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le liquide filtré un dépôt abondant. Le liquide est resté clair,mais si on agite le tube doucement, te dépôt s'élève du fond et reste en suspension dans le milieu sous la forme d’un fin mycelium retenant dans ses mailles de petits amas jaunâtres. Agité fortement le milieu se - trouble. Si on repique ces cultures en bouillon Martin, en bouillon ordinaire, en bouillon de pomme de terre ou en eau peptonée à 2 % on oblient en 48 heures des cultures de même aspect repiquables en série.

2° Filtrat de l’émulsion bacillaire.— Pendant 15 jours ce filtrat ne paraît pas pousser à 38°; mais après on voit apparaître dans le fond du tube un dépôt pareil à celui décritdans le filtrat de l'eau peptonée : ensemencé daus les mêmes milieux que le précédant, il pousse dans le même temps et sous le même aspect. Pour hâter le développement de la culture on peut immédiatement apres la filtration ensemencer le filtrat dans de l’eau peptonée à 2 % : 48 heures plus tard on obtient une culture identique à celles que nous venons de décrire.

Aspect microscopique des cultures

Il est le même dans les deux filtrats. Le Ziehl à froid lent sans décoloration ultérieure montre un lacis délicat defilaments anastomosés entre eux. Sur ces filaments on voit des grains inégalement distants les uns des autres, fortement colorés. Leur volume varie entre la limite de visibilité et la grosseur d’un grain de millet. De place en place on voit des formes bacillaires courtes ou longues, granuleuses, incurvées ou rectilignes. Les éléments ne sont pas colorés en rose avec le Ziel à

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chaud après décoloration à l'acide nitrique, mais après décoloration par la solution dechlorhydrate d’aniline à 2 % ;ils prennent mal le bleu de méthylène mais bien le violet de gentiane. Les grains sont Gram r'ésistants les formes filamenteuses ne le sont pas.

Ainsi donc le bacille de Koch, outre. sa forme acidorésistante, apparaît dans ces expériences comme présentant des formes non acido-résistantes dont certaines sont assez petites pour traverser les filtres de porcelaine. Ces formes donnent naissance à des tormes mycéliennes, filamenteuses, granulaires non acido-résistantes.

Depuis 1923 nombreux sont ceux qui ont reproduit ces expériences el ont abouti aux mêmes résultats. Tous ont également signalé que les filtrats ne contenaient aucun élément visible et que les cultures qui en provenaient ne redonnaient pas de bacille de Koch classique. Quand nous éludierons la culture des formes filtrantes, nous reviendrons sur ce sujet.

B. — Filtration des cultures obtenues sur milieux non glycérinés

On sait depuis longtemps que le bacille de Koch n'avait pas besoin pour se développer, comme le disait son auteur, de milieux riches en substances Lernaires el quaternaires.

Vaudremer (IV) a montré depuis ses travaux avec Gessard et ceux publiés à la Société de Biologie,en 1921, que si l’on ensemence des bacilles tuberculeux sur un

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milieu {rès pauvre en azote telle l’eau de pomme de terre réalisée selon sa technique on obtient des cultures dont le développement est assez rapide mais qui donnent naissance à des bacilles dont l’acido résistance disparait peu à peu et dont la morphologie se modifie totalement. Il apparait des formes granulaires de tailles très variables, qui sont isolées ou groupéés sur des filaments qui eux-mêmes empruntent des dispositions particulières allant jusqu’à la zooglée. De telles cultures sont repiquables en série. Toutes ces constatations ont été confirmées depuis par nombre d’autres chercheurs, entre autres Bezançon et Hauduroy [5]. Cest partant de ces cultures sur milieux € empiriques » que Vaudremer réalisa en 1922 [VI] pour la première fois la filtration du bacille tuberculeux.

Pour ce faire cet auteur fil passer la culture à travers une bougie Chamberland L3. Dans le liquide filtré mis à l’étuve à 38°, il trouva après 48 heures des éléments ramifiés semblables à ceux contenus dans le liquide avant la filtration. Ces éléments granulaires ne sont pas acido-résistants. Ensemencés sur bouillon de pomme de terre non glycériné ils donnent naissance à des éléments semblables et sont repiquables en série.

Un mois après l’ensemencement on peut constater la présence de formes néo-formées, granulaires el ramifiées, prenant le Gram et non acido-résistantes. Le retour à l’acido-résistance ne peut être obtenu que très difii-

- cilementet {très rarement sur les milieux usuels pour

culture du B-K. Ceux-ci restent ordinairement stériles. Mais la récupération de l’acido-résistance peut être réa-