II. — L'’Isotonie dans la citratation du sang

Dès qu’on manipule du sang de chien on s'aperçoit vite d’une fragilité, réelle ou apparente, de ses hématies. Le laquage se produit facilement semble-t-il pour des causes auxquelles auraient résisté les globules rouges des autres espèces. Le sang de chien recueilli dans un flacon de verre stérilisé et parfaitement sec, sans addition d’aucun pro-

duit, nous a donné parfois, après coagulation et au bout de quelque temps, un sérum teinté d’hémoglobine ; or ceci ne se produit pas avec le sang des autres espèces domestiques. En ce qui concerne l’addition de citrate de soude pour rendre le sang de chien incoagulable, nous avons employé au début des solutions titrant 8 à 10 % environ selon l’exemple de la médecine humaine et suivant les méthodes employées pour la transfusion sanguine chez les grands animaux. Mais l'emploi de ce taux, qui en médecine humaine avait donné d’excellents résultats au Docteur JEANBRAU et à d’autres chirurgiens pendant la guerre et qui continue à être employé (Paul MICHON), nous donnait souvent, après centrifugation du sang citraté, un plasma teinté par l’hémoglobine provenant de la Iyse des hématies.

Il fallait donc recourir à une isotonie plus rigoureuse pour éviter ce phénomène.

On peut aisément trouver le titre de la solution de citrate de soude sensiblement isotonique au sang en se basant sur :

A. — La connaissance des coefficients isotoniques pratiques, déduits des expériences de DE VRIÈS sur la plasmolyse :

Concentration moléculaire d’un non électrolyte

Concentration moléculaire d’un électrolyte

B. — La formule générale : À = K —— M où A — abaissement cryoscopique (point de congélation).

K — abaissement moléculaire du point de congélation. P = poids de substance à dissoudre.

M = poids moléculaire de la substance à dissoudre. Les données déjà connues sont :

i = — pour un électrolyte qui donne 2 ions en solution dans l’eau (Na CI par exemple). £ 1= — do 3 ions do (S04 Na 2 do 1= — do 4 ons do (PO4 Na2 oa citrate 2 trisodique par exemple).

A = — 0°,555 pour tous les sangs.

K = — 35,10 pour le chlorure de sodium.

Le poids moléculaire du chlorure de sodium est, d’après, la somme des masses atoniques de ses éléments de :

(Na = 23) + (CI = 35,5) = 58,5 gr.

Le poids moléculaire du citrate de soude se calcule de même d'a-

près sa formule, et varie dans d’assez fortes proportions selon les variations de ses molécules d’eau de cristallisation :

CO°Na | CHF | HO — C—CO?Na + 2°H°0 ou 11 HO | CH?

| CO°Na En additionnant les masses atomiques des éléments on a : avec le citrate à 2 H°O avec le citrate à 11 H°O RONA 61C ae CRE RC 27 H = 27 SCENE Ve 18 (0 =0288 3 0N4 40000 SAN4 2000 Poids moléculaire : 2094 Poids moléculaire : 456 M

En partant de la formule À = K ——, on peut trouver le poids P

de chlorure de sodium à dissoudre pour obtenir une solution isotonique au sang ayant le À = — 0°,555.

À x M o,555 x 58,5 Pre = = O gr. 925 pOur 100 CC.

Pour trouver la concentration moléculaire du chlorure de sodium il suffit de savoir combien de fois son poids moléculaire est compris dans o gr. 925, soit :

0,925 Concentration moléculaire de chlorure de sodium = ——— = o moléc. o1s8r

58,5 En appliquant cette donnée dans le rapport du coefficient isotonique pratique équivalent à - — 1,5 pour le chlorure de sodium qui est ionisé en 2 ions en solution dans l’eau, on peut en tirer la valeur de la concentration moléculaire d’un non électrolyte :

Concentration moléculaire d’un non électrolyte

——————— ————.——""—"—"—"."" " " " = j,s Concentration moléculaire du chlorure de sodium

d'où concentration moléculaire d’un non électrolyte = 1,5 X o,01581 = 0,02371

Or, en tenant compte que le citrate de soude est ionisé en 3 ions Na + et en 1 ion citrique …, soit 4 ions, et que le coefficient isotonique pratique pour un électrolyte qui fournit 4 ions en solution dans l’eau

égale = 2,5, On peut en tirer la valeur de ia concentration moléculaire du citrate de soude :

Concentration moléculaire d’un non électrolyte 0,02371 RE er RS PR GER 7) Concentration moléculaire du citrate de soude X Ë

0,02371 d’où X = ————— — o moléc., 00948

Pour évaluer le poids de o moléc., co048 de citrate de soude, il suffit de multiplier cette fraction de molécule par le poids moléculaire du citrate de soude ; et l’on a :

1° Avec le citrate à 2 H?0 : 0,00948 X 294 = 2 gr. 787 pOur 100 CC. 2° Avec le citrate à 11 H?2O: : 0,00948 X 456 = 4 gr. 322 pour 100 CC.

Cependant, il existe une tolérance assez grande dans l’emploi des solutions isotoniques, et l’on sait par exemple qu'on utilise les solutions isotoniques de chlorure de sodium variant de o gr. 7 à o gr. 9 pour 100. Aussi peut-on calculer les solutions de citrate de soude correspondant à ces solutions de chlorure de sodium.

Si l’on admet 0 gr. 8 pour 100 dans l’isotonie du Na CI, le \ 2 gr. 599 pour 100, avec le citrate à 2 H20 calcul donne les valurs correspondantes de........... 3 gr. 720 pour 100, avec le citrate à 11 H20

Si l’on admet 0 gr. 7 pour 100 dans l’isotonie du Na Cl, le 2 gr. 107 do 2? H20 calcul donne les valeurs correspondantes de............ 3 gr, 269 do 41 H20

Dans la pratique, nous avons utilisé LE CITRATE DE SOUDE CRIS- TALLISÉ À 2 H°O, en solutions hypertoniques, généralement comprises entre 5 et 6 gr. pour 100 cc. d’eau distillée, dans le but de diluer le moins possible le sang et d’avoir ainsi moins de liquide à transfuser.

Ces taux de 5 à 6 grammes pour 100 cc. nous ont semblé atteindre, dans les conditions où nous les avons utilisés (1), l'extrême limite de tolérance des globules rouges du chien, et être par conséquent ceux des solutions les plus concentrées qu’on puisse employer sans provoquer le phénomène de l’hémolyse.

Les solutions d'environ 10 gr. pour 100 cc. employées pour le

(1) Nous voulons faire remarquer par là qu'ayant dans la généralité de nos transfusions mêlé 10/10° de sang à 1/10° de solution citratée à 5,5 environ pour 100, la concentration moléculaire du mélange était moins hypertonique par rapport à la concentration moléculaire du sang, que la solution de citrate de soude à 5 gr. 5 pour 100 employée.

sang de l’homme ou celui des grandes espèces domestiques Seraient donc beaucoup trop fortes pour le sang de chien et il faudrait en diminuer la concentration en citrate en se rapprochant des taux que donnent les calculs ayant pour origine les expériences de DE VRIÈS et la

formule générale À = K ES

III, — Toxicité du citrate de soude

L'utilisation du citrate de soude nécessite la connaissance exacte de son action toxique sur l'organisme animal et, si possible, des moyens de l’éviter ou de la combattre. M. le Professeur PANISSET a publié en 1925 un résumé de travaux sur l” « ETUDE EXPÉRIMENTALE ET CLINIQUE DU CITRATE DE SOUDE CHEZ LES ANIMAUX ». Il y explique la toxicité de ce produit chez toutes les espèces domestiques, décrit les différents symptômes qu'il provoque et fixe à o gr. 25 par kilogramme d’animal sa toxicité chez le chien. Sur le conseil de M. le Professeur PANISSET nous avons repris cette étude.

Les expériences ont été faites dans les conditions suivantes :

Après avoir pesé le chien, nous lui injections dans la veine jugulaire une solution de citrate de soude, en quantité plus ou moins importante selon la dose du produit à expérimenter.

Les injections ont été poussées lentement pour éviter l'influence de la rapidité sur le choc.

Les solutions n’ont jamais été très concentrées, et se sont trouvées être aux environs de 8 %.

Le citrate de soude utilisé était l’officinal en cristaux à 2 H?O.

Nous ne retiendrons en détail que quelques expériences choisies parmi les plus caractéristiques ; nous réservant à la fin de ce chapitre de publier un tableau de toxicité, par doses décroissantes, du citrate de soude en injection intra-jugulaire, qui résumera tous nos essais.