CHAPITRE III
Etude des sérums normaux
Pour le but que nous nous proposions, il importait de faire 1” «étalonnage » de la méthode électrophorétique. Nous l'avons réalisé à partir de sérums d'individus sains, analysés en assez grand nombre pour pouvoir appliquer à l'ensemble des résultats la méthode de statistique graphique qu'autorise la construction préalable du « diagramme des fréquences groupées ».
Nous rappellerons brièvement en quoi consiste un diagramme des fréquences dont l’application aux données biologiques a fait l’objet d’une mise au point à laquelle nous renvoyons (17). Tout résultat biologique portant sur une « population » assez importante est soumis à de larges variaüons. Or, 1l est intéressant de connaître non pas les valeurs extrêmes qui sont exceptionnelles, ni la moyenne des résultats, mais la fréquence avec laquelle se retrouve une valeur déterminée de la variable.
Sur un graphique à coordonnées rectangulaires, où porte en ordonnées les valeurs Y de la variable et en abscisses le pourcentage X des déterminations avant donné une valeur inférieure ou égale à une valeur Y de la variable (fréquences groupées).
Nous avons utilisé la méthode statistique pour l'étude d’une série de sérums dits « normaux » fournis par des individus chniquement sains, et nous avons établi un diagramme des fréquences :
a) De la mobilité relative de chacune des fractions &, wo et 6-globulines en fonction de l’espace +; — À = 100 (; — À représente la distance entre les pieds des verticales des courbes de Gauss correspondant aux pics de la -globuline et de l'albumine).
b) Des proportions de chacune des fractions : albumine, a, 2 @ et y-globulines.
A titre d'exemple, nous donnons la représentation graphique du diagramme des fréquences portant sur les pro: portions des albumines (tampon véronal-acétate de pH = 8,6) (figure 13).
DIAGRAMME des FRÉQUENCES
moyenne interquartile
fréquence 50% : 502 Ecart-type: t68 Cœæfficient de varietion: 135;
5% 25% 50% 75% 95% FiG. 13. — Diagramme des fréquences de la proportion des albumines. Electrophorèse en tampon véronal-acétate de pH = 8,6. — En abscisses : pourcentage de fréquence. — En ordonnées : va-
leurs des proportions.
Des constructions identiques à celles de la figure 13, faites pour chacune des données, permettent de fixer la moyenne, l’écart-type et le coefficient de variation, tels qu'ils figurent au tableau IV ci-dessous :
Ainsi se trouvent nettement situés — quant à leur précision — les résultats que l’on est en droit d'attendre de ia
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méthode d’électrophorèse sur papier dans les conditions opératoires décrites où interviennent :
a) Le type de l'appareil (cuves, photomètre).
b) Le colorant employé.
c) Les conditions opératoires proprement dites : nature du tampon, pH, température, durée de l’électrophorèse.
d) L'interprétation des diagrammes.
Il convient, en matière de conclusion, d'insister sur le fait que ces résultats ne sont pas comparables avec ceux obtenus avec un autre type d’appareillage dans des condiions opératoires différentes.
En particulier, ce serait faire une grave erreur que de vouloir mettre en parallèle les résultats d’une électrophorèse sur papier, avec coloration des protéines par teinture au noir amide 10 B, avec ceux fournis par l’électrophorèse libre selon Tiselius, avec lecture réfractométrique des gradients de concentration. Il n'est pas non plus exclu que des différences systématiques se produisent en électrophorèse de zone sur papier, en relation avec l’appareillage ou avec le mode de teinture. Ces restrictions faites, nos conclusions finales resteront valables puisque notre principe de travail a consisté essentiellement en une comparaison, toutes les conditions des mesures restant identiques.
