PROCÉDÉ DE POUCHET ET BONJEAN

Ces auteurs en 1889 ont établi une méthode mixte qu'ils appliquent systématiquement aux analyses d’eaux de la France. Ils ensemencent 100 centimètres cubes d’eau dans 100 centimètres cubes de bouillon ; le mélange est phéniqué au millième et mis à l’étuve à + 42°. Après quarante-huit heures, on fait des repiquages sur plaques (Nous avons déjà décrit ce procédé à une page précédente).

20 PROCÉDÉ MIXTE (BILE ET AGGLUTINATION) Recherche spéciale des bacilles typhiques et paratyphiques.

100 centimètres cubes d’eau à analyser sont additionnés de bile de bœuf stérile ou de taurocholate de soude à raison de 5°, (!).

On ajoute au mélange 20 centimètres cubes de solution peptonée à 10°}, glucosée à 10°/,. On met à l’étuve à + 37°. Après dix-huit à vingt-quatre heures, on agite la culture et

(1) Si on utilise 150 centimètres cubes, on prend évidemment des quantités correspondantes.

on centrifuge légèrement. On décante, puis on filtre sur papier stérile en mettant un papier double. Au filtrat on ajoute (!) des sérums agglutinants pour typhiques, para A et B; après une heure de contact à + 37°, on centrifuge. Le dépôt blanc est ensuite traité comme dans la méthode de CHanTEMESse, avec isolement sur plaques de gélose lactosée tournesolée et phéniquée.

(1) Il est nécessaire d’ajouter une quantité de sérum beaucoup plus grande que ne demanderait l’agglutination avec des bacilles provenant de collection, comme en effet différents auteurs prétendent avoir isolé d'eaux contaminées des bacilles typhiques peu agglutinables. Ce fait n’a d’ailleurs rien de surprenant, puisque la diminution de l'agglutinabilité des B. Eberth et paratyphiques est fréquente chez les formes de ces bactéries isolées par hémoculture.