III. — Activité protéolytique
On utilise successivement la fibrine sèche, la caséine, le gluten sec.
a) Fibrine sèche
On met en présence :
Fibrine sèche ... 5 grammes
Extrait . 0 gr. 10
Eau distillée ... 80 grammes.
On met à digérer six heures à 45° : on filtre : on prélève 10e3 pour faire le dosage de l’extrait sec et on examine la déviation polarimètrique. Les solutions sont difficiles à examiner, car elles sont fluorescentes : on doit les clarifier à la pâte à papier.
Le tube du polarimètre a 2 décimètres. Connaissant la déviation P, la quantité d’extrait dissoute dans le volume V, il suffira donc, pour connaître approximativement ad, d’appliquer la formule :
La valeur de ad ainsi obtenue sera très approximative, en premier lieu, par suite de la difficulté de la lecture, car les solutions filtrées sont presque toutes fluorescentes (on peut évaluer pour ad, l’erreur de lecture, à 1/30 environ) : en second lieu, il n’est pas démontré que l’extrait soit uniquement formé d’albumoses et de peptones : il peut y avoir en dissolution du ferment, formation d’une petite quantité de glucose par action de l’amylase sur les matières amylacées ou
autres de l’extrait. Toutefois, il faut reconnaître que ceci n’a qu’une importance relative, étant donné qu’il est surtout question ici d’expériences comparatives.
On peut résumer les différentes lectures dans le tableau suivant :
Lectures Polarimètriques
Poids d’extrait sec dans 10 c3 de liqueur.
Calcul pour ad
Pancréas .
0 gr. 46
Foie .
Testicule .
impossible à lire : fluorescent
Rein .
id.
Thyroïde .
Estomac .
Placenta .
Rate .
Rein .
Muscle .
Sang .
Hypophyse . . . .
impossible à lire : trop fluorescent
Cerveau .
Bile .
impossible à lire : trop fluorescent
Mamelle .
id.
Intestin .
Fibrome utérin. .
Poumon .
Thymus .
Cancer .
On voit donc que, seul, l’extrait pancréatique donne une déviation polarimètrique accentuée, ainsi qu’un extrait de 0 gr. 46. La valeur de a cl calculée semblerait démontrer que la peptonification a été totale. De tous les autres tissus, c’est le tissu cancéreux qui donne l’extrait sec le plus faible.
b) Caséine
En répétant avec la caséine les mêmes opérations qu'avec la fibrine, on constate que les déviations sont légèrement plus accentuées et les poids d’extraits secs supérieurs.
Lecture
polarimétrique
Poids d’extrait sec dans 10 de liqueur
Calcul pour a d
Pancréas .
— 2oS
Estomac .
Testicule .
Intestin .
Ovaire .
Placenta .
Thyroïde .
Foie .
Sang .
Hypophyse .
Rate .
Muscle .
Poumon .
Rein .
Mamelle .
Cerveau .
Bile .
Thymus .
Fibrome utérin .
Cancer du sein .
Remarques
L’extrait gastrique paraît agir plus activement sur la caséine que sur la fibrine, tandis que l’extrait hépatique semble avoir plus d’affinité pour la fibrine que pour la caséine, avec laquelle il donne environ moitié moins d’extrait sec. Quant à l’extrait de cancer, on peut voir, par le tableau précédent, qu’il donne, en présence de la caséine, une certaine déviation et un poids d’extrait relativement plus appréciable qu’en présence de la fibrine : néanmoins, il donne encore le plus faible poids d’extrait sec.
c) Gluten sec
Les examens polarimètriques avec le gluten sont rendus difficiles par suite de l’impossibilité dans laquelle on se trouve d’obtenir, dans certains cas, des solutions limpides, même après agitation avec la pâte à papier.
Lecture
polarimétrique
Poids d’extrait sec dans 10 ce de solution
Valeur calculé de ad
Pancréas .
Testicule .
Foie .
Placenta .
Intestin .
Estomac .
Rein .
Thyroïde .
Hypophyse .
Mamelle .
Rate .
Poumon .
impossib.à filtrer
Bile .
Sang. .
Cerveau .
Ovaire .
Fibrome utérin .
impossib.à filtrer
Muscle .
id.
Thymus .
id.
Cancer .
id.
L’extrait pancréatique présente moins d’affinités pour le gluten sec que pour la caséine et la fibrine. Le tissu cancéreux offre toujours la quantité d’extrait sec la plus faible.
Nota : [L’extrait sec est l’extrait à 100°, obtenu par évaporation de la liqueur à l’étuve réglée, pendant 12 heures.]
cl) Essais protéolytiques en présence de H 2 Cl
J’ai opéré successivement avec la fibrine humide, le blanc d’œuf frais et le blanc d’œuf cuit.
a) Fibrine fraîche
Fibrine fraîche essorée de porc. 10 grammes
Eau distillée . 60 gr.
H2 Cl officinal . 0 gr. 60
Lxtrait . 0 gr. 20
On maintient 6 heures à l’étuve à 45° : on filtre et on additionne d’acide azotique, pour voir si h peptonification est complète. On constate, au bout de ce laps de temps, qu’il existe, dans tous les tubes sans distinction, un trouble abondant indiquant que, dans aucun d’eux, on n’est entièrement arrivé à la phase peptone.
b) Blanc d'œuf frais
Albumine d’œuf frais cru. . 25 grammes
Eau distillée . 60 gr.
fi2 Cl officinal . 0 gr. 60
Extrait . 0 gr. 60
Les résultats sont identiques à ceux obtenus avec la fibrine fraîche. L’extrait de cancer donne un précipité aussi abondant que les autres extraits.
c) Blanc d'œuf cuit
Blanc d’œuf cuit . 10 grammes
H2 Cl officinal . X gouttes
Eau distillée . 100 gr.
Extrait . 0 gr. 20
On maintient à l’étuve à 50° pendant une heure : on filtre 10 cent, cubes qui, par addition d’acide azotique, donnent, avec tous les extraits indistinctement, un louche très léger.
