PROCÉDÉS D 'OBSERVATION

Organes mâles. — Pour étudier au microscope les anthères et le pollen, l’eau estun véhicule défectueux : elle gonfle les grains de pollen, fait disparaître leurs plis et les amène tous à la forme sphérique ; le gonflement du pollen fait éclater les anthères, de sorte qu’on ne peut noter leurs dimensions. La glycérine a l'inconvénient de le contracter. L'huile d'olive, indiquée par M. Epceworrx", a l’avantage de ne déformer ni gonfler les grains; cependant elle fait quelquefois disparaitre les pointes qui hérissent leur surface. Cela n'a pas d’inconvénient pour nous, qui avons à nous préoccuper seulement de la forme et des dimensions des grains de pollen. C’est dans l'huile d'olive que j'ai pris toutes mes mesures.

Organes femelles. — Les rapports de si{ualion des divers organes femelles des 7ypha (stigmates, poils, bractéoles) ont une grande importance pour caractériser les espèces : il est donc essentiel d'observer ces organes sans les déplacer. La facilité avec laquelle les bractéoles se détachent de leur support, indépendamment du reste de la fleur, rend cette opéra-

1. BEAUREGARD et GALIPPE. — Guide pratiquetde micrographie, Paris, 1888, p. 360.

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tion particulièrement délicate. Le D' KroNrELD' conseille de s’y prendre de la façon suivante :

Avec des pinces fines, ou mieux une aiguille à cataracte, qu'on enfonce dans l’épi femelle jusqu'à l'axe, on enlève un minuscule fragment de celui-ci, auquel adhère un petit paquet de fleurs. On transporte avec soin ce petit paquet sur la lame porte-objet, en évitant de déplacer aucun organe, notamment les bractéoles, et on le met dans une goutte d'alcool, qui imbibe les poils et chasse les bulles d’air. Avec les aiguilles, on étale délicatement en éventail le petit paquet sur la lame de verre ; on y ajoute une goutte d'eau, et on y pose la lamelle couvre-objet; la préparation est prête pour l'étude. Il est bon de préparer à part quelques bractéoles, fruits et carpodies isolés.

On note la forme et la situation relative des organes et toutes leurs dimensions : il suffit pour cela d’un grossissement de 50 à 100 fois, sauf pour étudier l'extrémité des poils et les grains de pollen, ce qui nécessite un grossissement de 300 à 500 diamètres.

Afin de pouvoir conserver les préparations et de les éclaircir, je remplace l’eau par la glycérine.

Pour étudier la Maschenschicht, couche extérieure de cellules du testa, dont les caractères ont été considérés par RonrBacH comme très importants, il est nécessaire de faire une coupe très mince de la graine dans la moelle de sureau (ce qui n’est guère facile à cause de la petitesse du fruit), et d'employer un grossissement de 500 à 800 fois au moins.

1. KRoNFELD (Dr E. M.). — Monographie der Gattung Typha (1889), p. 130.