (PI. IX) représente une coupe, en partie tangentielle, de deux amas protospermatoblastiques dans laquelle ces disposilions nucléaires ont été dessinées avec le plus de fidélité possible. Quelques-uns des noyaux sont en voie de division et l'on y disüngue facilement le fuseau achromatique reliant les plaques chromaltiques.

Chacun des noyaux protospermatoblastiques se divise, en effet, en deux noyaux-filles, et l'ensemble de ces derniers constitue une

deuxième génération nucléaire, mais non cellulaire, à laquelle je

donnerai le nom de deulospermaloblastes pour les mêmes motifs que précédemment. La figure 20 (PI. IX) représente la coupe d'un massif deutospermatoblastique de formation récente ; dans certains noyaux (a), la chromatine grossièrement granuleuse est condensée en un grumeau central, el cette phase nucléaire me paraît suivre immédiatement la cinèse ; dans d’autres (b), au contraire, un réticulum granuleux occupe toute la cavité nucléaire, et,entre ceux-ci et les précédents, on peut découvrir sur la même figure toute une série de formes intermédiaires, dans laquelle la chromatine est plus ou moins dispersée dans le caryoplasme. La figure 21 (PI IX) se rapporte encore à un amas deutospermatoblastique un peu plus àgé que celui de la figure 20, dans lequel un certain nombre de noyaux sont en cinèse ; ceux-ci sont encore plus nombreux dans le massif représenté par la figure 22 (PL IX), où l'on peut voir déjà des divisions complètement effectuées de noyaux deutospermatoblastiques, chacun en deux noyaux-filles, qui constlitueront une troisième génération nucléaire, celle correspondant aux {rilospermatoblastes des Crustacés Décapodes et des Sélaciens. Enfin, la figure 23 (PL IX) montre la coupe d'un massif tritospermatoblastique, immédiatement après sa différenciation, et, bien que les phénomènes de division se produisent à peu près en même temps dans les différents noyaux de deuxième génération, iln'y a cependant pas simultanéité absolue, ainsi qu'on peut le remarquer dans la figure 22 ; c’est ce qui explique la différence de structure que présentent les tritospermatoblastes de la figure 23 et que l’on constate aussi dans ceux de la figure 24 déjà un peu plus âgés

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