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FIGURE 26, Spectres donnés par les différontes fractions de 1! élu- Me de 1! urine sou- LA qui avait servi aux essais précédents avec le scatol cet 1!
indol Ià, les trois pre = micrs tubes de Lt élue tion sont incolores, Le spectre I correspond au & ° tube é retrouve encore Le plus fort naxinun au 2° spectre ct le dépla= cenent du ner vers 520 TR dans Les derniers
spectres +
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Pa ces trois groupes di essais faits avec 1? urine pure et addition née dt indol ét de scatol, nous voyons que ces deux corps ne peuvent pas prêter à confusion, parce que leur moment de sortie est irmédiat et nette nent antériour à celui de 1f acide indol-acétique et de plus, les spectres respectifs de 1! indol et surtout du scatol sont nettement différents de celui de 1! acide indol=acétique , 2
Toutefois si 1! on regarde les courbes IV de 1! urine + 1! indol (fige 25 ) et de 1! urine + le scatol (Fig. 24) ct la courbe II de 1° urine seule ( Fig. 26 ), on s! aperçoit que, dans ce dernicr cas, le maxi = nun est beaucoup plus élevé que dans les 2 autres, alors que nous nous trouvons aux mênes moments des élutions . L' äindol ct surtout le scatol seraient donc cause,soit d'un retard dans 1f élution, soit dt une diminue tion de la coloration donnée par 1! acide indol-acétique . En effet, dans le cas de 1! urine pure, la densité optique totale des différentes frac = tions de 1! élution est de 3,265 . Dans lo cas du scatol, elle nt est que de 2,715 à 5I0 TD IL y a donc une différence de 0,550 qui corres= pond au 1/6 de 3,265
Nous avons pensé que 1! atténuation de la réaction colorée était
due au scatol et pour Le contrôler, nous avons fait une réaction en one ployant des solutions pures de scatol et d? acide indol acétique , La coloration donnée par le mélange de ces deux solutions présente un maxi mun déplacé vers la droite à 540 my et très supérieur à la somme des den sités optiques données séparément par les solutions ‘ pures , IL y au
rait donc une autre cause que le scatol provoquant dans l'urine une atté=
nuation de la réaction colorée ,
A a ne 1 AA À
5° / Essai de lavage avec solvants organiques et de déplacement par la soude .
L'élution par 1! æide chlorhydrique M/IO nous fournit tout 1° acide . indol-acétique sous un volume relativement éïevé , L? utilisation du mê + me acide plus concentré,nous permettrait sans doute de réduire ce volue , : mais la fragilité de 1! acide indol=acétique en miliou acide , nous interdit un tel procédé . Aussi,nous æ ons pensé pouvoir utiliser une solution alcaline relativement concentrée n° ayant pas cet inconvénient et permettant un déplaccment rapide de 1f acide indol-acétique ,
I1 fallait au préalable nous débarrasser de corps annexes déplacés par la soude ct masquant ia coloration rose donnée par 1 æide indolacétique , Celui=ci n! étant pas déplacé par L! alcool et 1? éther nous les avons employés pour essayer de laver la résine de ces cos annexes
Donc, après avoir fait passer I00 cc d' urine sur I gr, de résine,nous
avons lavé la colonne avec I00 cc dî alcool et IO0 ce d? éther . L' élue .
tion a été faite par la soude M/I0,qui a déplacé en IO cc tout ce qui é» tait fixé sur la colonne +
La réaction colorée s malheureusement donné une coloration brune, dont le spectre de la figure 27, ne permet pas de reconnaître la présence de 1! acide indol-acétique
Nous nous contenterons donc de procéder à 1? élution par 1? acide
chlorhydrique M/TO et de la recueillir en fractions séparées de IO cc .
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