ETUDE QUALITATIVE ET QUANTITATIVE

Deux émonctoires peuvent être principalement utilisés par l’organisme pour assurer cette élimination : l'intestin et le rein.

1° Elimination intestinale.

D’après Matsumara, une voie d’élimination normale de l’hémoglobine injectée dans la circulation serait l'intestin. L’auteur se basait sur le fait que les animaux qu’il avait traité par cette substance présentaient des phénomènes de diarrhée sanglante. Mais nous avons vu dans le chapitre I de la troisième partie de notre travail que ces accidents étaient liés à un défaut de technique dans la préparation de l’hémoglobine, qui est altérée de ce fait.

Cependant, G. Boggino a montré par des études histologiques que la cellule «a mucus » du tractus intestinal est capable d'éliminer des sels de fer (lactate citrate oxalate) injectés dans la circulation. G. Fontes et L. Thivolle ont montré également que même à l’état normal, une notable quantité de fer est éliminée par les matières fécales à la dose moyenne quotidienne d'environ 6 milligrammes.

Ces résultats s’appliquent-ils aux chiens traités par nos solutions d’hémoglobine ? Si l’hémoglobine est éliminée par l'intestin, nous devons la retrouver dans les matières

fécales. C’est pourquoi nous avons essayé d’y déceler la présence de ce corps.

Nous avons constaté que les selles de nos chiens ayant reçu de l’hémoglobine sont d’aspect normal. Elles ne sont ni brunâtres, ni noirâtres. Après dilution et filtration, elles ne présentent pas de spectre permettant de caractériser l’oxyhémoglobine ou un de ses dérivés. La réaction de Kastle Meyer ne donne qu’un résultat très faiblement positif (notons en passant que les chiens ont une alimentation carnée). Il semble donc très difficile d'admettre qu'une forte proportion de l’hémoglobine injectée puisse être rejetée par l'intestin.

C’est pourquoi nous avons admis sans nier sa possibilité, que l'élimination de l’hémoglobine par voie intestinale était de peu d'importance et qu’elle pouvait être facilement négligée en comparaison de la quantité du pigment qui est éliminé par les urines. Nous avons donc basé la détermination de nos bilans d'élimination d’hémoglobine uniquement sur les quantités rejetées par le rein.

2° Elimination urinaire.

Barkroft a établi que les substances ayant un poids moléculaire supérieur à 70.000, ne filtrent pas à travers le rein: or, le poids moléculaire de l’hémoglobine est de 68.000. Nous sommes donc à la limite de la perméabilité rénale. De plus, cet auteur montra que ce pigment peut exister à état polymérisé; et Geiger admet qu’il existe même sous plusieurs formes dans le sang à l’état normal. Ce fait pourrait expliquer que toute l’hémoglobine ne puisse filtrer à travers le rein. Il semble en réalité que comme pour beaucoup d’autres substances, il existe pour elle un seuil d'élimination rénal.

Ponfick, en 1875, a trouvé qu’on n’observe d’hémoglobinurie chez le chien qu'après injection dans les veines de 1 gr. 20 de sang hémolysé. En 1898, von Starck, rapportant

dans son ouvrage les études faites à cette époque avec des hémoglobines hétérogènes conclut à l'existence d’un seuil. En 1912, Pearce, Austin et Eisenbrey ont montré qu’une injection intraveineuse de 60 milligrammes par kilogramme du poids du corps déclenche une hémoglobinurie. Sellards et Minot, en 1916, trouvèrent chez l’homme qu’une injection supérieure à 25 cc. de globules rouges humains Provoquait à coup sûr une hémoglobinurie. En 1929, Manwhell et Whipple montrèrent qu'après injection intraveineuse d’hémoglobine, une certaine quantité est tolérée avant qu’on n’observe l’apparition d’hémoglobinurie. Il existe donc sûrement un seuil rénal pour ce corps. Cette valeur s'exprime en milligrammes par kilogramme. Elle est remarquablement constante pour les animaux d’une même espèce. Pour l’hémoglobine de sang de chien, elle est en moyenne de 215 milligrammes par kilogramme de poids du corps. Pour les hétérohémoglobines, elle est beaucoup plus basse, soit environ 115 milligrammes par kilogramme. Ces auteurs ont montré aussi qu’une anémie sévère et prolongée ne modifie pas le seuil. Mais Lichty, Havill et Whipple ont trouvé chez le chien qu’il est abaïssé de 46 p. 100 par des injections d’hémoglobine répétées quotidiennement. Le seuil reprend sa valeur primitive dans les semaines qui suivent la cessation des injections. Ils concluent pour le seuil normal, à des valeurs supérieures à celles qu’a donné Manwell, Whipple et Taylor. Bayliss, Phyllis, Tokey Kerridge et Dorothy Russel, Yoshu Fukuda et Oliver. Notons que d’après ces deux derniers auteurs, l'élimination urinaire serait d’autant plus grande que la diurèse est plus importante.

La quantité d’hémoglobine que nous injections étant de beaucoup supérieure à ce seuil rénal, nous avons toujours constaté la présence d’hémoglobine dans les urines.

a) Moment d'apparition de l’hémoglobine dans les urines après l'injection. — Amberson et ses collaborateurs ont

trouvé chez des animaux dont le sang avait été entièrement remplacé par des solutions de liquide de Ringer Locke homoglobiné que l’apparition de l’hémoglobine dans les urines se fait dès la première heure. Minatoya a constaté chez le lapin que l’hémoglobine apparaît dans les urines entre la quinzième et la vingtième minute après l’injection. Webster, Engel, Lang et Amberson ont en outre montré que l'élimination rénale de l’hémoglobine par le rein de la grenouille est très influencé par le pH du liquide de perfusion.

Personnellement, nous n’avons rien de précis à ajouter à ces données. Chez nos chiens soumis à des injections lentes et continues en goutte à goutte de solutions d’hémoglobine, nous avons bien constaté que le pigment apparaissait dans les urines entre la première et la deuxième heure, mais cette constatation n’a pas grande valeur étant donné les conditions peu favorables à la diurèse où nous étions placés.

b) Sous quelle nature l'hémoglobine injectée est-elle éliminée ? — Les premières urines émises après administration de solution d’hémoglobine sont fortement teintées en rouge vif. Si l’émission urinaire suit de près l'injection d’hémoglobine, un examen spectroscopique montre qu’on est en présence d’oxyhémoglobine. Donc, ce pigment est éliminé sous la forme même où il a été injecté. Si, au contraire, l'élimination est retardée, soit par suite d’oligurie, soit parce que l’animal, maintenu en cage, ne veut pas uriner, on trouve presque uniquement de la méthémolobine. Ce fait fut également signalé par Lichty, Havill, Whipple, Baker et Doods, qui constatèrent que sous l’influence du temps, on observait à la fois une déperdition quantitative de l’hémoglobine dans les urines et une transformation en méthémoglobine. Ils montrèrent, en outre, que cette transformation peut se produire à l’intérieur même de la vessie quand il y a rétention urinaire, Drabkin

également après injection de 30 cc. d'oxyhémoglobine à des lapins par voie intraveineuse, trouva que le pigment est éliminé par le rein sous forme d’oxyhémoglobine, mais que celle-ci, au contact de l’air, se transforme en méthémoglobine.

Nous signalerons à ce propos qu’Amberson et ses collaborateurs ont observé dans leurs expériences de remplacement du sang par du liquide de Ringer Locke hémoglobiné qu’à la longue, l’oxyhémoglobine était capable de se transformer en méthémoglobine dans la cireulation. Cette transformation s’opérerait au bout du même temps que dans une solution conservée «in vitro » à 37°.

Durée de l'hémoglobinurie. —— La durée de l’hémoglobinurie dans nos expériences a varié selon l'importance des troubles de la diurèse et des processus de néphrite déclenchés par le passage de l’hémoglobine à travers le rein. Tel chien qui présentait de graves signes d’insuffisance rénale n’élimina que très peu d’hémoglobine, et pendant très peu de temps, et chez tel autre dont la néphrite était également évidente, on vit l’hémoglobinurie se prolonger durant plusieurs jours. Au total, ce n’est que chez les animaux qui n’ont pas manifesté de troubles apparents du fonctionnement de leur rein que nous avons pu obtenir à cet égard des renseignements du même ordre. Si l’on ne tient compte que de ces cas, on peut dire que la durée d’élimination fut d'autant plus grande que la quantité d’hémoglobine injectée fut plus importante. C’est ainsi que chez les quelques chiens qui purent recevoir des solutions d’hémoglobine à 3,5 p. 100 sans présenter de signes cliniquement évidents de néphrite l’hémoglobinurie dura environ ex heures. Chez les nombreux animaux que nous avons, soumis à des injections d’hémoglobine à 6,5 ou 7 p. 100 et qui, comme nous l’avons vu, n’ont pas présenté de troubles de leur appareil rénal, l’élimination de l’hémo-

globine dans les urines dura en moyenne trente-six heures. Chez l’unique chien traité par de l’hémoglobine à 14 p. 100 qui ne fit pas de néphrite grave, Thémoglobinurie dura trois jours.

Après la cessation de cette hémoglobinurie franche, nous avons constaté une période pendant laquelle les urines ont été fortement colorées. Cette coloration était tantôt brunâtre, tantôt franchement acajou, tantôt verdâtre. Les urines restaient ainsi encore colorées durant vingt-quatre à quarante-huit heures. L’examen chimique et spectrographique de ces urines nous a montré l’absence totale d’hémoglobine ou de méthémoglobine, maïs la présence à des doses plus ou moins importantes de pigments biliaires ou d’urobiline. Cette élimination fut relativement faible ou même parfois inconstante chez les chiens soumis à des solutions d’hémoglobine à 14 ou à 3,5 p. 100. Ce fut au contraire un fait d'ordre général dans les expériences conduites avec des solutions à 6,5 p. 100. Nous ne savons pas comment expliquer cette différence de comportement des animaux, selon le titre de la solution d’hémoglobine qu’ils reçurent. Mais nous pensons que cette hémoglobinurie et cette urobinurie peuvent s'expliquer pour une part par une biligénie intrarénale, et pour une autre part par stimulation de la fonction biliaire du foie.

Mann Sheard, Bolimann et Baldes ont montré qu'après perfusion de la moelle osseuse du tibia et de la rate par des solutions d’hémoglobine, la quantité de bilirubine était nettement supérieure dans le sang efférent de ces tissus que dans le sang artériel, ce qui prouve bien la possibilité d’une biligénie locale.

Kun Sribhisthag Hawkins et Whipple ont établi par ailleurs, après établissement de fistule biliaire convenable, que des solutions d’hémoglobine de chien, administrées par voie intraveineuse, provoquent une augmentation de l’élimination des pigments biliaires par le foie.

e) Elimination quantitative, — Bilan d'élimination. — D’après ce que nous avons dit antérieurement, nous avons considéré comme suffisante l’étude de l'élimination urinaire de l’hémoglobine pour l'établissement du bilan. Nos dosages d’hémoglobine furent effectués dans les urines à laide de l’hématimètre de Zeiss.

Les résultats que nous avons obtenus sont consignés dans le tableau.

TABLEAU DES BILANS D’ÉLIMINATION D'HÉMOGLOBINE CHEZ LES CHIENS SOUMIS A UNE INJECTION INTRAVEINEUSE D’UNE SOLUTION A DIFFÉ-