CHAPITRE XVI

LES SERUMS ANTIVENIMEUX

SOMMAIRE, — Les sérums aniivenimeux.

Les sérums anthenimeux neutralisent toutes les manifestations toxiques des venins correspondants. — Spécificité des sérums aniivenimeux : examen des venins de Lachesis lanceolatus et de Crotalus terrificus, des sérums antibothropique et anticrotalique. Démonstrations de la spécificité par des expériences in vitro.

V antivenin agit directement sur le venin : démonstration très simple de cette propriété in vitro, dans le cas des venins coagulants et dans le cas des venins anticoagulants. — La neutralisation du venin par V antivenin est un phénomène instantané. Démonstration in vivo ; injection intraveineuse de mélanges de venin et de sérum correspondant aussitôt après leur préparation ; suppression des accidents de V envenimât ion y même les plus précoces. Démonstration in vitro faite à l'aide des venins coagulants type thrombine et des sérums antagonistes. Ce qui Se produit quand on injecte successivement dans les veines, le sérum^ puis le venin : exposé de faits . — Les sérums antivenimeux sont préventifs, — Ils sont caratifs; da sens qu il faut attribuer à ce mot. Etude de l action curative du sérum anticobraïque, chez le lapin cobraisé soumis à la respiration artificielle. De quelques conditions de cette action curative. Sur la pente dangereuse des hypothèses . Comme le curare, le venin de Cobra supprime la motilitéj mais conserve la sensibilité; expériences dédiées à Cl. Bernard. —Etude sur V immunité passive conférée par les injections de sérum anticQbraîque : influence de la voie d'introduction^ intraveineuse f intrapéritonéale intramusculaire et souscutanée. Résultats expérimentaux et conclusions thérapeutiques. — De révolution de V immunité passive anticobralque ; influence de la quantité de sérum injectée, — Etude de Vimmunité passive anti-

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cobralque chez les anaphjrlactisés. Expériences conduisant à con^ dure que laction antitoxique du sérum anticobraîque est diminuée chez les anaphylactisés. Rectification^ expérimentale de cette conclusion ; signification des faits qui pouvaient conduire à sonadmis^ sion^ et justification expérimentale de la signification proposée, — De la régénération d*une toxine unie à Vantitoxine correspondante : démonstration éminemment simple.

Un chapitre au moins manque en mon exposé : c'est celui de Tétude de Fimmunisation et de Timmunité : mes études dans ces domaines ne sont qu*ébauchées ; les méthodes qui me permettront de les entreprendre, et je Tespère de les mener à bonne fin, ne sont pas encore définitivement établies. C'est là l'œuvre de demain.

Par contre, j'ai fait de nombreuses recherches sur les sérums antiçenimeux, c*est-à-dire sur des sérums qui sont tous antiprotéo toxiques^ tout en étant encore souvent autre chose. Un ouvrage sur les protéotoxies peut, sans que Tauteur manque à la règle de Tunité de composition, comprendre un chapitre sur les sérums antivenimeux .

Les venins ont, pour les études d'immunisation, un grand avantage sur les toxines : c'est que leur action toxique comporte plusieurs éléments qui permettent de mesurer exactement leur toxicité et d'en connaître les variations même minimes sous des influences et dans des conditions diverses. Dès lors, on peut espérer que les sérums antivenimeux permettront de résoudre maints problèmes relatifs aux antitoxines bien mieux que ne le permettraient les sérums antitoxiques (antidiphtérique et antitétanique, par exemple), et bien plus élégamment.

Les faits exposés ci-dessous justifieront amplement ces prévisions.

Les expériences ont été faites avec 4 sérums antivenimeux : le sérum antiçenimeux de V Institut Pasteur — qu'on devrait appeler sérum anticobraîque — fourni par des chevaux immunisés contre le venin de Cobra; les sérums aniicroialique et antibothropique de l'Institut sérothérapiquc brésilien de Sïio Paulo^ fournis par des chevaux immunisés respectivement contre le venin de Crotalus terrificus et de Lachesis lanceolatus

Arthus. — Anaphylaxie. 19

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(le sérum aniîbothn^iqiie est fourni par des chevaux traités par un mélange de trois venins» da venin de Lachesîs lanceolatus et des venins de deux autres espèces de Lachesis); le sérum antiscorpionique de Flnstitnt sérothérapique de Londres, foomi parmi des cberaox immanisés contre le venin da Scorpion égyptien, Buthus qninqne-sfriatiis.

' Les sér*ams aniiçenimeux neutralisent toutes les manifestations toxiques des venins correspondants.

Nous pouvons sans peine démontrer cette proposition avec tons les sérums anti venimeux.

Le çenin de Cobra détermine tout d'abord des accidents protéo toxiques, et notamment une chute légère de la pression artérielle, une accélération modérée de la respiration et une diminution de la coagulabilité du sang; puis des accidents carariques, et enfin, si la vie est entretenue par la respiration artificielle, et si la dose de venin injectée est sufiîsante (supérieare à 2 mgr. pour un lapin de 2 kilogrammes) des phénomènes tardifs de dépression progressive.

Or, si on ajoute à 3 milligrammes de venin de Cobra dissous dans 3 centimètres cubes d*eau salée du sérum anticobraïque à la dose de 5 centimètres cubes, et si on injecte ce mélange dans les veines d'un lapin, on constate la suppression, ou, pour parler plus exactement, Tabsence de toutes les manifestations toxiques, primaires, secondaires ou tertiaires : ranimai survit sans présenter aucun accident. La pression artérielle ne présente pas de chute précoce, même légère et temporaire; le rythme respiratoire n'est pas modifié; le sang retiré delà carotide, quelques minutes après l'injection, coagule comme le sang d'un lapin neuf, recueilli dans les mêmes conditions ; il ne se produit pas de dyspnée, et a fortiori pas de manifestations asphyxiques ; la pression sanguine se maintient inaltérée pendant 2 heures et plus, soit jusqu'à la fin de l'observation.

Le çenin de Crotalus terrificus est, comme on sait, coagulant in çitro : il produit la transformation fibrineuse des liqueurs fibrinogénées, notamment du plasma de sang citrate

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de cheval, ou de solutions chlorurées sodiques de [fibrinogène. Injecté dans les veines du lapin, il peut, si la dose est suffisante, provoquer la coagulation intravasculaire générale et la mort foudroyante; à dose moindre, il détermine une chute de la pression artérielle, temporairement interrompue par une hypertension accompagnée de cardio- modération; à dose plus cousin dérable, si Ton prend soin de fractionner Tinjeetion pour éviter les coagulations massives, il provoque une dépression progressive mortelle.

Or, si on ajoute à 3 milligrammes de venin de Grotalus terriûcus (dose largement suffisante pour provoquer la thrombose généralisée et la mort foudroyante], 3 centimètres cubes de sérum, anticrotalique, on supprime tous ces phénomènes. Ce mélange ne fait coaguler, ni le plasma citrate, ni les solutions de fibrinogène in vitro. Injecté dans les veines du lapin, il ne détermine ni thrombose, ni chute de pression, ni hypertension. L*animal survit sans . présenter aucun accident pendant des semaines et des mois.

Mêmes résultats, totalement négatifs, quand on prépare des mélanges de 3 milligrammes de çenin de Lachesis lanceolattis et de sérum antibothropique.

Enfin le sérum antiscorpionique neutralise totalement le venin de Scorpion d'Egypte qui ne produit plus (quand il est additionné du sérum antiscorpionique), ni hypertension^ ni cardio-modération, ni tremblements généralisés, ni salivation considérable, ni myosis intense.

Tous lés faits observés sont rigoureusement concordants; ils justifient la proposition : les sérums anti venimeux neutralisent toutes les manifestations toxiques des venins correspondants .

Les sérums anlivenimeax sont-ils spécifiques, c'est-à-dire ne neutralisent-ils que le venin qui a servi à la préparation des chevaux qui Font fourni, ou agissent-ils indistinctement sur tous les venins?

Cette question a reçu des réponses diverses dans les cours des 25 dernières années. Sans entrer dans les détails, il convient de rappeler à ce propos ce qui suit.

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Calmetle a soatena tout d'abord l'opinion que les sérums anliveiiimeax neutralisent tous les venins, quel que soit le venin employé pour préparer le cheval fournisseur de sérum. Plus tard, il a modifié quelque peu sa conception première, sans renoncer pour cela à la notion de nonspécificité des sérums antivenimeux. Imaginant que les venins contiennent en proportions Variables deux substances toxiques, i*une qu'il appelle la neuroioxine, l'autre qu'il appelle lliémorragine, il considère des sérums anlinëurotoxiques fournis par des chevaux préparés à Taide de venins dans lesquels prédomine la neuroioxine (tel le venin de Cobra) et capables de neutraliser la neurotoxine de tous les venins quelle qu'en soit l'origine; — et des sérums antihémorragine fournis par des chevaux préparés à Taide de venins dans lesquels rhémorragine prédomine (tel le venin de Bothrops) et capables de neutraliser l'hémorragine de tous les venins qu'elle qu'en soit l'origine.

Cette conception a été combattue par Kanthack, par Lamb et Hanna, par Uogers, par C. J. Martin, par Tidswell, par Fraser et Elliot, Sillar et Carmichael, en général par tous les expérimentateurs qui ont étudié les venins et les sérums antivenimeux.

Je ne me propose pas de faire Tétude complète de cette question) ni au point de vue liistorique, ni au point de vue expérimental (ou trouvera cette élude expérimentale résuuiée dans mes deux mémoires des Archiçes iniennationales de physiologie vol. H, lasc. 3 p. 265-284 et p. 317-338, 1912). Je désire seulement donner quelques résultats plus nels, plus précis, plus frappants que tous les autres, établissant sans discussion possible la notion de spécificité des sérums antiçenimeax.

11 s'agit d'expériences faites avec les venins de Crolaliis terrificus et de Lachesls ianceolatus et avec les deux sérums correspondants : le sérum anticrotalique et le sérum antibathropique .

Les deux venins considérés sont remarquablement équiva' lents (à un détail près). Injectés dans les veines du lapin à dbse suffisante (1 milligramme par exemple, chez le lapin de 2 kilogrJ, ils provoquent une coagulation intravasculaire massive très rapidement mortelle. Injectés dans les veines du lapin à dose faible fi/4 de milligramme par exemple), ils déterminent une chute précoce de la pression artérielle et diminuent la coagulabilité du sang circulant. Injectés dans les veines du lapin en même temps que du venin de Cobra, ils précipitent révolution de la cobraisation. In çitro, ils font coaguler les liqueurs fîbrinogénées, sangs ou plasmas fluorés, oxalatés et citrates, liquides de transsudats, solutions chlorurées sodiques

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de fîbrinogène, agissant comme agirait la thrombine du sérum sanguin. Entre ces deux venins, je n'ai noté, dans 1 étude très précise que j'ai faite de leurs propriétés, qu'une petite différence : à la suite de Tinjection intraveineuse de venin de Crotalus terrificus, la chute précoce de pression est interrompue pendant quelques minutes par une ascension très nette açcom?

pagnée de cardio-modéfation, tandis qu à la suite de Tinjection intraveineuse de venin de Lachesis lanceolatus la chute do pression est régulière et continue.

Malgré ces remarquables similitudes des deux venins, les sérums correspondants sont rigoureusement spécifiques : le sérum anticrotalique, qui supprime toutes les manifestations toxiques du venin de Crotalus terrificus, ne supprime ou n'atténue aucune des manifestations toxiques du venin de Lachesis lanceolatus, et le sérum antibothropique, qui supprime toutes les manifestations toxiques du venin de Lachesis lanceolatus, ne supprime ou n'atténue aucune des manifestations toxiques du venin de Crotalus terrificus.

Il est inutile de transcrire ici les protocoles d'expériences, qui ne feraient qu'alourdir cet exposé. On les trouvera dans mon mémoire des Archiçes internationales de pliy^-siologie vol. 41, fasc. 3, p. 32o, 1912.

In vitro, la démonstration de la spécificité des sérums antibothropique et anticrotalique revêt un caractère de simplicité et d'élégance remarquables.

Si on ajoute à du sang de peptone (de chien) ou à du plasma oxalaté, fluoré ou citrate de sang.de cheval, ou à une solution chlorurée sodique de fibrinogène pur, soit du venin de Lachesis lancteoltttus, soit du venin de Crotalus terrificus, on en provoque la coaguïatioji;! fibrineuse rapide : ces deux venins contiennent une thronibine équivalente à la thrombine du sérum sanguin, "z",^;

Si, aux . mêiiiôs liqueurs fibrinogénées, on ajoute soit un mélange de venin de Lachesis lanceolatus (1 milligramme), et de sérum antibothropique (1 centimètre cube), soit un mélange de venin de Crotalus terrificus (4 milligramme) et de sérum anticrotalique (4 centimètre cube), on n'en détermine pas la

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coagalation : les deux sérams ont supprimé Taetion coagalanle des venins correspondants.

Mais le mélange du venin de Lachesis lanceolatus (1 milligramme) et de sérum anticrotaliqne (1 centimèti*e cube), on le mélange du venin de Grotalus terriQcus (1 milligramme) et de sérum antibothropique (1 centimèti*e cube) possèdent, comme les venins seuls, une action coagulante puissante, aussi puissante que si les venins avaient été employés sans sérum .

Je prépare 4 mélanges forinéâ de 2 cenlimètres cubes de plasma de Bang oxalaté de cheval et de

a) 4 gouttes venin de Lachcsi» à 1/000 + 4 gouttes sérum antibothrop. h) k — — — — 4-4 — — anticrotal.

c) 4 — — de Crotalus — -h 4 — — antibothrop.

d) K — — — — -f-4 — — anticrotal.

Les mélanges 6 et e coagulent en bloc en moins de 1 minute (à la température du laboratoire) ; les mélanges a et d ne coagulent pas» même en 24 ou 48 heures.

Ce dernier essai, réalisable facilement en public, illustre, mieux que toute expérience compliquée et délicate, cette notion fondamentale de la spécificité des sérams antiçenimeux. (Presse médicale, 6 janvier 1912).

Vantiçenin agitai directement sur le çenin pour le neutra- User, ou bien agit-il sur Vorganisme sensible à Vaction du çenin pour V insensibiliser à cette action ?

Les opinions ont varié sur cette question. A certaine époque, et dans certaines écoles tout au moins, on a admis que Fantitoxine agit sur Forganisme sensible pour Tinsensibiliser à Tactton de la toxine. On a généralement renoncé à cette doctrine depuis qu'Ehrlich a établi que le sérum antiricine neutralise la propriété hématoly santé de la ricine in vitro. . v'

Mais là encore, il y a un élément h islo logique en jeu et on pourrait supposer, me semble-t-il, que l'antitoxine agit sur cet élément poar rinsensibiliser à Taction de la ricine. La démonstration que je vais donner ne prête pas à cette objection.

Je prépare, selon les procédés classiques, une solution chlorurée sodique de fibriuogène pur. Gomme je Tai noté à plusieurs reprises, les venins de Crotalus terrificus et de Lachesis

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lanceolatas en provoquent U coagulation fîbriiiease. Je pré* pare anç solation chlorarée sodique de chacan de ces venins à i p. 1.000 et je réalise les mélanges suivants :

Solution fibrinogène.

m) 2 cmc. + 4 goattes venin de Laehesis .

n) 2 — 4-4 — Crotaius.

p) 2 — -{- 4 . — Laehesis 4- 4 gouttes sérum antibothrop.

^) 2 — 4- 4 — Crotaius 4- 4 gouttes sérum anticrot.

Les deux premiers mélanges m et n sont coagulés en quel* qnes minutes; les deux derniers n^ sont pas coagulés en *ii heures (l'activité thrombine des sérums antîbothropique et anticrotalique est nulle, comme celle de tous les sérums longuement conservés) .

La neutralisation s est faite ea dehors de la présence de Forganisme, et en dehors de la' présence de tout élément organisé {Presse médicale, 6 Janvier 1912).

— On peut faire la même démonstration avec le çenin de Cabra et Le sérum anticobralque.

Nous avons rapporté ci-dessus (p. 196) que le venin de Cobra retarde la coagulation du plasma citrate de cheval, quand on ajoute à celui-ci du chlorure de calcium, comme si le venin de Cobra retardait la transformation de la prothrombine en thrombine.

Eu voici un exemple :