MM

An

début de Tinjection . .

minute après l'injection.

ilO

CHLTB DE PRESSION

108 mm.

108 mm.

mm.

DURÉE DE DÉPRES8IOX

Plus de 21 »■.

Env. 20 min.

Ici encore, lors du dernier essai, il n'y a plus de manifestation d'ana* phylaxie, dans les conditions réalisées.

— Après chaque inscription de pression, j'ai retiré une petite quantité de sang artériel pour en déterminer la coagulabillté. On sait que, dans * la réaction de séro-anaphylaxie dn chien, le sang devient incoagulable.

Dans la première expérience :

1" essai (1 ioj. prép.) le sang coagulait en 1 heure, donc avec retard.

2* — ^2 — ) — était incoagulable.

S" — (5 — ) — était incoagulable.

4' — (14 — ) — coagulait en 10 minutes, donc sans retard.

Dans la deuxième expérience :

1" essai (l inj. prép.) le sang était incoagulable. 2* — (4 — ) — était incoagulable.

coagulait en 45 minutes, donc avec retard.

; Dans la troisième expérience : '

1*' essai (2 inj. prép.) le sang était incoagulable.

2* — (8 •— ) *- coagulait en 2 heures, donc avec retard.

Dans la quatrième expérience :

1*' essai (2 inj. prép.) le sang n*a pas été examiné.

2* — (5 — ] — était incoagulable.

3« — (9 — ..) — , était incoagulable,

4* — (18 — ) — < coagulait en 7 minutes^ donc sans retard.

Dans la ci;aquième expérience :

!•' essai (2 inj. prép.) le sang était incoagulable. 2« — (9 — ) — était incoagulable.

3« *- (18 ^ ) — coagulait en 8 minutes, donc sans retard.

Les résultats concordent bien avec ceux qui ont été fournis par Texamen de la pression artérielle. Ils sont d^ailleurs moins précieux qu'eux, parce qu'ils permettent seulement de juger s*ii y a ou s*il n'y a pas manifestation d'^naphylaxie ; ils ne permettent pas de déterminer le degré de Tanaphylaxie.

En résumé : lorsqu'on injecte, chez le ehien, du sérum de cheval sous la peau, on crée un état anaphylactique d'intensité variable, dont on peut fixer la valeur par la grandetir et la durée de la chute de pression artérielle, qui suit, chez le chien préparé, Tinjection intraveineuse de sérum de cheval. Si on répète de semaine en semaine l'injection sous-cutanée de sérum de cheval, on constate que l'intensité de la réaction d'anaphylaxie croît avec le nombre des injections, pour atteindre une valeur mazima après 4 ou o injections, puis décroît progressivement, si bien qu'après un assez grand nombre d'injections (18 par exemple), la réaction anaphylactique ne se produit plus (au moins dans les conditions expérimentales réalisées ci -dessus) : à V anaphylaxie a succédé l'immunité.

Ainsi donc le sérum de cheval inoffensif pour le chien neuf, même quand on Tinjecte à doses considérables, devient toxique pour le chien préparé par une ou mieux par quelques injections sous-cutanées de sérum de cheval; puis il redevient peu toxique, puis tout à fait inoffensif pour le chien longuement préparé par de nombi*cuses injections sous-cutanées de sérum de cheval. Donc immunité chez le chien neuf, anaphylaxie puis immunité chez le chien préparé. Il n'en faudrait pourtant

DE LASAPIIYLAXIE A L'IMMUNITÉ 247

pas conclure que la seconde immnnité est semblable à la pre-* mière; notis prouverons qu'elles sont nettement distinctes; c'est dire que le moi immunité est insuffisant. La première serait avantageusement appelée, me senible-t-il, immunité naturelle; la seconde pourrait être désignée sous le nom à'immanité acquise. N*a;t-on pas coutume d'employer ces expressions pour désigner, par la première, Tétat d'un animal neuf, réfractaire à une intoxication ou à une infection, et par la seconde, Tétat d'un animal qui est devenu réfractaire à une intoxication ou à une infection à la suite d'un traitement convenablement institué.

Remarquons simplement que, dans le cas des injections de sérum de cheval, pratiquées chez le chien, les deux états à.' immunité naturelle et d'immunité acquise existent successi- Tement, séparés par un état d'anaphylaxie ou de non-wmanité; — tandis que, dans les cas examinés par les bactériologistes, on ne signale, si je suis bien renseigné, que Tune ou l'autre immunité chez un même sujet. L'avenir nous apprendra s'il y a lieu de modifier les conceptions présentes à ce sujet.

Je n'ai pas poussé plus loin, pour le moment, mes recherches sur la signification exacte de cet état d'immunité sérique acquise du chien, et notamment je n'ai pas cherché à savpir si celle immunité masque une anaphylaxie persistante, ou si elle s'est substituée à l'anaphylaxie. C'est que je n'ai fait ces expériences sur le chien que dans le but d'orienter mes recherches sur le lapin; et, pour maintes raisons, j*estime que la démonstration que je poursuis doit être faite essentiellement sur des sujets d'une seule et môme espèce, afin d'arriver plus sûrement à une conclusion claire et précise {Arch. iniern, de physiologie, vol. 15, fasc. 3, p. 330., 1920).

Parallèlement à mes recherches sur la séro-anaphylaxie du chien et sur son immunité sérique acquise, des observations et des éludes ont été faites dans le domaine des envenimations, qui montrent assez nettement d'après les auteurs, la succession des deux états, état d'anaphylaxie et état d'immunité acquise. Ces recherches di fièrent des miennes en ce qu'on a employé

2i8 DE VANAPIIYLAXIE A VIMMUSITÉ

une substance toxique pour l*aninial neuf, dont on a noté la toxicité exagérée à la suite des premières injections préparatoires (et c*est là Tétat d'anaphylaxie type congestine), puis plus fard la toxicité moindre à la suite de nombreuses injections successives.

Chez les cheçaux serçani à la préparation da sérum anticobraïquej on constate qu*il se produit, en cours de préparation, au niveau des injections sous-cutanées dé venin de Gobra^ des lésions cutanées et sous-cutanées graves, nécroses, gangrènes, elc, ayant des analogies évidentes avec les lésions locales de séro-anaphylaxic du lapin; et légitimement, on peut admettre que ces lésions manifestent un état d*anaphylaxie cobraîque du cheval. D'autre ' part, les chevaux soumis aux injections successives de venin de Cobra acquièrent progressivement une immunité active anticobraîque très grande et fournissent tardivement un sérum anticobraîque : ils sont ainsi immunisés. Pourtant il ne faut pas considérer ces faits comme équivalents à ceux dont je viens de parler, relatifs à la séro-anaphylaxie et à la séro-immunité du chien, au moins pour le moment, car, alors même que Timmiinité anticobraîque du cheval est portée à son maximum, et que, par exemple, le cheval supporte, sans en mourir 80 doses mortelles (pour le cheval neuf) de venin, Tinjection sous-cutanée de venin provoque des lésions locales d'une extrême gravité. Nous sommes donc là en présence de faits d'anaphylaxie-immunité, comme nous en avons signalés antérieurement (p. 234), certaines manifestations de Tintoxicalion étant exagérées, d'autres étant atténuées ou supprimées. Par contre, dans les faits de séroimmunité acquise du chien, je n ai noté aucun fait d'anaphylaxie persistante : et c'est là une différence, probablement plus apparente que réelle d'ailleurs, et qui disparaîtra sans doute quand on voudra bien poursuivre dans ce domaine les études qui ne sont qu'ébauchées pour le moment.

11 faut enregistrer ici des expériences fort remarquables Jattes par Nolf sur le chien et avec da venin de Cobra (Bull Acad. rojr, de Belgique. Cl. des Se. iOlO^p. 669).

DE LASAPHYLAXIE A U IMMUNITÉ 249^

Nolf entreprend la vaccination de 6 chiens de petite tatUe, au commencement de riiiver, contre le veoin de Cobra, en pratiquant des injections sous-catanées de ce venin (le mémoire ne précise pas les doses injectées, ni la fréquence des injectioos). Deux chiens meurent en cours de préparation. Deux chiens seulement sont amenés à supporter fin mai une injection sous-cutanée de 3 centigrammes de venin. Ces animaux ont été éprouvés dans leur résistance à l'injection intraveipeuse de venin le 23 mars, le 8 et le 24 juin. Ils ont reçu, la 1'^ et la 2* fois, 1/3 de milli- ^amme de venin par kilogr. et la 3* fois 1 milligramme de venin par kilo^r. ^

Au 23 mars, Nolf injecte du venin de Cohrn comparativement dans les veines d'un chien neuf et dans les veines d'un chien préparé : il note les modifications de la pression artérielle, de la coagulabilité du sang et du nombre des leucocytes.

l*" Chien neuf de 4.800 grammes.

A 15 h. 15, prise de sang : il coagule en 11 minutes; il contient 18.400 leucocytes par millimètre cubç.

A 15 h. 25, la pression carotidienne est de 170 millimètres.

A 15 h. 25, on injecte dans les veines en 8 secondes, 1 cmc. 6 d'une solution de venin de Cobra à 1 p. 1.000 (jugulaire).

A 15 h. 27, la pression carotidienne est de 104 millimètres.

A 15 h. 29, la pression carotidienne est de 132 millimètres.

A 15 h. 30, prise de sang; il coagule en 21 minutes; il contient 14.700 leucocytes par millimètre cube.

L'animal survit.

Ainsi, après une injection intraveineuse de 1/3 de milligramme de venin de Cobra, il se produit une chute modérée et transitoire de la pression carotidienne. La coagulabilité du sang est peu modifiée. Le nombre des leucocytes est légèrement abaissé.

Si on répète l'expérience sur des chiens neufs dans les mêmes conditions, on obtient des résultats équivalents, en particulier pour la chute de pression. A noter toutefois que tantôt les animaux survivent et tantôt ils meurent en 24 heures.

2*» Chien préparé de 12 kilogrammes (23 mars).

La dernière injection préparatoire de 1 centigramme de venin avait été faite sous la peau le 28 février.

A 18 h. 15, prise de sang : il coagule en 5 minutes, il contient 15.100 leucocytes par millimètre cube.

A 18 h. 24, la pression artérielle est de 186 millimétrés.

A 18 h. 24, bn injecte dans la jugulaire en 9 secondes 4 centimètres cubes d'une solution de venin de Cobra à 1 p. l.OOC».

A 18 h. 26, la pression est de 64 millimètres : agitation, dyspnée, défécation.

A 18' h. 29, la pression est de lOi millimètres, puis elle redescend.

A 18 h. 34, la pression est de 70 millimètres.

A 18 h. 38, prise de san^ : ce sa.ng est encore fluide après 24 heures il contient 4.900 leucocytes par millimètre cube.

L'animal survit.

Mêmes résultats avec le second chien préparé.

Donc les animaux préparés présentent une réaction vasculaire plus ùette que les animaux normaux : la pression est fortement abaissée; le nombre des leucocytes est considérablement diminué; la coagulabilité

250 DE i:asapuylaxie a V immunité

du sang est supprimée. Ce sont là fuits identiques à ceux qu'on note dans la réaction de séro-anaphylaxie.

— Les résultais sont tout autres à la fin de la préparation : on en jugera par les données suivantes :

1' Chien neuf de 6.500 grammes.

A il h. 02, prise de sang; il coagule en 12 minutes; il contient 14.200 leucocytes par millimètre cube.

A 11 h. 16, la pression carolidienne est de 176 millimètres. ,

A 11 h. 16, on injecte dans la jugulaire en 7 secondes 6 cmc. 5 d'une solution de venin de Cobra à 1 p. 1.000, soit 1 milligramme par kilogr.

A 11 h. 19, la pression est de 64 millimètres.

A 11 h. 22, prise de sang : à 15 heures, il y a un caillot partiel ; le lendemain matin, il y a un caillot semi-fluide. Le nombre des leucocytes est de 7.900 par millimètre cube.

A 11 h. 22, la pression est de 120 millimètres.

L'animal meurt à 11 li. 58 par paralysie respiratoire.

2^ Chien préparé de 9.500 grammes (24 juin).

L'animal a reçu à la fin de mai 3 centigrammes de venin de Cobra ~en solution à 1 p. 1.000 sous la peau.

A 11 h. 50, prise de sang; il coagule en 10 minutes; il contient 9.500 leucocytes par millimètre cube.

A 12 heures, la pression carotidienne est de 146 millimètres.

A 12 heures, on injecte dans les veines en 10 secondes 9 cmc. 5 d'une solution de venin de Cobra à 1 p. 1.000.

A 12 h. 02, la pression est de 100 millimètres.

A 12 h. 04, la pression est de 148 millimètres.

A 12 h. 06, la pression est de 152 millimètres.

A 12 h. 10, prise de sang; il coagule en 12 minutes; il contient 4.500 leucocytes.

L'animal a survécu.

Donc, au début de la préparation, l'injection intraveineuse d'une faible dose (un peu inférieure à une dose sûrement mortelle) de venin de Cobra produit des manifestations d'un état d'anaphylaxie léger. A la fin de la préparation, l'injection intraveineuse d'une dose de venin de Cobra qui tue les animaux témoins en moins d'une heure, n'a, chez les animaux préparés, aucune conséquence fâcheuse ni immédiate, ni lointaine : on ne constate plus chez eux de manifestations d'anaphylaxie .

Voilà des faits que Nolf signale : au début, on reconnaît V anaphylaxie ; plus tard, on reconnaît V immunité.

Remarquons toutefois que l'immunité dont il s'agit n'est pas rigoureusement pure. Nolf indique dans son mémoire la formation d'abcès gangreneux au niveau du point d'injection du venin sous la peau, et c'est là un fait d'anaphylaxie. Il s'agit

DE VANAPIIYLAXIE A VJMMVMTÉ 251

donc encore ici d'an cas d'anaphylaxie-immunité. Et cette conclusion sera confirmée ci-dessous par des expériences de Nolf hii-même, sur l'action anaphylactlsante ou immunisante du sérum des chiens dont nous venons de parler, exercée sur des chiens neufs, action anaphylactisante ou immunisante, selon la dose employée.

J'ai songé à faire des expériences équivalentes chez le lapin, à rechercher, par exemple, si, après avoir fait apparaître la séro-anaphylaxie chez le lapin par quelques injections souscutanées de sérum de cheval, on ne pourrait pas rendre l'animal insensible à Faction de ce sérum injecté dans les veines, et c'eut été la répétition de mes expériences sur le chien; — ou si, après avoir fait apparaître la Cobra-anaphylaxie chez le lapin par quelques injections sous-cutanées de doses minimes de venin de Cobra, on ne pourrait pas rendre Tanimal insensible à Taction d'une dose déterminée de ce vçnin injecté dans les veines, dose capable de produire des accidents chez le lapin neuf, et c'eut été la répétition des expériences de Nolf.

Je n'ai pu jusqu'à présent réaliser ce dessein. Quand on injecte du sérum de cheyal sous la peau du lapin, il se produit, après quelques injections, des lésions locales graves, et dont la gravité croit à mesure que les injections se multiplient : abcès, gangrènes, nécroses s'étendent de plus en plus, déformant L'animal, envahissant toute la paroi abdominale, et déterminant chez lui l'amaigrissement le plus considérable ; que si l'on continue malgré tout les injections, l'animal meurt cachectique. Quand on injecte le sérum dans le péritoine, l'état cachectique se développe prématurément. Quand on injecte le sérum dans les muscles, les accidents locaux se produisent parfois aussi vite que dans le cas des accidents par injections sous-cutanées, tantôt un peu plus tard, mais toujours assez tôt pour arrêter prématurément la préparation. Dans ces divers essais, l'animal a toujours présenté des manifestations anaphylactiques puissantes; jamais je n'ai noté d'indices d'immunisation même légère .

J ai essayé de diluer le sérum servant à la préparation des animaux, pour supprimer les lésions locales : je suis parvenu simplement à en relarder l'apparition, de sorte que les abcès anaphylactiques se présentaient à la suite de la 10« injection par exemple, au lieu de se présenter à la suite de la 6% ainsi qu'il arrive quand on utilise le sérum non dilué. Mais, après 10 injections de sérum dilué, c'est l'état anaphylactique pur qu'on peut constater et nullement Timmunilé. Peut-être eut-il fallu

252 DE VANAPHYLAXiE A VIMMUNITÉ

diluer plus encore le sérum, et, par exemple, le diluer à 1 pour 100 au lieu de le diluer à 1 pour 10 comme je lai fait. Mais, à priori, cela ne semble pas être la bonne voie à suivre, car Timmunité apparaît d*autant plus vite et d*autant plus fortement qu'on a injecté la substance toxique à dose plus élevée.

Les mêmes remarques peuvent être présentées relativement aux essais que j'ai faits avec le venin de Cobra. Là encore les accidents locaux se présentaient de bonne heure, et ne permettaient pas, si Ton insistait, de prolonger longtemps la préparation. Et surtout la répétition des injec-' tions de venin de Cobra à dose minime ne tarde pas à engendrer un état de cachexie progressive, incompatible avec la vie. Si j'ai pu reconnaître chez des lapins traités par des injections sbus-cutanées de venin de Cobra des manifestations anaphylactiques très nettes à la suite de rinjectîon intraveineuse du venin (p. iG3), je n'ai jamais pu reconnaître une atténuation des accidents protéotoxiques de la cobraïsation ; seuls les accidents curariques ont été réduits, ainsi que je Tai établi ci-dessus, de telle sorte que le lapin a présenté un état d'anaphylaxie-immunité remarquable (p. 235) sans doute, mais ce n'est pas là ce que je désirais obtenir pour la présente étude.

Malgré ce/ insuccès multiples, je n'ai pas abandonné la partie, et j*ai fini par obtenir des résultats, qui sont équivalents aux résultais que Nolf a obtenus, ou à peu près, en utilisant le venin de Crotalus adamanteus.

J'avais remarqué en effet que ce venin ne provoque pas, qtiand il est injecté à plusieurs reprises chez le lapin, à dose non mortelle et en solution très étendue, les acci4ents locaux ou de cachexie que provoquent dans les mêmes conditions les autres venins, et en particulier le venin de Cobra et le venin de Daboïa. Le venin de Crotalus adamanteus se prêterait donc vraisemblablement beaucoup mieux que les autres venins aux expériences dans lesquelles il conviendrait de répéter longuement les injections préparatoires.

En conséquence, j'ai entrepris de préparer des lapins par un nombre variable d'injections sous-cutanées de venin de Crotalus adamanteus et d'examiner les résultats de Tinjection intraveineuse d'une quantité déterminée du même venin chez les divers sujets en expérience, afin de juger s'il était possible de reconnaître une première phase d'anaphylaxie manifestée par l'exagération des phénomènes protéotoxiques engendrés par rinjection intraveineuse du venin, et une seconde phase d'immunité manifestée par ratténualion et éventuellement la suppression de ces phénomènes protéotoxiques.

DE VASAPHyiAXIB A IIHHUNITÈ