‹ Etude critique de l'Electrophorèse de zone sur papier: Application à l’analyse des protéines extraites des tissus cancéreuxChapitre 37 sur 53 · DE MAC · texte numérisé non relu

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conduites en tampon aux phosphates de pH = 7,15 que

lorsqu'elles sont effectuées en tampon véronal-acétate de pPHi=

N. B. — Nous avons pensé pouvoir effectuer l’électrophorèse directe du broyat tissulaire déposé sur la’ ligne de départ de la bande de papier-filtre sans avoir recours à une extraction préalable par le mélange-tampon.

C’est l’objet de nos expériences n°5 10, 11, 14, 15, 20, 43 et 50.

Ces expériences ont porté :

a) sur des organes animaux : foie, rein et muscle de lapin ;

b) sur des tissus humains : sein (tissu sain) et vulve (tissu cancéreux). +

Elles ont consisté à faire migrer parallèlement dans la même cuve d’électrophorèse en tampon phosphates à pH — 7,15 :

a) d’une part, un broyat obtenu par simple trituration au mortier en présence de sable sans addition de tampon. La puipe obtenue est déposée sur la piste de départ à l’aide d’une tige de verre effilée ;

b) d’autre part, un broyat du même organe prélevé dans les mêmes conditions et dont les protéines ont été extraites par ta méthode décrite ci-dessus.

L'électrophorèse directe du broyat tissulaire montre, apres coloration de la bande de papier, des taches séparées par de nombreuses traînées qui ne modifient pas l'allure générale du diagramme, mais rendent alléatoire son évalua- Uon quantitative. L'électrophorèse du liquide d'extraction au contraire nous permet de retrouver les mêmes fractions bien séparées et sans aucune « traînée ».

L'intérêt de mettre les protéines en solution avant électrophorèse est donc évident. Nous n'avons pas poussé davantage cette tentative.

En résumé : le principe de travail adopté est le suivant :

1) Extraction des protéines par broyage au mortier en présence de sable purifié et de tampon aux phosphates de DÉRESNT ES:

2) Electrophorèse sur papier de 14 heures au sem de ce même tampon.

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