II. —— MÉTHODES DE DOSAGE UTILISÉES

a) Dosage de l'hémoglobine. — Ce dosage fut effectué avec l’hémomètre de Zeiss, suivant la technique habituelle.

b) Dosage de l'oxygène combiné à l’hémoglobine. — Deux méthodes s’offraient à nous pour cette détermination: celle de van Slyke par extraction par le vide, et celle de Haldane dans sa dernière mise au point datant de 1921. C’est à cette dernière que nous avons eu recours. Elle est en effet, semble-t-il, plus pratique que celle de van Slyke, et donne des résultats aussi satisfaisants ainsi que l’ont montré Bierring et Nielsen. Rappelons brièvement le mode opératoire :

Dans chaque ballon de l’appareil, on mesure 2 cc. d’une solution de carbonate de soude N/10; dans l’un d’eux on mesure sous cette solution 2 cc. de sang prélevé sous huile de paraffine. On adapte convenablement les ballons aux tubes manométriques de l’appareil et on les plonge dans un cristallisoir plein d’eau servant de thermostat. On attend dix minutes que léquilibre de température soit établi. On amène les niveaux d’eau à la graduation 60 environ de l’appareil, et on agite chaque récipient durant cinq minutes. L’oxygène de l’air contenu dans les ballons vient se fixer sur l’hémoglobine non oxygénée. On attend cinq minutes que l’équilibre des températures se soit établi et on effectue alors la lecture après avoir compensé la déperdition de pression, au moyen du tube manométrique. Soit x centième de cc. la déperdition de volume observée: la quantité d'oxygène absorbée pour cent est donnée par l'équation suivante :

TX O. absorbé p. 100 — 0,96 + (t—15) 0,038.

r est le coeflicient de correction des gaz donné par les tables de correction en fonction de la température extérieure et de la pression atmosphérique. Le nombre obtenu correspond donc à la quantité d'oxygène qui a disparu du sang lors du passage de ce dernier dans les tissus, c’est ce que nous appellerons l’oxygène absorbé.

Après cette opération, toute l’hémoglobine du sang est sous forme d’oxyhémoglobine. On mesure alors la quantité totale d'oxygène fixée sur cette hémoglobine; pour cela on opère de la façon suivante : on introduit sur le mélange Sang oxygéné-carbonate de soude un peu de saponine destinée à lyser les globules rouges; dans le petit godet contennu dans chaque ballon, on ajoute 0,25 ec. d’une solution saturée, préparée extemporanément, de ferri-cyanure de K. Quand l'équilibre de température est obtenu, on amène le volume du liquide dans la tige graduée à un niveau un peu inférieur à la graduation zéro. On ferme les robinets, on équilibre exactement les niveaux, et on agite les ballons après les avoir inclinés, réalisant ainsi le mélange du ferri-cyanure et du liquide sous-jaçant. On agite durant quatre à cinq minutes. On attend que l’équilibre de température soit obtenu, et on effectue la lecture dans les mêmes conditions que précédemment. La quantité d'oxygène p. 100 est donnée par la formule :

LE 6 TEX Q. oxygène p. 100 Hoi

Dans cette opération, on a dégagé tout l’oxygène fixé sur l’hémoglobine, qui avait été transformée dans le temps précédent intégralement en oxyhémoglobine.

Le nombre ainsi obtenu s'appelle «capacité totale en Oxygène ». Il représente donc la quantité maxima d’oxygène que pouvait fixer 100 cc. de sang, c’est-à-dire, à peu

de chose prés, la teneur en oxygène de l’hémoglobine du sang artériel.

La différence entre la valeur de la capacité totale de l'oxygène et de celle de l'oxygène absorbé nous donne la quantité d'oxygène qui était contenue dans le sang veineux au moment de son prélèvement. C’est l’oxygène du sang.

En outre, on établit une relation entre l’oxygène contenu dans le sang et la capacité totale en oxygène. Cette valeur s'appelle «saturation oxyhémoglobinée ». Elle s'obtient par le calcul suivant :

oxygène contenu dans le sang capacité totale en oxygène

X 100 — saturation oxyhémoglobinée

Elle représente la quantité d’oxyhémoglobine pour 100 d'hémoglobine totale.

En résumé, par les mesures effectuées sur 2 cc. de sang veineux, avec l’appareil et la technique d’Haldane, on mesure :

1° La quantité d'oxygène absorbée, c’est-à-dire approximativement la quantité d'oxygène qui a disparu dans la respiration tissulaire;

2° L’oxygène contenu dans le sang, c’est-à-dire la quantité d'oxygène qui n’a pas été utilisée dans l’organe irrigué;

3° La capacité totale en oxygène, c’est-à-dire la quantité totale d'oxygène que pouvait fixer l’hémoglobine de 100 cc. de sang;

4° La saturation oxyhémoglobine, c’est-à-dire le rapport existant entre la quantité d’oxygène fixée sur 100 cc. de sang et la quantité totale de ce gaz que pouvait fixer ces 100 cc. de sang.

Nous avons appliqué cette technique sur le sang total, mais aussi sur le plasma sanguin, quand celui-ci contenait de l’hémoglobine en solution.

c) Gaz carbonique. — Nous avons déterminé cette valeur avec les précautions habituelles, au moyen de la méthode et de l’appareil bien connu de Van Slÿke.