DÉVIATION DU COMPLÉMENT

Nous savons déjà que BORY, SABAREANU et À. SARTORY, ont réalisé une série d'expériences pour déterminer le rôle pathogène des oospora.

Nous avons suivi les mêmes méthodes de travail pour effectuer les mêmes expériences sur notre levure. Voici comment fut conduit notre travail : dans une première série de recherches, nous avons utilisé la technique de BORDET, GENGOU, WASSERMANN, conseillée pour la séro-réaction de la syphilis. L’antigène était constitué par une culture pure et vivante de la levure trouvée dans les expectorations de notre malade. Cette culture était âgée de 36 heures et avait été rendue homogène par de fréquentes agitations. Des tubes témoins nous ont permis de constater que le bouillon maltosé employé pour la culture du végétal ne gênait en rien la réaction.

Le sérum du malade provenait d’une prise de sang faite aseptiquement dans la veine du pli du coude, il avait été machiné par un chauffage à + 56° pendant une demi-heure.

Le complément était du sérum frais de cobaye dilué dans son volume d'eau salée à 8 millièmes.

Le système hémolytique était constitué par des globules rouges de mouton, dilués à 5 % et la sensibilisatrice était du sérum de lapin préparé.

Après avoir versé dans les tubes le sérum du malade, la culture, le complément et le sérum physiologique, nous placions les mélanges à l’étuve à + 38° pendant quatre heures consécutives : ce temps, relativement considérable, était nécessaire pour permettre une bonne fixation, la réaction se faisant toujours plus lentement avec les champignons inférieurs qu'avec les bactéries.

Le système hémolytique (sensibilisatrice et globules rouges) fut ajouté et les tubes furent de nouveau placés à l'étuve pendant une heure.

Par trois fois, nous avons refait nos expériences et par trois fois la réaction de la fixation du complément s'est montrée positive.

DÉTERMINATION. — De tout ce que nous venons de voir, de toutes les expériences que nous avons pu effectuer sur cet organisme, nous croyons être en droit de conclure que notre levure appartient au genre Saccharomyces. En comparant cette levure avec beaucoup d’autres levures isolées avant nous par d’autres auteurs (Saccharomyces anginæ VUILLEMIN, Saccharomyces Le Monnieri, SARTORY et LASSEUR, les levures de CASTELLANT et celles citées dans notre historique, nous croyons être en présence d'une

espèce nouvelle que nous nommerons Saccharomyces

SARTORYT n. sp.

CHAPITRE III Etude d'une Mucorinée nouvelle du genre Lichtheimia Lichtheimia Italiana var. flava.

Continuant nos recherches sur les mycoses pulmonaires, il nous a été donné d'isoler d’expectorations chez une femme malade et suspecte de tuberculose pulmonaire, un organisme mycélien appartenant au grand groupe des Comycètes ou Phycomycètes.

Ce champignon était une Mucorinée.

Aspect général des crachats. — Les crachats sont blancs, avec des parties rouge orangé, presque rouille, mais différents cependant des crachats de pneumoniques. L'expectoration n'exhale aucune odeur fétide. C'est dans les parties sanguinolentes des crachats que nous trouvons le plus souvent le champignon.

Etat clinique de la malade. — Cette femme, âgée de 40 ans, souffre depuis trois ans de toux et d’essoufflement. Est-ce à la suite d’une affection aiguë? On l'ignore. Toujours est-1l que depuis ce temps elle tousse presque continuellement. Jamais elle n'a eu d’hémoptysie ; Jamais son état général n'avait été sérieusement atteint. C'est sans trop de fatigue ni de chômage qu’elle avait pu exercer sa profession de marchande de quatresaisons. Elle était seulement courte d’haleine et devait éviter les efforts et les marches. Il y a seulement trois mois, une modification s’est produite et le docteur

GUÉËRIN, appelé à soigner la malade, me pria de faire l'analyse des crachats, l’auscultation lui ayant fait constater à la base gauche un souffle rude inspiratoire et expiratoire, à tonalité assez basse, à timbre caverneux.

L'examen microscopique, fait un très grand nombre de fois, ne montre pas de baailles acido-résistants, mais des filaments mycéliens très caractéristiques, non cloisonnés, que nous soumettons à l'examen du professeur SARTORY. Celui-ci nous fait savoir qu'il y a lieu de poursuivre nos recherches, d'identifier le parasite qu'il soupçonne être une mucorinée ressemblant au Lichtheimia corymbifera.

Munis de ces renseignements, nous faisons l'étude complète du champignon.

CULTURE. — Nous avons isolé le champignon en pratiquant la méthode des plaques décrite précédemment et en employant comme milieu de culture la gélose maltosée de SABOURAUD.

Le champignon se développe aisément sur les milieux ordinaires, spécialement sur ceux qui sont solides et de réaction acide (gélatine, agar, agar de Sabouraud, carotte, rave, betterave, pain, agar-foin, etc.).

La gélatine se liquéfie au bout du quatorzième jour. Il se développe bien sur pomme de terre, en quarantehuit heures, à la température de + 32°.

Le tube de culture est rempli complètement d'hyghes blancs, fructifiant en gris jaunâtre à la partie supérieure.

Il croît sur les milieux liquides (bouillon, décoction de foin, liquide de Raulin acide et neutre) ; il forme des flocons submergés dans le vase de culture, puis vient se développer à la surface en filaments fructifiés caractéristiques. Le lait est rapidement coagulé et prend une réaction franchement acide : après douze jours, le coagulum tombe au fond du flacon ; au-dessus, est le petit lait sur lequel flotte le mycélium. Dans des conditions de vie strictement anaérobies le champignon ne se développe pas. Dans des cristallisoirs contenant des milieux liquides qu'on ensemence et dans lesquels on superpose une couche d’huile stérilisée d’un centimètre d'épaisseur, la production d'oxygène ne se renouvelle que mal ; le mycélium se développe très pauvrement sans fructifier, mais en conservant une vitalité très remarquable. Tandis que dans les tubes de culture à filaments aériens l'énergie vitale s’épuise avec une très grande rapidité. Il n’en est pas de même des cultures végétatives sous l'huile. Si l’on veut faire des reports des tubes sur agar, sur carotte, au bout de trois ou quatre mois, on échoue complètement, le champignon s’est desséché. Il est mort. La persistance du mycélium sous l’huile est beaucoup plus grande.

Appareils reproducteurs. — Au point de vue des appareils reproducteurs, nous envisageons les sporanges car nous n'avons jamais pu obtenir les zygospores.

Sporanges. — Les sporanges sont portés par un

Planche Il.

LICHTHEIMIA ITALIANA var. Flava

Fig. 1. — Lichtheimia Italiana var. Fig. 2. — Chlamydospores diverses de Flava montrant son mycélium et ses l'Italiana var. Flava. sporanges.

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pédicelle toujours composé ; le plus ordinairement, il supporte deux ou trois sporanges. Le sporange terminal est, presque toujours, à l'extrémité du pédoncule principal qui porte les pédicelles secondaires souvent à un angle de 45°. Parfois cet angle est de 90°, Quand il y a trois sporanges, le pédoncule général sera, par exemple, trois fois aussi long que les pédicelles secondaires égaux entre eux ; les dimensions de ces sporanges sont assez semblables. Mais il peut arriver assez souvent que l’inflorescence fructifère soit plus compliquée et qu'il existe d’autres pédicelles fructifères s’insérant à d’autres hauteurs. Les filaments rampants sur lesquels s’insèrent les pédoncules et les pédicelles sont plus ou moins redressés et présentent des caractères transitionnels entre la partie qui végète horizontalement sur le substratum et. la partie fructifiée. Les stolons portent des touffes de rhizoïdes qui divergent en nombre variable de deux à quatre filaments ondulés, s’effilant à l'extrémité. Ces rhizoïdes apparaissent sur la longueur du stolon qui chemine sur le milieu ou à une extrémité.

Le sporange est toujours arrondi ; sa membrane est très fugace : elle s'insère sur une partie élargie du pédicelle qui est en continuité avec la columelle. Les sporanges subissent certaines variations dans les dimensions: un sporange non ouvert donnera, par exemple, en hauteur, entre 601 et 701, en largeur, 58 à 60. La columelle a 42 à 45 u de large ; le pédicelle a 18 à 204

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d'épaisseur. La forme de la columelle est très variable : parfois, elle est presque hémisphérique, plus fréquemment, elle est conique ; dans certains cas, elle est conique aiguë.

Un autre sporange présentera les dimensions suivantes : largeur 20 L., hauteur (avec renflement pédicellaire) 2147, columelle 1425 de large et 17 de haut. Autre cas : sporange non ouvert L: 18; cela indique à peu près l'amplitude des variations dans les dimensions de l'appareil reproducteur.

Pour la columelle également, voici quelques valeurs relevées pour cet organe : grande columelle 66 1 de large sur 62 de haut (renflement du pied compris), largeur du pédicelle correspondant à 20 4; columelle petite, très étroite et très haute : 11 1: de largeur, 2814 de hauteur ; columelle conique, arrondie au sommet, 174 de largeur, 224 de hauteur ; columelle ovale, presque hémisphérique, 14 4 de largeur, 18 4 de hauteur ; columelle ovalaire, arrondie, avec une partie basilaire, 20 & de largeur et hauteur 144.

Spores. — Les spores sont légèrement ovalaires 3 4 4à 31.6 sur 2 4 80 à 3 L de large ; 4 u 20 de long sur 21285 de large.

Mycélium. — L'épaisseur des filaments stériles est variable : 34, 547 jusqu'à 6u. Il y a parfois des filaments très gros, d'épaisseur variable, ramifiés, présen-

tant un renflement en fuseau très allongé, s’ajustant

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progressivement à l'épaisseur normale du filament, 141, tandis que dans la partie la plus large 1l mesure jusqu’à 47 ou 48u s’effilant et devenant cylindrique avec une largeur de 31 t: ou 324.

Ces variations si notables du mycélium conduisent à mentionner les aspects des cultures sous l'huile.

On voit, sur un mycélium cylindrique, grêle, de 514 de large, des ampoules ovalaires se différencier soit intercalairement sur la longueur du filament ; parfois, à une faible distance de la vésicule terminale se renfle une ampoule intercalaire voisine. Ces ampoules, régulièrement ovalaires, très souvent ne sont pas séparées du filament sur lequel elles se produisent par une cloison. On voit aussi fréquemment une ampoule terminale qui émet un petit bouton à son sommet, formant ainsi une sorte de mucron de l’ampoule. Voici quelques dimensions relevées pour ces vésicules, régulièrement ovoiïdes : 24u25 de long sur 11 45 de large; 17 4 de long sur 144 de large. Parfois ces vésicules s'isolent et font transition aux chlamydospores ; mais, ici, il n’y a pas d'épaississement de la membrane.

Dans une simple décoction de fumier, même sans huile, on obtient un mycélium immergé qui a une allure bourgeonnante assez curieuse. Les bourgeons apparaissent parfois les uns à côté des autres. Les ampoules se multiplient sur les ramifications nombreuses, rapide-

ment répétées de filaments, l'ensemble forme des glomérules entrelacés.

Souvent, on y trouve des vésicules arrondis, terminés par un bec en forme de poire ; la partie ventrue piriforme mesurera 124; le bec 8 à 91; la longueur totale atteignant 204. Parfois, on trouve de telles parties piriformes isolées, avec un col allongé obliquement et une parte ventrue rétrécie à la base, mesurant en tout 284 de long. Enfin, sur des filaments allongés pouvant mesurer 10 à 1114 on voit, à l'extrémité, une ampoule sphérique ou un peu ovalaire se différencier comme si un sporange allait se former, mais la cloison n'apparaît pas. Dimensions, 42 à 43: de large sur 32 à 34 de hauteur, la membrane est légèrement épaissie.

Températures critiques. — Le champignon commence à se développer vers 17 à 18°, mais, à ces températures, le développement est très lent et le mycélium a l'aspect d’une masse blanchâtre dense ; à + 22- 25°, il se développe bien mais moins vite qu'à + 370. Cette température est la température optima. A cette dernière température, sa croissance est très vigoureuse et, entre vingt-quatre heures et trente-huit, 1l envahit tout Le tube de culture. À + 42, le développement est retardé. À + 459, il ne végète plus.

C'est certainement au voisinage des Lichtheimia Corymbiféra ramosa et Italiana que doit se placer le champignon qui vient d'être décrit. Il doit être éloigné

du Rhizomucor parasiticus, ses cultures sont très différentes. Les Rhizomucor se distinguent aisément des Lichtheimia par leurs pédicelles fructifiées mais renflés à la partie supérieure au-dessous du sporange.

Dans l'espèce que nous décrivions, les cultures envahissent rapidement tout le tube de culture, formant un feutrage blanc qui prend une coloration grise à la partie supérieure, le pédicelle est renflé sous le sporange.

Les deux Lichtheimia corymbifera et ramosa sont d'ailleurs très voisins l’un de l’autre, tellement que certains auteurs, comme À FISCHER (1), sont d'avis de supprimer le ramosa. LINDT (2), créateur de cette espèce, avait bien eu conscience de ces ressemblances, mais 1l a constaté, par des études culturales prolongées, que les dimensions des spores se maintenaient avec constance : 2 à 3 dans M. corymbifer, 5 à 6 dans le M. ramosus.

VUILLEMIN a confirmé l'autonomie du Lichtheimia ramosa dans l'étude qu'il a faite de cette espèce, trouvée par lui, dans le mucus nasal des chevaux et isolée en 1905 du jetage d'une jument qui avait des plaies linéaires de la pituitaire, attribuées à des morsures. Cette espèce a été retrouvée dans le jetage d'un autre cheval atteint d’adénite sous-maxillaire simulant

(1) RABENHORST. — Kryptogamenflora, 1892.

(2) LINDT.— Mittheilungen uber einige pathogene Schimmelpilze, Arch. f. exper. Pharmakol., t. XXI, p. 269, 1886.

la morve. On mentionne également le L. corymbifera dans le mucus nasal de deux autres chevaux et un autre cas de L. ramosa dans une bronchite gourmeuse. Selon VUILLEMIN, le L. ramosa est caractérisé par des spores plus grandes, 5 à 6 {. sur 31., et surtout ovalaires ; le rapport des deux dimensions étant 1 1: 75. Dans le L. Corymbifera, la forme est ovalaire, les dimensions sont plus faibles que dans le L. ramosa. L'existence de chlamydospores ou ampoules vésiculeuses est un caractère de L. ltaliana et de notre espèce.

Quant au genre Lichtheimia, il est à rapprocher de la série des Absidiées, groupe dont la conception a été élargie par VUILLEMIN où il range :

1° Probasidia (P. SACCARDOI OUDEMANS) (1) à zygospores armées de fulcres circinés.

2° Lichtheimia à zygospores inconnues, espèces parasites (Lichtheimia corymbiféra, ramosa, Regnieri.

3° Mycocladus à stolons indéfinis à zygospores

sans fulcres (M. VERTICILLATUS).

4 Tieghemella à arcades manifestes comme dans les absidia à zygospores inconnues (T. DUBIA, Orchides, repens).

(1) OUDEMANS et KONING. — Prodrome d'une flore mycologique. Arch. nécrol, 1902, 268-280. — VUILLEMIN. — Importance taximonnique de l'appareil zygosporé des Mucorinées. Bull. Soc. Mycol. de France, 1903.

(2) BERLESE et DE TONI. — Sylloge fungorum de Saccardo VII, 215, 1888. — VUILLEMIN. — Le genre Absidia et la série des Absidiées. Bull. Soc. Mycol. de France, t. XIX, p. 119.

5° Absidia à stolons en arcades à zygospores armées de fulcres circinés. (A. GAPITALA, IEPTATA) Zygospores inconnues à reflexa.

CONCLUSION. — Nous rangeons l'espèce que nous avons décrite précédemment dans le genre Lichtheimia et nous le plaçons à côté du Lichtheimia Italiana décrit en 1922 par PERRIN et CONS- TANTIN. Ii existe cependant, entre les deux espèces, quelques petites différences, à savoir : la couleur des cultures, franchement grise dans le cas de L. Ttaliana, gris tirant sur le jaune dans notre Lichtheimia. Les caractères biologiques sont à peu près les mêmes. Une différence beaucoup plus nette, c’est l'influence de la température. Nous la nommerons Lichtheimia Ttaliana var. flava.

Alors que le Lichtheimia ltaliana se développe très bien encore à + 45°, à + 490, notre variété cesse de végéter à + 45°, Des températures de — 4° ou — 6° ne le tuent pas, pas plus que L. Italiana. Pour ne pas créer une espèce nouvelle, nous appellerons ce nouveau parasite Lichtheimia [taliana variete flava.