C. — Diagnostic de l'aspergillose expérimentale

Avant d'aller plus loin dans cette étude, et pour rendre plus compréhensible l'exposé d'expériences dont nous allons prochainement parler, il nous paraît indispensable d'indiquer ici la technique qui permet d'attribuer d'une façon absolue à l'aspergillus fumigatus la mort des animaux en expérience, sans qu'il soit possible de tenir compte d'une cause d'erreur due à une maladie intercurrente ou à une infection prise dans les cages ou les écuries du laboratoire.

L'examen peut porter sur des sécrétions pendant

(1) Leber, loc. cit.

(1) Deutschmann, Ueber experimentclle Erzeugung sympathischer Ophtalmie [Archiv fur Ophtalm., 1882, t. XXV1Ù, p. 291, et 1883, t. XXIX, p. 261).

DIAGNOSTIC DE l/ASPERGILLOSE EXPÉRIMENTALE. 87

ta vie, ou sur les organes après la mort et l'autopsie de l'animal.

Qu'il s'agisse de sécrétions ou d'organes, il faut d'abord les recueillir aseptiquement avec toutes les précautions usitées en pareil cas, et les ensemencer dans des tubes de liquide de Raulin que l'on porte ensuite à l'étuve à 37 degrés. Les fragments d'organes tombent au fond des tubes. Dès le second ou le troisième jour du séjour à l'étuve, on voit sortir de la partie ensemencée des fragments isolés de mycélium qui s'élèvent et se réunissent en une touffe montant progressivement, par étages successifs, vers la surface du liquide qu'ils mettent trois à dix jours à atteindre. Il s'y forme quelques heures plus tard un tapis velouté blanchâtre qui, vingt heures après, se couvre de spores verdâtres. Celles-ci prennent une couleur noir de fumée, au bout de quelques jours. Si l'aspect vert persistait, il faudrait faire une culture sur gélose au liquide de Raulin, ou plus simplement sur gélose glycérinée, les cultures d'aspergillus fumigatus prenant toujours sur ce milieu leur couleur fumée caractéristique. Si le moindre doute subsistait encore, on pratiquerait l'examen microscopique des spores, des stérigmates et des têtes sporifères, pour voir leur disposition et leurs dimensions. Ce n'est que dans des cas exceptionnels qu'on aura à faire les cultures en gouttes pendantes. On injectera ensuite au pigeon ou au lapin les spores obtenues par culture, et on observera de nouveau tout le cycle de l'aspergillose expérimentale.

88 L'INFECTION ASPERG1LLAIRE EXPÉRIMENTALE.

De plus, l'examen histologique des sécrétions et des organes permet d'y rencontrer, par les colorations et par les coupes, du mycélium ou des spores.

Nous avons toujours employé cette méthode dans toutes nos recherches sur l'homme et sur les animaux.

D. — Passage du mycélium de l'aspergillus fumigatus dans les urines, au cours de l'aspergillose expérimentale.

Nous avons fait une série d'expériences sur l'aspergillose urinaire expérimentale, qui nous ont permis de fixer quelques points de pathologie générale intéressants : nous croyons devoir les rapporter ici :

Ces recherches ont porté sur les urines de lapins de garenne et de lapins domestiques, inoculés dans les veines avec des spores virulentes d'aspergillus fumigatus (1). Ces urines étaient recueillies dans la vessie après la mort, soit qu'on ait sacrifié les animaux au début et dans le cours de l'affection, soit qu'ils aient succombé à l'extension progressive des lésions.

a. Nous avons, cinq, sept, dix et quinze minutes après l'injection des spores, sacrifié ces lapins par section du bulbe et par ingestion d'alcool dans la bouche. Après avoir stérilisé la face antérieure de la vessie à l'aide d'une baguette de verre chauffée au rouge, nous avons puisé le contenu de l'organe avec

(1) Rknon, Passage du mycélium de l'aspergillus fumigatus dans les urines, au cours de l'aspergillose expérimentale (Soc. de biol., 18 avril 1896).

l'aspergillose URINAIRE EXPÉRIMENTALE. 89

des pipettes stérilisées , et nous l'avons réparti dans des tubes de liquide de Raulin. Tous ces tubes, mis à l'étuve à 37 degrés, sont restés stériles. L'urine, recueillie delà même façon, fut centrifugée, et dans le dépôt, coloré à la thionine, nous n'avons point retrouvé de spores du champignon : l'urine, d'ailleurs, n'était point albumineuse. Il était dès lors évident, que dans ce court espace de temps, les spores n'avaient pu traverser le filtre rénal, et qu'elles se comportaient, à ce point de vue, différemment des bactéries dont on a pu constater la présence dans les urines cinq minutes après leur introduction dans la voie sanguine (1).

p. Chez d'autres lapins, sacrifiés de vingt-quatre à quarante-huit heures après l'inoculation, nous avons recueilli dans la vessie l'urine avec les mêmes précautions. Les résultats positifs des cultures sur le liquide de Raulin furent d'autant plus nombreux qu'on s'éloignait davantage du moment de l'injection des spores dans les veines. Les urines, souvent albumineuses, présentaient parfois des hématies dans le dépôt centrifugé, fait observé déjà par Grawitz et Kaufmann : de plus, quand les cultures étaient positives, on y trouvait presque toujours des fragments de mycélium après coloration. Il y avait corrélation entre ces deux ordres de recherches, l'examen direct et les cultures.

y. Après la mort naturelle, en suivant la même

(1) A. Biedl et R. Khacs, Archiv fur experim. Patk. v.nd PharmakoL, Bd XXXVII, Heft 1, p. 105, décembre 1895.

90 L'INFECTION ASPERGILLAIRE EXPÉRIMENTALE.

technique, nous avons généralement obtenu des résultats positifs, tant dans les cultures sur tubes de liquide de Raulin que dans l'examen du dépôt : les urines étaient albumineuses dans tous les cas.

Ces recherches nous ont aussi permis de constater l'intégrité de l'uretère, que nous avons toujours trouvé indemne, et l'existence de lésions vésicales assez fréquentes. Celles-ci, d'apparence ei de formé tuberculeuses, amènent une rétention d'urine avec distension très prononcée de l'organe. Cette cystite nous paraît résulter de l'inoculation des spores par la voie sanguine, et non de leur développement (ou de celui du mycélium) dans l'urine : les spores et le mycélium ont peu de tendance à végéter dans l'urine généralement alcaline, parfois neutre, exceptionnellement acide des lapins : nous n'avons jamais pu obtenir de culture en mettant à l'étuve des pipettes remplies d'urine dont quelques gouttes donnaient des résultats positifs sur liquide de Raulin. D'ailleurs, nous avons sacrifié des lapins sains et normaux, et, après avoir puisé de l'urine dans leur vessie, nous l'avons répartie dans des tubes stériles que nous avons ensemencés avec des spores virulentes d'aspergillus fumigatus : quand l'urine était alcaline, rien ne se développait; quand elle était acide, on ne constatait qu'une légère ébauche de mycélium sans fructification. Les résultats différaient complètement de ceux que nous avons obtenus avec l'urine humaine normale.

Dans toutes ces expériences, les reins ont été cul-