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La topographie des lésions est donc. ion différente de celle

qu’on observe dans d’autres névraxites à virus (rage, encéphalite

léthargique) et il est intéressant de noter la répartition du processus inflammatoire autour de la cavité épendymaire qui s’observe sur toute la longueur de l’axe cérébro-spinal.

Microscopiquement, les lésions intéressent tous les éléments. du névraxe : méninges, tissu interstitiel, vaisseaux, aussi bien que les neurones.

.Il existe constamment une méningite qui se traduit par une

inflammation de la pie-mère envahie par des lymphocytes et polynucléaires; ces altérations se retrouvent le long des cordons latéraux antérieur et postérieur qui traversent la substance blanche. Des lésions vasculaires et péri-vasculaires sont constatées tout le long du névraxe : hémorragies capillaires disséminées surtout dans le cerveau et les cornes antérieures de la moelle; les vaisseaux sont congestionnés et entourés d’un manchon de poly et mononucléaires, au sein d’une zone lædémateuse.

On constate dans la microglie, des lésions diffuses ou en foyer.

signes de dégénérescence (vacuolisation cytoplasmique, chromatolyse, fragmentation des corps de Nissl); puis des leucocytes, sortis des vaisseaux par diapédèse, entourent les neurones, y pénétrent, englobent leurs débris et se substituent finalement en amas à la cellule nerveuse détruite : c’est là le processus de neuronophagie, constant dans la poliomyélite.

Ce processus de neuronolyse s’étend également aux ganglions spinaux, au ganglion de Gasser, aux nerfs périphériques, et même pourrait se retrouver au niveau des plexus nerveux intestinaux,

intacts; de même, le lobe de l’insula, la corne d’Ammon sont épar-

Enfin, les neurones sont altérés profondément, on y voit des .

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des centres sympathiques de la médullo-surrénale, des relais sympathiques des ganglions semi-lunaires.

Chez le singe, guéri du processus aigu, on constate qu ’un tissu cicatriciel a pris la place des neurones détruits, les polynucléaires ont disparu, laissant place à des lymphocytes:

Histologie chez la souris :

Les lésions observées dans cette espèce ressemblent étroitement à celles que nous venons de décrire chez l’homme et le singe. On a pu objecter que le tissu nerveux de la souris est si sommairement différencié qu’il ne peut être de grande ressource pour étudier la poliomyélite; il faut en effet une technique perfectionnée pour distinguer le détail des transformations; il est vrai que beaucoup de cellules ganglionnaïires de cet animal ont si peu de cytoplasme que les modifications précoces des corps de Nissl ne sont pas nettement reconnaissables; cependant la nécrose cellulaire, la neuroncphagie, l’infiltration périvasculaire et d’autres altérations sont reconnues nettement si le tissu est soigneusement fixé et coloré.

Dans la méthode très précise employée par Foster et Ehrich au Children’s hospital de Philadelphie (36), chaque souris est disséquée dans une cellule opératoire permettant la préparation de l’animal et la fixation immédiate des tissus à la température du corps. La dissection de l’animal, anesthésié à l’éther est faite avec : le plus grand soin en pratiquant délicatement l’ablation en bloc de tout l’axe cérébro-spinal, qu’on divise après fixation en portions : chiasma optique, thalamus, hypothalamus, bulbe, renflement cervical, zone dorsale moyenne, zone dorsale basse, renflement lombaire, zone lombaire basse. ;

On complète alors la fixation, on pratique les inclusions dans la paraffine, puis les coupes. Les colorants les plus variés sont em-. ployés suivant qu’on désire mettre en évidence les éléments du sang, les corps de Nissl, les fibres et terminaisons nerveuses, la forme générale des cellules, ou la gaine de myéline.

Dans ces conditions, on a pu noter la succession des lésions qui semblent débuter par la dégénérescence vacuolaire et granuleuse - des cellules avec nécrose de coagulation. La chromatolyse est constante. Le noyau des neufones est altéré, le nucléole est fragmenté et la chromatine réduite à une poussière de granulations basophiles; fréquemment la membrane nucléaire disparaît et on ne voit plus au centre de la cellule qua quelques traces de chromatine. Puis on assiste à la migration consécutive des polynucléaires et des lymphocytes qui se répandent dans la substance grise et envahissent les cellules nécrosées. Des lésions vasculaires (gonflement et prolifération de l’endothelium) avec infiltration péri-vasculaire

ont été trouvées chez des animaux morts 3 jours après l’inoculation, la prolifération gliale débute au bout de 4 jours, les lésions sont au complet én une semaine.

Toutes ces altérations sont au maximum dans les cornes anté- | rieures de la moelle, mais elles s’observent aussi dans l’hypotha-

lamus et, à un moindre degré, dans le cerveau. Le cortex et le cervelet sont rarement lésés.et, dans ce cas, très légèrement.

En utilisant cette méthode très précise, les auteurs concluent à une certaine relation entre les lésions histologiques et les conditions cliniques : les cas paralytiques et mortels ont été observés seulement chez les animaux présentant des lésions histologiques

sévères. Ces lésions peuvent d’ailleurs être constatées aussi bien chez des animaux qui tombent malaces 3 jours ou 3 semaines après l’inoculation, donc quelle que soit l’incubation, ce qui signifierait que c’est seulement quand le virus s’est multiplié et à atteint une concentration suffisante que la paralysie se développe.

Les animaux sacrifiés sans paralysie ont présenté peu ou pas de lésions à l’examen au néyraxe : il n’existe jamais de nécrose cellulaire ni d'infiltration leucocytaire.

Il semblerait même que l’on puisse trouver une concordance

entre la localisation des lésions histologiques el le niveau des paralysies : altérations de la moelle lombaire en cas de paralysie des pattes postérieures et lésions du bulbe quand les pattes-antérieures sont atteintes. Ces cas très schématiques sont rares, en réalité.

: On a pu faire les mêmes observations en ce qui concerne l’histologie du rat du coton : les lésions sont celles d’une poliomyéloencéphalite; rare au niveau du cortex, plus nombreux dans la région de l’hippocampe, le nombre des foyers s’accroit à partir des corps striés jusqu’à l’hypothalamus et le bulbe; la présence de lésions à un ou plusieurs niveaux de la moelle est presque constante.

La nécrose des cellules nerveuses avec infiltration leucocytaire est surtout accentuée dans les cornes antérieures, mais on constale moins souvent que chez l’homme ou le singe, une neuronophagie

typique et pas avant le huitième jour de la maladie. Cependant, on

- peut remarquer la disparition complète à certains niveaux, de tous les neurones d’une des cornes antérieures alors que l’autre apparaît indemne. Il existe une prolifération gliale diffuse. Enfin, dernière remarque, la quantité de manchons leucocytaires péri-vasculaire est moindre chez le sigmoden que chez l’homme, le singe ou la souris.

On retrouve donc “chez la souris et le sigmocon tous les tynes de lésions décrits chez l’homme et le singe. En résumé : réaction méningée, présence d’hémorragies dans le parenchyme, .congestion

Le PO LR

vasculaire avec lésions péri-vasculaires, lésions interstitielles diffuses ou en foyer, destruction des cellules nerveuses avec neuronophagie. é F -

Cependant ce tableau anatomo-pathologique est en général de moindre intensité et il est rare que toutes ces lésions soient retrouvées au complet dans le névraxe d’un même animal.

De plus, ces altérations ne sont pas généralisées à tout l’axe cérébro-spinal mais localisées à un ou plusieurs niveaux, qu’une partie du cerveau soit seule °atteinte alors que la moelle est indemne, ou que certaines zones médullaires soient seules altérées et que le reste du névraxe soit sain histologiquement.

Ceci s’oppose nettement à ce qui s’observe chez le singe et l’homme où, bien que les lésions prédominent en certains points, aucune région n'échappe complètement à l'atteinte pathologique.

On a tenté d'étudier le mécanisme de destruction des neurones par le virus; la théorie ancienne qui attribuait cette neuronolyse à un trouble de circulation n’est plus en faveur. Au contraire (38), il semble plus vraisemblable que le virus se répande dans les neu-. rones et que les lésions gliales soient secondaires à l’atteinte des cellules nerveuses (39). I1 semble donc probable que le virus endommage le neurone directement en troublant quelque fonction cellulaire vitale. 236

On a pu étudier les phénomènes d’oxydo-réäuction dans les cellules de névraxe de souris inoculées avec la souche Lansing (40) : ils révèlent un trouble profond de la vie cellulaire avec un premier Stade où la lésion est encore réversible et la cellule capable de reprendre des échanges normaux. 2e

Ceci s'accorde d’ailleurs avec les données de l’histologie, la présence de virus dans un neurone ne signifie pas forcément qu’il soit détruit et qu’il subisse une nécrose cellulaire (41).

L’inoculation de virus poliomyélitique dans la couche optique du singe provoque des lésions histologiques insignifiantes en comparaison de. celles qui sont produites par une inoculation dans la zone motrice (42). Suivant cette hypothèse les neurones des cornes antérieures de la moelle seraient donc hautement sensibles av virus de la poliomyélite,.

On peut donc supposer que celui-ci puisse interférer avec certaines activités métaboliques spécifiques de la cellule nerveuse et que l’importance relative de l’activité en cause pour un neurone particulier pu'sse déterminer sa susceptibilité ou sa résistance au Virus.

Dans cet crdre de faits, on a également émis l’hypothèse (73) selon laquelle le virus, qui atteint fréquemment le système lymphatique et a pu être mis en évidence au niveau des amygdales ou de ganglions (81) provoquerait avant tout une infection de ce

système; on observerait donc des lésions histologiques des plaques

de Peyer, des follicules clos intestinaux, et des ganglions mésenté-

L riques; la porte d’entrée du virus serait les lymphatiques intesti- naux, le névraxe ne serait donc atteint que secondairement et, en quelque sorte, comme complication,

ue CHAPITRE I

Entretien de la Souche au Laboratoire

Evolution de la Souche Lansing par passages successifs

et variations du pouvoir pathogène

On avait déjà observé, chez le singe, certaines variations du pouvoir pathogène d’une souche de poliomyélite.

Les premiers expérimentateurs ne parvinrent à transmettre .

l'infection en série qu'après plusieurs tentatives infructueuses qu'ils attribuaient soit à la trop faible virulence du matériel utilisé, soit à la voie &’inoculation choisie, soit à la technique employée.

Au cours de nombreux passages en série de singe à singe, on a

. pu remarquer que, par périodes, le pouvoir pathogène d’émulsions

de névraxe, préparées dans des conditions identiques, faiblissait, et qu’il fallait alors recommencer des séries en partant d’un nouveau matériel d’inoculation.

Nous avons vu les nombreuses tentatives d'adaptation du virus :

au rongeur; dès le début de l’entretien de la souche Lansing sur

sigmodon et souris, Armstrong remarque la variabilité de la pé-

riode d’incubation (de 3 à 105 jours) et l’absence fréquente de paralysies, la mort survenant sans être précédée d'une maladie apparente. Pourtant il insiste sur l’adaptation progressive du virus au rongeur, par passages successifs, qui se traduit par une stabilisation de la période d’incubation et l’accroissement du nombre d'animaux paralysés.

L’étude de la souche Lansing a été poursuivie en France par C. Levaditi, Stefanopoulo, P. Lépine et J. Vieuchange, à partir d'échantillons de moelle et de cerveau de rats et de souris, prove-

-__ nant du laboratoire d’Armstrong, et conservés en glycérine,

CEA

L'entretien de cette souche sur souris, par inoculation intracérébrale conduit aux remarques suivantes (28), (31)

Pour C. Levaditi il semble que le pouvoir pathogène diminue aux cours des passages en série, ce qui se traduit par un allongement de la durée d’incubation et une augmentation de fréquence des survies’ De cette irrégularité d'évolution de la maladie chez les animaux d'expérience, Stefanopoulo conclut à la nécessité d’en utiliser un grand nombre pour avoir des résultats valables (31).

Nous avons pu étudier la souche Lansing (1) dans le laboratoire du Docteur Vieuchange ct en collaboration avec lui, dans le service du Docteur Lépine à l’Institut Pasteur (43).

Cette souche a été entretenue sur souris et sigmodon par inoculation intra-cérébrale à l’animal neuf, de névraxe virulent, soit frais, soit. conservé en glycérine à la glacière depuis un temps très variable. .

Neus avons utilisé pour les inoculations une émulsion virulente faite avec des fragments prélevés à divers étages du névraxe, d’une ou de plusieurs souris ou rats; Ces animaux étaient morts ou sacrifiés laprès avoir présenté soit des paralysies, soit d’autres symptômes que nous décrirons plus loin. Dans tous les cas, leur névraxe présentait, à l’examen histologique, des lésions de poliomyélite.

Le tissu nerveux broyé était mis en suspension dans l’eau physiologique à la dilution de 1/20. De cette émulsion, on inoculait 3/100 de cm° par voie intra-cérébrale.

Les animaux étaient ensuite observés pendant au moins 100 jours. ;

Nous avons pu faire, dans lensemble, les mêmes remarques que les auteurs précédents (43) : duré: variable de l’incubation, pourcentage d'animaux survivants très différent suivant les passages, inconstance es paralysies, remplacées parfois par des troubles neurologiques variés, existence d’une maladie peu caractéristique. La mort de l’animal peut même survenir sans qu’on n'ait pu noter aucun symptôme pathologique auparavant. Tous ceS Cas sont cependant considérés comme des poliomyélites si les lésions histologiques du névraxe correspondent à la maladie; se diagnostic se trouve encore confirmé si le névraxe de cet animal, qui ne présentait pas de signe clinique de poliomyélite, confère par passage, une paralysie caractéristique. “

Nous allons développer successivement ces différents points; voyons d’abord l’entretisn de la souche sur souris.

La période d’incubation peut durer de 2 à 105 jours; nous avons

: (1) Cette souche fut transmise au D’ Vieuchange, en 1943, par C. Levaiti,

CR tRE de

même pu observer dans un cas; un délai de 140 jours entre l’inocu-

lation et l'apparition de paralysie des pattes postérieures dont la

nature poliomyélitique a été vérifiée histologiquement PR eunR non publiée).

me Les formes cliniques de la maladie conférée sont très perse __ même au Cours d’un même passage.

: Le symptôme le plus caractéristique, mais non le plus fréquent, ést une paralysie; elle siège sur les groupes musculaires les plus variés et revêt les types monoplégique, paraplégique, hémiplégique ou quadriplégique elle affecte assez fréquemment la pau- "pière supérieure, causant un ptosis; elle peut atteindre les muscles

respiratoires. -

Ces paralysies peuvent apparaître isolément sans autre trouble, lanimal continuant à se mouvoir à l’aide des pattes valides, ou bien elles s’accompagnent d’abattement, ou d’excitation, parfois de tremblement.

Ces phénomènes généraux PET d’ailleurs constituer à eux seuls toute la maladie, sans qu'aucune paralysie n’apparaisse jusqu’à la mort; c’est souvent dans ces cas qu’on assiste à des crises convulsives spontanées ou provoquées par un choc, un bruit, une excitation cutanée.

Il existe aussi des formes ataxiques, avec démarche festonnante, incoor@ination des mouvements.

Enfin Ja mort peut survenir sans qu’on n'ait relevé aucun symptôme de maladie : c’est l’histologie et le résultat du passage de ce névraxe qui font la preuve de l'infection.

La proportion d’animaux paralysés, malades ou morts de poliomvélite a été très variable selon les passages sans qu’on n’ait pu chserver nettement ni l’augmentation réguliêre de virulence, signalée par Armstrong, ni l’affaiblissement &u pouvoir pathogène de la souche par passages successifs qu'avait noté C. Levaditi.

En fait, le pourcentage des résultats positifs a été très irrégulier d’un passage à l’autre, alors que le matériel d’inoculation pro venait du même névraxe infecté, à la même dilution.

Pourtant, on obtient des résultats cohérents en faisant par exémple, des titrages de virulence avec Ges dilutions croissantes d’une suspension connue.

Mais il est impossible de prévoir à l’avance le résultat d’un passage. La cause peut en être attribuée, pour une faible part, à la diversité d’origine des souris employées, maïs surtout semble-t-il à Ja très inégal: répartition du v'rus dans le névraxe.

Histologiquement en effet, on est frappé par le fait que certaines zones cérébrales ou médullaires sont très lésées alors que les régions voisines sont indemnes. On peut admettre qu’il en est de même en ce qui concerne la virulence de certaines portions du

D, | ue

névraxe qui, lorsqu'elles sont. inoculées, confèrent la maladie, tan . dis que des régions voisines sont sans pouvoir pathogène. Remarquons à ce sujet, que la constatation de lésions histologiques dans un zone donnée ne signifie par forcément que les passages effectués avec le fragment correspondant seront couronnés de succès, et inversement l’absence de lésions histologiques en un point n’entrainera pas forcément l’échec des passages pratiqués avec cette zone.

A l’appui de cette explication, il faut noter que la quantité de substance nerveuse utilisée pour un passage étant de l’ordre de 0,15 cg. il est très plausible qu’une fraction si minime du névraxe corresponde soit à une zone entièrement indemne, soit à une région hautement virulente.

* Cette irrégularité de répartition du virus dans le névraxe avait déjà été signalée en ce qui concerne le singe (44) et on a attribué la plus grande virulence de certaines régions à une plus grande concentration en virus.

On a comparé (70) les taux de virus contenus dans le cerveau et la moelle de souris inoculées : ceux-ci varient, semble-t-il, avec le temps écoulé depuis l’inoculation. Quand l’animal est paralysé &e 2 à 5 jours après l’inoculation, le cerveau et la moelle contiennent la même quantité de virus. Après 5 jours, on ne retrouve que peu ou pas de virus dans le cerveau alors que la moelle en contient.

Chez le singe inoculé avec la souche Dane le virus a pu être mis en évidence dans la moelle (72) par inoculation à la souris, dès le moment où apparaissaient les lésions histologiques, c’est-à-dire le jour précédant l’apparition des paralysies (qui a été Géterminée dans cette expérience, comme étant invariablement le septième jour). La concentration maxima en virus est trouvée dès le lendemain (c’est-à-dire à l’apparition des paralysies) et pendant les 2 jours qui suivent; puis la quantité de virus cécroît au-dessous du niveau d’infectivité de la souris mais peut encore être décelé, pendant au moins 2 semaines, par inoculation au singe.

Du fait que la concentration maxima en virus s’observe au début de la maladie pour cécroître rapidement, alors que les paralysies sont cliniquement évidentes, les auteurs concluent qu’il n'existe pas de corrélation entre le titre en virus et la sévérité des paralysies.

Pour obtenir des suspensions de virus à concentration en il faudrait conc prélever des échantillons au premier jour des para-. lysies, quel que soit le degré de celles-ci.

Voyons maintenant l'entretien de la souche sur sigmodons.

L'élevage de cette espèce a pu être pratiqué au laboratoire à partir d’un couple provenant d'Amérique. Les animaux ont été inoculés avec la souche entretenue sur souris depuis 5 ans,

La durée . l’incubation s’est révélée beaucoup lie fixe que 1 eS ÈS Soûr la souris : de 4 à 10 jours, en général, exceptionnellement : 108 jours dans un cas.

Nous avons surtout été frappés par l’allure clinique de la MU 40 die du rat du coton : dans un seul cas, on a assisté à une paralysie à. - typique; dans d’autres cas, la mort s’est produite sans aucun signe: x pathologique prémonitoire. Enfin, le plus souvent la maladie se ï manifeste chez cet animal par des troubles neurologiques de tÿpes variés : soit des crises convulsives, avec phases tonique et clonique, qui se répètent et deviennent subintrantes, entraînant la mort; soit des mouvements de pédalage des pattes, l’animal couché sur - le flanc et semblant hypersensible aux bruits, aux excitations cutanées (le pincement d’une patte entraînant un retrait violent); soit . enfin des troubles de l’équilibre qui se traduisent par des symp- tômes variés : l’animal titube, vacille, tombe, se relève et retombe, la chute se produisant toujours du même côté; ou bien, il fait le tour de sa cage, toujours dans le même sens à une vitesse croissante, jusqu’à la chute.

Les souris témoins, inoculées, simultanément avec le même matériel, ont présenté des paralysies, mais dans une assez faible proportion. F

L’examen histologique des névraxes des sigmodons inoculés a révélé des lésions typiques de poliomyélite tant aux différents niveaux de la mcelle que dans le cerveau, avec une note assez particulière sur les coupes de cervelet où on observe une altération des cellules de Purkinje et une réaction névroglique.

La maladie du sigmodon apparaît donc comme un peu dif: rente de celle de. la souris. Le virus, passé sur rat du coton, peut Ba. d’ailleurs cenférer ensuite une poliomyélite à la souris, il s’agit done bien toujours du même virus.

À En conclusion, au cours de l’entretien de la souche Lansing sur sigmodons et souris blanches, on a constaté d’importantes EC variations aussi bien du pouvoir pathogène de la souche que des Fe formes cliniques de la maladie qu’elle provoque. La difficulté de LS __ l'interprétation des résultats rend donc aléatoire l’expérimentation à

: de la poliomyélite sur le rongeur. D