Partsch, Arch. f. mikr. Anat., XIV, S

tM CH. COKTEJEAN. — GORTRIBDTION A L*^UDE

plupiurt de ses expériences ont été faites sar la Grenouille. Il troave de la pepsine en abondance dans les glandes œsophagiennes de cet animal, et les fiiibles quantités de ferment que ses digestions artificielles révèlent dans la muqueuse de Testomac, proviennent» dans son opinion, des glandes de Tœsophage, ont été entraînées par déglutition et imbibent la muqueuse gastrique. Cette imbibition est peu vraisemblable. Ebstein et Grutxner * ont fait justice de cette théorie de Tinfiltration des muqueuses vivantes par la pepsine lorsque von Wittich, Wassmann et Herrendôrfer * prétendaient que la pepsine contenue dans la muqueuse de Tantre dft pylore provenait du fond de Testomac. *

Du reste, la muqueuse du sac gauche de l'estomac, prélevée sur un Rat en pleine digestion, et dont la totalité du ventricule est remplie de suc gastrique, fournit après lavage préalable et infusion dans de t^acide chlorhy* drique à 1 p. 1000, une liqueur absolument inactive, comme nous l'avons constaté. L'albumine se gonfle un peu aux angles, mais ne se dissout pas. De rinfusion acidulée de muscle ou de tout autre tissu de l'organisme produirait le même résultat. Pourtant cette muqueuse est largement baignée par le suc gastrique sécrété exclusivement par le sac droit, et elle ne s'est point imprégnée de pepsine.

Récemment, les expériences de Swieciçki ont été combattues en Allemagne par S. Frankel '. Lorsque j'ai eu connaissance de ce travail, j'avais déjà, dans une note à TAcadémie des Sciences ^, attaqué les résultats auxquels était arrivé Swieciçki. Le travail de Frànkel est antérieur au mien, mais ses conclusions diffèrent en quelques points des miennes. II prétend notamment que les glandes de rœsophage renferment autant de pepsinogène et de pepsine que celles de Testomac. Ce qui a dû contribuer à Tinduire en erreur sur ce dernier point, c'est qu'il a exécuté ses digestions artificielles avec la fibrine, substance dont la digestibilité est très grande, et dont j'ai cru devoir rejeter systématiquement remploi pour faire l'essai d'une liqueur digestive ^ Des liquides agissant à peine sur l'albu-

1. EbsUin et GrâUner, Arch, f, die get. Phyt., VI, 1872; VIII, 1874.

2. VoQ Wittich, Wassmann et HerrendOrfer, cités dans Hermann, Handbuch der PkytioL, Band V, Theil I, S. 131 o. folg., et dans le travail précédenl.

3. S. Prftnkel, Pflûger's Àrch, f. d. get, Phys., Bd XL VIII, S. 63.

4. Cti. Contejean, Complet rendus de l'Acad, det Se, 27 ayrii 1891.

5. Les expériences de Pr&nkei ont été violemment attaquées par Grûtzner et von Swieciçki in Pflûger'i Archiv,, XLIX, S. 638, 1892. — Prftnkel a défendu son travail dans le Bd L, S. 293.

DE LA PHTSI0L061B DE L'ESTOMAG. 111

mine coagulée liquéfient souvent trè» bien lajflbrine, comme on sait du reste.

Voici les expériences que j*ai exécutées dans le but de contrôler les faits avancés par Swieciçki.

Expérience L — Sur une série de grenouilles, l'œsophage est ligaturé au-dessus du cardia. Le cul-de-sac œsophagien ainsi formé est lavé à plusieurs reprises par des injections d*eau salée pratiquées par la bouche. Les Jours suivants, on s'assure que la sécrétion de l'œsophage est bien alcaline au tournesol. Additionnée diacide au millième, cette sécrétion, très riche en mucus, dissout Taibumiae. De la viande ou de l*albumine introduite dans ces culs-de-sac œsophagiens y reste indéflniment sans se digérer, mais se dissout complètement si on la place ensuite dans de Tacide chlorhydrique au millième. Après avoir précipité dans les liqueurs ainsi obtenues les matières album! noTdes autres que les pepsines par la méthode de Hofmeister S ^t, après flltration, la présence des peptones a été constatée par différentes réactions (réaction de Millon, réaction du biuret, réaction xanthoprotéique). Si la viande avait été préalablement imbibée d'acide à 1 p. 100^ elle se dissolvait totalement dans l'œsophage en un ou deux jours. Les bouches des grenouilles ayant servi à ces dernières expériences, avaient été cousues, pour empêcher le vomissement possible.

Cette série d^expériences démontre surabondamment que, comme Tavait annoncé Swieciçki, la sécrétion (Bsophagienne de la grenouille est alcaline et renferme de la pepsine.

EXPÉRIENCE IL — Sur une nouvelle série de grenouilles, on lave l'estomac, en injectant lentement âOO gr. d'eau salée i 7 p. iOOO par une canule liée sur le pylore; le liquide en excès s'écoule par la bouche. On constate ensuite qu'un papier de tournesol bleu ne rougit plus au contact de la muqueuse stomacale. Le lavage a donc été bien parfait, et toute pepsine provenant de l'œsophage a été balayée. On place alors une ligature serrée en-dessous du cardia; on introduit, par l'orifice pyiorique, un morceau de viande ou d'albumine coagulée, et on Ile le pylore. Quatre ou cinq jours après, la digestion est complète; l'estomac, qui ne contient pas de gaz, est distendu par un liquide acide, limpide, et ne répandant aucune odeur de putréfaction.

ExpéHiEifCE in. — Enfln, j'ai préparé une troisième série de grenouilles traitées comme celles de la deuxième série ; seulement je fixais sur l'orifice pyiorique un petit tube de verre. Le duodénum lié et le pylore étalent ensuite

1. On ig'oale à la digestion qaeiqaes gouttes d'acétate de Boode, pais de perchlorare de fer. On verse nne lessive de potasse josqo'ii presque neniralisation; on fait boaUlir 10 minâtes, et on filtre. Le flUrat doit être exempt de fer (ferroeyanure de poUssium). Voir Franx Hofmf ister, ZeUtdurift f. fhynol. Ckmie^ lY, S. 264, iSSO.

113 CH. CONTBIEAN. — CONTRIBUTION A l'ÉTUDE

assujettis aux lèvres de la plaie par les ù\s de suture. Lincision avait été faite sur le côté dorsal du flanc gauche, à quelques millimètres des apophyses costiTormes. Le suc recueilli par ces flstules sur ces animaux ainsi apprêtés était acide, et dissolvait Talbumine; donc II contenait parraitement de la pepsine.

Ces deux dernières séries d'expériences montrent que, contrairement à Topinion courante, les glandes stomacales, tout en sécrétant des acides, fabriquent aussi des ferments digestifs.

Des digestions artificielles exécutées en grand nombre avec des muqueuses œsophagiennes et gastriques de grenouille m'ont montré que, en général, la pepsine œsophagienne est plus abondante que la pepsine stomacale. J'ai cherché à établir le rapport des quantités de pepsine élaborées dans Toesophage et dans l'estomac, et à déterminer leur mode d'action sur les matières albuminoïdes. Je citerai une expérience entre toutes :

La partie antérieure du tube digestif d*une grenouille à Jeun depuis plusieurs mois est fendue longitudinalement et étalée avec des épingles sur une planchette de liège. Elle est placée sous un robinet d'eau pendant un quart d'heure au moins, puis la zone cardiaque est réséquée.

L'œsophage et Testomac sont placés séparément dans deux flacons d*Erlenmeyer, contenant chacun 10 cent, cubes d'acide chlorbydrtque à i p. 1000. Après un séjour de dix-huit heures dans l'étuve à 30% 90 cent, cubes d'eau acidulée à i pour iOOO et un morceau d'albumine coagulée pesant 9 gr. 5 environ, sont ajoutés à chacun des flacons. Vingt-quatre heures après, les flacons sont retirés de Téluve. La digestion est plus avancée dans celui qui contient l'extrait œsophagien. Les deux liqueurs flKrées sont très limpides; neutralisées exactement, elles présentent une légère opalescence; elles sont ensuite saturées de chlorure de sodium et portées à rébullition; U se forme de part et d'autre un précipité de syntonine que l'on sépare sur des flitrcs tarés. Ces précipités sont, lavés, séchés à l'étuve et pesés. On trouve ainsi entre les poids de syntonine fabriqués par la digestion,

stomacale et la digestion œsophagienne le rapport r^.

Les liqueurs flltrées et limpides sont divisées en deux portions égales» Les premières portions ne font que louchir très légèrement quand on y lijoute de Pacide acétique et du ferrocyanure de potassium. Comme des solutions de syntonine de l'œuf dans de l'acide chlorbydrique dilué, neutralisées et saturées de sei marin, donnent souvent le même trouble avec ces réactifs, j'en avais conclu tout d'abord à l'absence totale de propeptone dans ces digestions. En me servant ensuite d'acide nitrique pour la recherche de ce produit de digestion, j'ai pu me convaincre qu'il y existait à l'état de traces, en quantités bien moindres que lorsqu'on fait agir sur l'albumine de la pepsine de Mammifère.

DE LA PHYSIOLOGIE DE l'ESTOHAG* 113

Dans les deuxièmes portions, on dose les matières organiques par le permanganate de potasse à 1 p. iOO. On retranche des nombres obtjsnus le nombre fourni par le dosage des matières organiques dans un même volume de liquide provenant d'un flacon témoin contenant primitivement S gr. 5 d'albumine coagulée dans iOO centimètres cubes d'eau acidulée, mis vingt-quatre heures à l'étuve, et ayant subi les mêmes manipulations que les digestions artificielles. Les nombres ainsi corrigés sont proportionnels aux quantités de peptones produites dans ces digestions ^ On trouve ainsi entre les chiffres obtenus pour l'estomac et pour Tœsophage le rap-

port 77^ D'autres expériences ont fourni un rapport eoeore plus voisin de

l'unité.

En résumé, cette expérience montre : 1^ que la pepsine sécrétée par V œsophage est plus abondante ou plus active que celle de Feslo^ mac. On voit en oHtre que la prédominance d'action de la pepsine œsophagienne sur la pepsine stomacale se traduit surtout par la plus grande quantité de syntonine qu'elle produit; probablement, parce que la vitesse de transformation de l'albumine en syntonine^ sous rinfluence du suc gastrique est plus grande que la vitesse de transformation de la syntonine en peptone.

J'ai encore constaté cette prédominance d^activité de la pepsine œsophagienne, en faisant digérer pendant huit jours la même quantité d'albumine à des- extraits œsophagiens et stomacaux fortement acidulés (3 à 25. grammes de CIH pour iOOO). SMl restait un excès d*albumlne non digérée, il était toujours plus volumineux dans les digestions faites avec les infusions d^estomac. Si, de part et d'autre, la totalité de l'albumine était liquéfiée, Paddition de la même quantité d'acide nitrique dans les deux liqueurs neutralisées et salées déterminait un trouble toi^ours plus considérable (propeptone) dans les digestions stomacales.

1. Voici comment j'ai etfectué ce3 dosages : La solulioD de peptone à essayer est légèrement acidulée par l'acide chlorhydriqne ; elle est maintenue dans un bain-marie à la température de 100"; on y laisse tomber goutte à goutte d*une burette de Mohr, la solution de permanganate de potasse au centième, et Ton s'arrête qqand on iroit one couleur violette apparaître et persister au moins pendant une dizaine de minutes. En opérant dans ces conditions, je me suis assuré par un grand nombre d'expériences préalables, faites avec des solutions de peptones commerciales, que les chiffres lus sur la burette, diminués des divisions nécessaires pour produire la teinte finale sur un volume d'eau pure égal au volume de la liqueur essayée, étaient toi^ours propor-' tionnels aux quantités de peptones contenues dans les liqueurs à doser. Le permanganate à la température de 100"* oxyde donc les peptones en donnant presque toi^ours les mêmes produits ; et, si complexes que soient les réactions, elles n'en sont pas moins suffisamment comparables pour permettre de doser ces albuminoîdes par ce procédé. Il est même très sensible, bien qu'on soit un peu gêné dans Tappréclation de la teinte finale par un abondant précipité noir de peroxyde de manganèse.

JOURN. DE l'ANAT. ET DE LA PHYSIOL. — T. XXIX. 8

Pourtant je crois devoir faire la remarque que, chez Rana Tefnporaria^ espèce que j*ai surtout employée pour toutes ces expériences, il m'est arrivé quelquefois de trouver exceptionnellement autant de pepsine dans la muqueuse de Testomac que dans celle de l'œsophage. Jamais je n'ai observé ce fait chez R. Esculenta, où l'importance de la sécrétion œsophagienne sur la sécrétion stomacale au point de vue de la pepsine est encore plus marquée que dans l'espèce précédente.

J'ai fait de nombreuses préparations histologiques d'estomac et d'œsophage de grenouille. Les cellules des glandes gastriques de ces animaux présentent effectivement une grande analogie avec les cellules de revêtement des mammifères. Gomme ces dernières, elles sont granuleuses et ont une grande affinité pour le carmin et le bleu de quinoléine. Ce sont des cellules cyanophiles, comme les nomme M. Ranvier. Cependant sur des animaux en pleine digestion, leur contenu cellulaire devient souvent fort clair, et des vacuoles apparaissent dans leur intérieur; ce que je n'ai jamais vu arriver dans les cellules délomorphes. Je noterai pourtant que Hamburger^ en a observé en faisant des préparations avec des muqueuses d'estomacs de chiens tués vers la sixième heure après le début de la digestion. Stôhr * en a aussi décrit chez l'Homme et le Chien. Quoi qu'il en soit, sur des préparations d'estomac de Mammifère fixées avec soin par l'acide chromique étendu, ou la liqueur de Mûller, ou encore sur des coupes faites sur un estomac frais et examinées directement avec ou sans coloration par le bleu de quinoléine, je n'ai jamais pu voir de vacuoles dans les cellules de bordure. Ces vacuoles se montrent quelquefois si les pièces ont été traitées par l'acide osmique. Je crois devoir les attribuer, dans ce cas, à un artifice de préparation.

Les cellules des glandes œsophagiennes ont un contenu clair à granulations fines, mais plus abondantes que dans les cellules principales de l'estomac des mammifères. Leur noyau est aussi beaucoup plus facile à mettre en évidence que dans ces dernières. De plus, et cette particularité parait avoir complètement échappé à Partsch, qui a fait une étude détaillée sur l'histologie de l'intestin antérieur des Batraciens (loc. cit.), ces glandes œsophagiennes pré^ sentent des croissants de Gianuzzi. Ces croissants, fort difficiles à

i. E. Hamburger, Arch. f. mikr. Anal., Bd XXXIV, S. 225. 2. Stœhr, Arch. f. mikrotk,AML, XX.

DE Là PflTSIOIXKSIB DE l'ESTOMAC. 115

voir dans les préparations colorées à l'hématoxyline, se montrent assez bien sur des coupes traitées par le carmin picrique. L'aspect général de ces glandes rappelle alors celui de la sous-maxillaire du Chat. Mais les préparations colorées par le bleu de quinoléine sont extrêmement démonstratites. Les cellules de ces croissants ont un contenu très granuleux; elles sont cyanophiles et fixent énergiquement les réactifs colorants. Elles se rapprochent par ce côté des cellules de revêtement. Les autres cellules colorent aussi très énergiquement leur protoplasma et montrent fréquemment de grandes vacuoles dans leur intérieur. L'aspect de ces cellules claires œsophagiennes aussi bien que la manière dont elles se comportent Tis-à-vis du bleu de quinoléioe, les différeacient, je crois, nette^ ment des cellules adélomorphes.

Chez le Crapaud et chez la Salamandre Terrestre, où les glandes œsophagiennes font défaut, les glandes gastriques sont uniquement constituées par des cellules semblables à celles que l'on observe dans l'estomac de la Grenouille, et ces glandes sécrètent un suc gastrique énergique, comme je l'ai constaté sur des individus porteurs de fistules stomacales et par des digestions artificielles. Chez ces Batraciens rélaboration de la pepsine est donc localisée dans une région où n'existent que des cellules analogues aux cellules délO'^ morphes.

Nous voyons donc en résumé, que les expériences de Swieciçki sont loin d'avoir la portée qu'on leur attribue généralement; les conclusions auxquelles est arrivé ce physiologiste lui ayant été dictées par des observations insuffisantes et des faits histologiques en partie erronés.

Expériences de Klemensietcicz et de Heidenhain. — Examinons maintenant le deuxième argument fourni par les expériences de Klemensiewicz et de Heidenhain sur le suc pylorique du chien.

Malgré les objections de Wassmann {loco citato), de Woliïhûgel ^ et de von Wittich ', il est indiscutable que la région pylorique de l'estomac sécrète de la pepsine *. Le fait a été constaté par nombre

1. Wolffhiigel, Arch. fur dU get, Phytiologie, VI, S. ISS, 1S72.