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neutre par 100 centimètres cubes, puis 0,15 °/, de glucose; on distribue dans des tubes stériles et on stérilise.
Après douze heures à + 37°, le colibacille détermine le virage du rouge au jaune avec production d’une fluorescence verte. Otto HeLrer (') utilise des tubes de gélatine auxquels on ajoute trois à quatre gouttes de solution rouge neutre stérile. Puis, après ensemencement, les tubes sont mis à + 37°. Suivant les auteurs, la réaction ne serait caractéristique qu'après sept heures d’étuve, et, pour réussir, il faut que le colorant soit ajouté peu de temps avant l’ensemencement.
W.-S. Savage (), 1901, conseille un bouillon glucosé dont voici la formule :
Dans 500 centimètres cubes d’eau on fait cuire 125 grammes de viande de bœuf; après cuisson, refroidissement et filtration, on ajoute :
PeDIOue DEEREENR EU ne Ni. 0. ee 108 Sel RE EN NL 2e ab ee l'O) (CI SES M NE nn
On ramène à 5oo centimètres cubes. On fait bouillir à nouveau ; après refroidissement on décante, puis on ajoute 5 centimètres cubes de la solution suivante :
Ronde neutre or rs Le 5 grammes A due ue 00 vi
On porte à lautoclave à + 115° durant trente minutes. Le bouillon a une coloration rubis. À + 37° en vingt-
(x) Otto Hercern (Berne), Die Rothbergersche Neutralrotreaktion auf Gelatine bei 37° (Centralbl.f. Bakter, I., Origin.,t. XXXVIUL, 25 janvier 1905, P: 117-122).
(2) W.-S. Savace, British med. Journ., 17 août 1901, p. 400.
LC TOUENRES
quatre ‘heures, la présence du colibacille développe une belle fluorescence verte. | | RU
A. Braux ('), 1906, utilise aussi la formule Savage. Il prend deux tubes qu’il ensemence :
Le premier avec. . . . . . 1 centimètre cube d’eau Le deuxième avec . . . . . 10 centimètres cubes d’eau
Si la coloration n’a pas viré en quarante-huit heures, on peut affirmer que l’eau ne renferme pas de colibacillé en quantité appréciable.
Pour l’auteur, la réaction est constante, rapide, spécifique et très sensible.
Par contre, Sicre (*) et VinGENT (*), 1909, ont remarqué qu'à + 37° comme à + 46° le bouillon Savace, additionné de glucose, lactose ou dextrose à 1 °/, simple ou phéniqué à 0,79 ee donnait une couleur jaune fluorescente sous lacüon de certains microbes, lesquels agissaient sur le rouge neutre.
Ils ont pu identifier ces germes, ce sont :
Bacillus pyocyaneus (GEssarD).
Bacille de GARTNER.
— paratyphique B.
Bacillus fluorescens putridus (FLusacr).
D’autre part, ces auteurs ont constaté qu’un grand nombre d'échantillons de colibacille ne donnent pas nettement la teinte jaune fluorescente caractéristique. Ils en concluent que le virage du rouge neutre n’est pas un indice rigoureux de la présence de ce microbe.
(1) A. Braux, Le Rouge neutre et le diagnostic rapide de la souillure des eaux de boisson par le colibacille (Bull. Inst. Pasteur, juillet 1906, p. 561).
(2) Sicre, Au sujet du Rouge neutre indice du colibacille. (CG. R. Soc. Biologie, t. LXXI, janvier 1909, p. 152).
(3) H. Vincexr, {bid., p. 158.
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VincenT, de son côté, a constaté qu’un certain nombre de colibacilles décolorent incomplètement le bouillon de SAVAGE et que, d’autre part, certaines bactéries des eaux déterminent le virage de ce même bouillon.
William Rovac-Srokes (!), 1904, donne pour caractéristique du groupe colibacille les trois réactions suivantes
1° Fermentation du lactose ;
2° Production de 30 à 50 °/, de gaz, dont un tiers de CO? pour deux tiers d'hydrogène ;
3° Virage du rouge neutre pour obtenir une coloration rouge jaune également nette si l’on remplace le lactose par le dextrose.
La réaction serait surtout sensible en utilisant 0,10 de rouge neutre par litre, et de plus elle serait caractéristique.
Enfin, pour terminer, nous signalerons les études de F.-L. Sizva (*?) 1912, qui utilise le milieu de Mac Conkey pour la recherche du colibacille dans les eaux. Il se com-
pose de :
Taurocholate de soude (commercial). . . . . . 08" 5 RD Niels om. sur un 2e RSR Re Te ea te homer 100 9
On chauffe à + 100° à l’autoclave une ou deux heures, on filtre chaud et on laisse reposer à la température ordinairé du laboratoire durant vingt-quatre ou quarante-huit heures.
. (1) William Royar Sroxes, À simple test for the routine detection of the colon bacillus in drinking water (Journ. of inf. Dis., mars 1904, p. 341-347).
(2) F.-L. Siva, Le milieu de Mac Conkey et la recherche du colibacille des eaux (Arch. do. Inst. bact. Camara Pestana, t. U, fasc. 3, janvier 1912,
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On filtre à nouveau et on ajoute :
L'actosé.: 57 LME RER Solution de rouge: neutre . . . . . . . . . . . Oo 2:
On distribue en tubes stériles et on stérilise par chauffage à + 100° trois Jours consécutifs.
Le colibacille donne une fluorescence et production de gaz.
Le procédé de F.-C. Harrisson et J. LEecx (‘), 1909, se différencie du précédent par la présence de l’esculine additionnée d’un sel de fer. L’esculétine fermente sous l’action du colibacille en donnant un sucre (C° H"* 0°) et l’esculétine qui se combine au sel de fer et donne une teinte brun noirâtre.
La composition du milieu est la suivante :
Peptoné: Wire eee Me EN EN PR Res Taurocholate: de soude... . :n, « 5 »
HscuHReR RE CARTE DER 1:05 Citraterde. fer Er RER Re o op Hansen He MS PER RER 100 ».
En ajoutant 1,5 °,, d’agar à cette formule, on obtient l’esculine agar. Sous l'influence du colibacille ou du bacillus lactis aerogenes, le bouillon noircit, et, si ces espèces sont cultivées sur la gélose, les colonies sont noires. La température convenable pour cultiver est entre + 37°5 et 5/40,
(1) Harrisson et J. Lecx, Aesculin bile salt media for water analysis (Cen. tralbl. f. Bakter. IT, t. XXII, 1909, p. 547-5571).
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