ScHAFFEB, Anat. Anzeiger, Bd. V

5. Stroede, Experinientelle Untersuchungen iiber Degeneraticjn u. Régénération peripherer Nerven nach Verletzungen. Beitrag. zur pathol. Anat. u. allg. Paihol., Bd. XIII, Heft. 2, 1893.

6. Fajerstajn, Em neues Silberimpragnationsverfahren als Mittel zur Fârbung der Axencylinder. Neurol. Centralbl., 1 fevr., n° 3, 1901.

7. S. R. Cajal, Pequefias comunicaciones técnicas. Eev. trini. microgr., t. V, 1901.

8. Nissl, Ueber die Untersuchungsmethoden der Grosshirnrinde. Tagebl. d. Naturforsch. zu Strasburg, 1885. — Ueber eine neue Untersuchungsmethode der Central- Organe. Centralbl. f. Nervenheilk. u. Psychiat., Bd. XXII, 1894.

9. Weigert, Beitrâge zur Kenntniss der normalen menschlichen Neuroglia. Frankfurt am Main, 1895.

10. Lenhossék, Centrosom u. Sphâre in der Spinalganglienzellen des Frosches. Sllzb.d. Wiirzburg. phys. mediz. Gesellsch., 1895.

11. Azoulay, Coloration de la myéline par l'acide osmique et le tanin. Bull. Soc. de Biologie, 1894 et Anal. Anzeiger, Bd. X, 1894.

12. Rehm, Einige neue Fârbungsniethoden. Miinchen. med. Wochenschrift, 1892.

coloration des neuro fibrilles.

sin ^ où noyau et protoplasma laissent deviner un peu de leur composition Mélhodes de chimique, encore si ignorée et si pleine de promesses. Celles encore plus précieuses qu'ont inventées Apathy '^ Bethe ^, Simarro '', Cajal Bielsclîowsky*"', Donaggio^, Joris®, Lugaro ^ pour la mise en évidence du réticulum intraprotoplasraique, soupçonné, il y a longtemps, par Schultze, en particulier.

Et les conquêtes sans nombre, toujours plus précises, suivent les méthodes.

Mais de toutes ces méthodes par coupes, si nombreuses et si parfaites, en est-il aucune qui nous apprenne le cours et le mode de terminaison des expansions protoplasmiques, le trajet et l'aboutissant des axones les plus fins et des arborisations nerveuses terminales ? En est-il une seule avec laquelle on ait pu résoudre de façon définitive le problème ardu des connexions intercellulaires ? Notre longue énumération est, là-dessus, muette.

Une immense lacune histologique reste donc à combler. Des méthodes nouvelles sont nécessaires, aptes, non comme les précédentes à nous désigner, par une coloration spéciale, telle espèce d'éléments., cellules nerveuses ou névrogliques ou fibres à myéline, mais à nous faire connaître en détail ce qu'est tel élément, telle cellule nerveuse ou névroglique ou telle fibre myélinisée. Il ne s'agit plus de métliodes spécifiques.! mais de méthodes individualistes mettant en relief toutes les particularités : forme, volume, rapports, trajet, longueur, etc., de chaque individu et de chacune de ses parties. En un mot, il faut que la méthode soit si élective qu'un élément ou tout au plus un petit nombre d'éléments s'offrent seuls aux regards, au milieu de tous les autres restés invisibles. Un tel rêve de technique, le microscope devenant scalpel, et l'histologie, dissection, anatomie fine, peut-il être réalisé ?

Méthode de Un morceau de tissu nerveux traînait depuis quelques jours, durcissant Golgi. dans du liquide de Mûller pur ou mélangé d'acide osmique. Distraction

d'histologiste ou curiosité de savant, le voilà immergé dans un bain de

1. RosiN, Ueber eine neue Fârbungsmethode des gesamniten Nervensystems. Neurol. Centralbl., 1895.

2. Apathy, Das leitende Elément des Nervensystems und seine topographisctien Beziehungen zu den Zellen. Mittheil. aus der zool. Station zu Neapel, Bd. XII, Hft. 4,

3. Bethe, Uetier die Neurofibrillen in der Ganglienzellen von Wirbeltieren und ihre Beziehungen zu den Golginetzen. Arch. f. mifcros. Anat., Bd. LV, 1900.

4. Simarro, Nuevo método liistologico de impregnaciôn por las sales fotogrâficas de plata. Rev. trim. niicrogr., t. V, 1900.

5. S. R. Cajal, Arch. latinos de Medicina y Biologia, n» 1, octubre de 1903. — Un sencillo método de coloraciôn selectiva del reticulo protoplâsmico, etc. Trabajos del Lab. de investig., biol., t. II, Madrid, 1903.

6. BiELSCHOwsKY, Die Silberimpregnation der Neurofibrillen. Neurol. Centralbl.,

7. Donaggio, Azione délia piridina sul tessuto nervoso. Anali di Neurol., vol. XXII., fasc. 1 et 2, 1904.

8. JoRis, A propos d'une nouvelle méthode de coloration des neurofibrilles, etc. Bull, de l'Acad. roy. de Méd. de Belgique, 3 avril 1904.

9. Lugabo, Un metodo de colorazione dette neurofibritte mediante t'argento cotloi- .ale. Monil. zool. ital., vol. XV, n" 11, 1904.

MÉTHODES DE RECHEHCHES

nitrate d'argent. Les aiguilles rutilantes, aux reflets châtoyants d'or, attirent bientôt l'attention. On le sectionne, on déshydrate ses coupes, on les éclaircit, on les regarde. Spectacle inattendu ! Sur un fond jaune d'une translucidité parfaite, apparaissent, clairsemés, des fdaments noirs, lisses et minces, ou épineux et épais, des corps noirs, triangulaires, étoiles, fusiformes ! on dirait des dessins à l'enfle de Chine sur un papier transparent du Japon. L'œil, habitué aux inextricables lacis des coupes au carmin et à l'hématoxyline où l'esprit s'efforce en des prodiges de critique et d'interprétation toujours en suspens, est déconcerté. Ici, tout est simple, clair, sans confusion. 11 n'y a plus à interpréter, il n'y a qu'à voir et constater celte cellule aux multiples branches, rameuses, couvertes de givre, embrassant de leurs ondulations un espace étonnamment grand ; cette fibre lisse et égale, qui née de la cellule, s'en éloigne à des distances énormes, et, tout d'un coup, s'épanouit en une gerbe d'innombrables fibres bourgeonnantes ; ce corpuscule confiné à la face d'un ventricule, d'où il envoie une tige se ramifier jusqu'à la surface de l'organe ; d'autres cellules étoilées, comme des comatules ou des phalangides. Emerveillé, l'œil ne peut se détacher de cette contemplation. Le rêve technique est réalité! L'imprégnation métallique a fait cette dissection fine, inespérée. C'est la méthode de Golgi

Devons-nous au hasard cette méthode dont les images si nettes et si décisives vont nous débarrasser des fameux réseaux de Gerlach, des bras protoplasmiques de Wagner et Valentin et de tant d'autres hypothèses aussi fantaisistes ? Peut-être ; puisqu'encore aujourd'hui nous en sommes à ignorer le motif de cette réaction exclusive de l'argent sur le bichromate au sein de quelques éléments ; mais l'honneur n'en revient pas moins à celui dont elle porte le nom, à Golgi, le savant professeur de l'Université de Pavie, qui, le premier, en 1878, la publia.

Maître d'une méthode, par laquelle l'analyse anatomique, naguère si pénible, devient plaisir et joie, Golgi a tôt fait de compléter nos connaissances sur la morphologie de la cellule nerveuse ; il nous dit :

1° Les expansions protoplasmiques se terminent par des extrémités libres ;

2° Toute cellule nerveuse possède un cylindre-axe qui, pendant son trajet, émet des fibrilles collatérales ramifiées coup sur coup.

.3" Le mode d'être du cylindre-axe permet de distinguer les cellules nerveuses en deux types : le premier type, pourvu d'un cylindre-axe qui, tout en émettant des fibrilles collatérales, conserve son individualité dans la substance blanche ou les racines motrices de la moelle où il se porte, et le second type, muni d'un cylindre-axe, qui perd vile son individualité, se résolvant immédiatement, dans la substance grise où il est né, en une arborisation terminale 2.

Les faits de m orpho logie cellulaire établis par Golgi à l aide de sa méthode. Terminaisons libres des expansions protoplasmiques.

1. Golgi, Sulla struttura délia sostanza grigia del cervello. Gazetta medica lombarda, t. IV, 1873. — Sulla fina anatomia degli organi centrali del sistenia nervoso. Milano, 1886. — Untersuchungen ûber den feineren Bau des cerebralen und peripheristiiea Nervensystems. lena, 1894. — C'est la collection de toutes les monographies de Golgi.

2. Avant Golgi, on avait déjà signalé les ramifications du cylindre-axe de quelques cellules. Ainsi Gerlach (Mikroskopische Studien et Handbuch der Gewebelehre, 5 Aufl.

Hypothèse de Golgi sur un réseau inlerstitiel nerveux de la substance grise.

Cajal, à l'aide de la nié- Ihode de Golgi, renverse la théorie des réseaux et de la double origine des nerfs.

Sur ces points, les confirmations deviennent unanimes : Sala, Fusari, Monclino, Hansen, Tarlut'eri, Kôlliker, Cajal, Van Gehuchten, His, P. Ramôn, Martinotti, Retzius, Edinger, Schaiïer, Calleja, Cl. Sala, Held, Oyarzum, Lugaro, Azoulay, etc., ont vu mêmes choses.

Sur ces points, avons-nous dit : il y a donc une restriction. Nous allons l'expliquer.

L'œuvre de Golgi comporte deux parts: d'un côté, la méthode et les faits, créations fécondes, accueillies, approuvées d'enthousiasme, et de l'autre, l'interprétation ; celle-ci, au contraire, combattue et repoussée.

Si réduite soit-elle parla méthode elle-même, cette interprétation a été la pierre d'achoppement contre laquelle, rééditant l'aventure de Deiters, est venu verser Golgi, poussé par son éducation et son milieu scientifique. — Qui donc peut se flatter d'échapper à une telle influence? d'avoir l'énergie de plier des théories toutes puissantes à des faits certains, ou d'en faire table rase si elles ne s'y adaptent pas ? — C'est l'époque où les réseaux interstitiels de Gerlach et la double origine des nerfs hantent, dominent tous les esprits, oîi l'atmosphère nerveuse que respirent tous les neurologistes n'est formée que de ces pensées, oii toute découverte est rapportée à elles. Et Golgi, inconsciemment, recherche et croit voir dans ses préparations nouvelles la réalité de ces théories. Il proclame donc l'existence d'un réseau interstitiel dans la pulpe grise. Pour étayer davantage ce dire, il imagine lui-même d'autres hypothèses : il soutient que les expansions protoplasmiques n'ont qu'un rôle nutritif ; il partage les cellules nerveuses au point de vue physiologique, en deux types : un type moteur et un type sensitif.

Autant d'hypothèses ! autant d'erreurs ! Nous fûmes le premier à le démontrer, et nous le verrons bientôt. Eh bien ! cette interprétation de Golgi qui, pendant dix ans et plus, va consolider la théorie de Gerlach, la rendre plus oppressive et entraver l'éclosion de la conception vraie de la structure du système nerveux, n'est point admise, on la combat, on la repousse.

Dès 1888, le premier sur la brèche, nous nous insurgeons contre elle ; car depuis un an déjà, nos recherches ', faites précisément avec la méthode même de Golgi dans les territoires les plus divers du système nerveux,

1867) avait indiqué, entre autres, les ramifications du cylindre-axe des cellules de Purkinje du cervelet, et Meynert (Vom Gehirne der Saugethiere, S/r/c/fer's Handbuch, 1871) avait dessiné celles des grandes cellules de la corne d'Ammon. Ce sont là des assertions par conjecture ou illusion, car seules les méthodes de Golgi et d'EhrIich sont capables de démontrer l'existence de ces collatérales.

1. Cajal, Estructura de los centros nerviosos de las aves. Reuista trime dral de his tologia, 1888 et 1889. — Conexiôn gênerai de los elementos nerviosos, Midicina prâclica, 1889. — Sur l'origine et les ramifications des fibres nerveuses de la moalle embryonnaire. Anat. Anzeiger, n"" 3 et i, 1890. — Contribuciôn al estudio de la médula espinal. Revista trimestral de histoL, n"* 3 et 4, 1889. — A quelle époque apparaissent les expansions des cellules nerveuses ? etc. Anat, Anzeiger, n" 21, 1890. — Sur l'origine et la direction des prolongements nerveux dans la couche moléculaire du cervelet. Internat. Monatschr. f. Anat. a. Phi/sioL, 1889. — Les autres travaux seront cités en temps opportun.

MÉTHODES DE RECHERCHES

nous ont amené, tout en redressant quelques-unes des inductions physiologiques hasardeuses de Golgi, aux constatations capitales suivantes :

1° Qu'il s'agisse de ramifications finales de cylindres-axes, de collatérales de cylindres-axes ou de prolongements protoplasmiques, dans tous ces cas, ce sont toujours des branchilles libres qui forment les terminaisons, La cellule nerveuse avec tout l'ensemble de ses divisions et subdivisions constitue donc une individualité absolument indépendante et, pour employer l'expression de Waldeyer, nous l'appellerons neurone.

2° Cette parfaite liberté de l'extrémité terminale du cylindre-axe, nous la constatons aussi et avec la dernière évidence, pendant la période embryonnaire, dans le cône de croissance.

3° Libres, les ramifications nerveuses terminales ne s'unissent donc pointa d'autres ramifications nerveuses. Non, elles s'appliquent purement et simplement, par contact, sur le corps ou sur les expansions protoplasmiques d'autres éléments cellulaires.

4° Les courants nerveux, au passage d'une cellule à l'autre, se transmettent donc des fibres nerveuses de l'une au protoplasma cellulaire de l'autre. Et quoique cela soit contraire à l'opinion dominante, nous déclarons que, lui aussi, ce protoplasma cellulaire, qu'il appartienne au corps ou aux prolongements dendritiques, jouit de la faculté de transporter l'ondulation nerveuse ; ce n'est donc point un simple appareil de nutrition.

5° Les nerfs sensitifs et sensoriels ne naissent point dans les centres. Leur origine, ainsi que His le signala naguère, est dans des cellules ganglionnaires extra-centrales. Partis de là, les cylindres-axes, assemblés en nerfs, arrivent aux centres et s'y bifurquent chacun en deux branches, l'une ascendante, l'autre descendante. De ces branches se détachent de nombreuses collatérales allant envelopper le corps des neurones moteurs et d'association.

6° Le cylindre-axe d'un grand nombre de cellules nerveuses centrales se bifurque de même lorsqu'il parvient à la substance blanche, et, en certains cas, il peut aller jusqu'à donner trois tubes et plus, destinés à des régions blanches diflférentes.

Bientôt nous ne sommes plus seul. Notre attaque et nos découvertes attirent d'autres combattants : Kôlliker, Van Gehuchten, Retzius, Lenhossék, Held, P. Ramôn, Cl. Sala, Azoulay, Pétrone, Lugaro, Edinger, Calleja et bien d'autres encore. Armés de la méthode de Golgi, originale ou modifiée par nous en double imprégnation, scrutant tous les organes nerveux de toutes sortes de vertébrés et invertébrés, eux aussi, ne voient partout qu'indépendance, simple contact, activité de toutes les parties de l'individualité cellulaire et nerfs naissant toujours des cellules.

Après cela, que reste-t-il des réseaux de Gerlach, de la double origine des nerfs, et des distinctions physiologiques par trop subtiles de Golgi ?

La ruine de ces chimères n'est point le seul fruit de la victoire. Pendant la lutte, Retzius et Lenhossék ont l'honneur de constater la similitude fondamentale de la morphologie des neurones, chez les vertébrés et les invertébrés, moissonnant là découvertes sur découvertes ; et apportant leur

Toutes les expansions de la cellule nerveuse ou neurone se terminent par des extrémités libres.

contingent de preuves, Fusari \ P. Ramôn 2, Edinger^, Cl. Sala '*, Van Gelîuchten "', Athias ® donnent à nos connaissances sur la structure nerveuse des vertébrés inférieurs une ampleur plus grande.

Depuis, la lutte victorieuse a fait place aux conquêtes pacifiques, et la méthode de Golgi n'en est plus à compter ses partisans enthousiastes. On ne s'en tient plus aujourd'hui à confirmer les découvertes faites par Golgi et par nous. Chacun travaille, par cette méthode, à révéler lui-même quelque nouveauté, et elles abondent, dans la structure intime du cerveau, du cervelet, de la moelle, du bulbe olfactif, des centres optiques, du bulbe, de la protubérance, des ganglions rachidiens, sympathiques, etc., etc. Ces découvertes sont déjà grandes et nombreuses, nous le verrons ; et ceux qui par leur esprit investigateur et sagace y ont acquis un nom prééminent s'appellent KôUiker Van Gehuchten ^, Retzius Lenhossék Held

1. FusARi, Untersuchungen iiber die feinere Anatomie des Gehirns der Teleostier Internat. Monatschrift f. Histol. u. Physiol., 1887.

2. P. Ramôn, Investigaciones de liistologi'a comparada en los centros ôpticos de los vertebrados. Tesis, Madrid, 1890. — El encéfalo de los reptiles, 1891. — Investigaciones iiiicrogrâficas en el encéfalo de batracios y reptiles, etc. Zaragoza, 1894. — Estructura del encéfalo del camaleôn. Rev. trim. microgr., 1896.

3. Edinger, Vorlesungen iiber den Bau der nervôsen Centralorgane, etc., 1890. — Les autres travaux du même auteur seront cités en temps et lieu.

4. Cl. Sala y Pon.s, Estructura de la médula espinal de los batracios. Barcelona, 1892. — La corteza cérébral de las aves, 1893. — La neuroglia de los vertebrados. Tesis, 1904.