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Mais l'identification de ces différentes infections tubereuleuses nécessitent l’inoculation pour chaque produit de nombreux cobayes et la réinoculation en série, suivant [a technique préconisée par notre maître M. Paisseau. Il peut coexister en eflet dans un même produit des bacilles typiques et de lultravirus. Lorsqu'on opère avec un produit qui, comme le sang, ne contient parfois qu'un très petit nombre de bacilles on peut provoquer aux différents animaux inoculés des tuberculoses expérimentales de
types divers.
Technique des inoculations en série.
La technique qui nous a semblé la meilieure est la suivante :
Il faut inoculer le plus grand nombre possible de cobayes avec le même produit; les inoculations sont faites sous la peau.
Si pendant le premier mois il n’y a pas eu mort spontanée d'un cobaye on sacrifie le premier le trentième jour de l’inoculation. Si la recherche est négative pour le premier animal d’une série, on sacrifie successivement un deuxième, puis un troisième en dépassant largement la durée de l'évolution de la tuberculose typique, type « Villemin » jusqu'à 6 mois et plus pour lé dernier animal.
Des intra-dermo réactions sont faites à ces co bayes et elles seront répétées si elles sont négatives.
A lautopsie de chaque cobaye sacrifié ou mort
spontanément on fait des frottis des ganglions (lombaires, inguinaux, trachéo-bronchiques), de la rate et le cas échéant des granulations viscérales.
On réinocule le produit de broyage des ganglions hypertrophiés qu'ils contiennent ou non des bacilles de Koch, de la rate ou éventuellement d'autres viscères. Ces réinoculations sont faites chaque fois à plusieurs cobayes. Pour chaque série de cobayes réinoculés on procède de la même facon en conservant dans chaque série un ou deux animaux inoculés pendant un délai de plusieurs mois (6 mois au moins) étant donnée la possibilité d’une tuberculose typique tardive.
On effectue ainsi plusieurs passages et ce n’est qu'après ceux-ci qu'on peut conclure, soit à une tuberculose qui reste strictement ganglionnaire, soit à une tuberculose typique généralisée survenant dans les délais normaux, ou des délais de plusieurs mois après deux, trois, quatre, cinq passages. Enfin il est des cas où la tuberculose ganglionnaire constatée aux premiers passages s atténue aux passages successifs jusqu'à disparaître complètement.
Mettant à profit ces méthodes nouvelles de réinoculation en série et d'observation prolongée des cobayes inoculés en vue de la recherche d’une tuberculose typique tardive, nous les avons appliquées à l'étude bactériologique des crachats, du sang et des nouures d'enfants atteints d'érythème noueux. Nous reproduisons ci-dessous les résultats que nous avons
obtenus par ces inoculations.
Ar VAR
A) Inoculation de crachats.
Nous avons inoculé le culot de centrifugation de crachats prélevés sur nos malades. Nous avons obtenu deux résultats positifs alors que les examens directs après homogénéisation avaient été
négatifs.
a) OBsERvATION 1. — T... Jeannine. Deux cobayes sont inoculés le 27 novembre 1930.
Premier passage :
Cobaye I : inoculation avec 1 cmce. de crachats.
Intra-dermo + +.
Mort après 6 mois le 19 mai 1931 : Tuberculose généralisée typique.
Poumons : granulations et frottis : B. K. +.
Rate : granulations et frottis : B. K. +.
Ganglions T. B. : énorme masse caséeuse.
Ganglions lombaires : 1 caséeux avec B. K. +.
La réinoculation à 2 cobayes LIT et IV est très fortement positive. Mort rapide des 2 cobayes avec nombreux B. K. sur tous les organes.
Cobaye II : inoculation avec 1 cmc. 1/2 de crachats.
Mort après 8 jours.
Réinoculation le 5 décembre 1930 de 2 cobayes V et VI.
Deuxième passage :
Cobaye V : intra-dermo -E + +, Sacrifié après 55 jours le 31 janvier 1931.
Très grosse rate : B. K. +, Cinq gros ganglions T. B. : B. K. +.
Cobaye VI : intra-dermo + + +.
Sacrifié après 3 mois 1/2 le 24 mars 1931. Rate très grosse avec 1 bacille acido-résistant. Réinoculation de 2 cmc. de broyage de ganglions et de rate à 2 cobayes VII et VII.
Troisième passage :
Cobaye VII : mort le 29 mai 1931 après 2 mois.
Autopsie : frottis négatif.
Réinoculation à 2 cobayes IX et X. Résultats négatifs.
Cobaye VIII : mort le 13 avril 1931 après 20 jours.
Un très gros ganglion mésentérique : frottis B. K. +.
Rate : frottis B. K, +.
Rate : petites granulations.
Conclusion : nous pouvons conclure dans ce cas à une tuberculose typique paucibacillaire en raison de la longue durée de
survie du cobaye I.
b) OBsERVATION IV. — J... Julia.
Lavage d'estomac le 21 octobre 1932,
Examen direct des crachats après homogénéisation : négatif.
Ces crachats sont envoyés d'autre part à l’Institut Pasteur au laboratoire de M. Calmette et inoculés à des cobayes par
MM. Valtiset Van Deinse.
Premier passage :
Pas de B.K., mais tuberculose ganglionnaire.
ANS |: ee
Deuxième passage :
Tuberculose typique généralisée mortelle du cobaye avec B.K. sur les viscères.
Conclusion : nous devons supposer qu’il s'est agit également dans ce cas de tuberculose paucibacillaire.
B) Inoculations du sang.
Le sang est prélevé pendant la période éruptive et febrile de l'affection. On en recueille 20 cmc. dans un tube citraté et on centrifuge immédiatement. Le culot séparé du plasma est laqué dans 10 cme. d’eau distillée. On inocule 10 cme. du produit par voie sous-cutanée. Nous avons avec cette technique inoculé le sang de 2 malades et nous avons pu déceler la présence de B. K, dans ce sanz. Il est à noter que si l'hémoculture sur milieu de Lôwenstein a été positive chez le premier, celle est restée négative chez le second.
a) OBSERVATION I. — T... Jeannine.
Sang inoculé le 27 novembre 1930 à 2 cobaves I et II. Premier passage :
Cobaye I : 5 jours après : chancre d'inoculation.
Mort 11 mois après et on trouve :
Ganglions T. B. : 2 bacilles courts très nets. Réinoculation à 2 cobayes III et IV : Résultats négatifs.
Cobaye IT : sacrifié le 3 février 1931 après 2 mois.
LRU Ganglions T. B. : très nombreux B. K.
Réinoculation le 3 février de 1 eme, de broyage de ganglions à 2 cobayes V et VI.
Deuxième passage :
Cobaye V : mort le 27 juin après 4 mois 1/2.
Résultat négatif.
Cobaye VI: sacrilié le 20 mars 1931 après 1 mois et 1/2 donne :
Trois ganglions trachéo-bronchiques : 2 B. K. nets.
Deux ganglions lombaires : 1 B. K.
Trois ganglions inguinaux : { B. K.
Troisième passage :
Réinoculation le 20 mars 1931 de .t cmc. de broyage de ganglions à 2 cobayes VIT et VIII : Résultats négatifs.
Conclusion : nous avons eu affaire à une variété de bacilles donnant une tuberculose ganglionnaire richement bacillaire au premier et au deuxième passage, mais qui n’ont jamais provoqué de tuberçulose viscérale typique du cobaye, et qui ont évolué vers la guérison spontanée, puisque nous n'avons pu L'ansmettre l'infection aux 4 cobayes du troisième passage. Il semble donc s'agir de bacilles de virulence modifiée, probablement
ultra-virus.
b) OBsERVATION V. — M... Roger.
Premier passage :
Le 22 avril 1932, inoculation à un cobaye de 4 cmc. de sang. Sacrifié le 11 mai, après 21 jours.
Hypertrophie ganglionnaire.
eg:
Rate augmentée de volume : présence d’un B. K.
Réinoculation à 2 cobayes IT et III de 2 cmc. de liquide de broyage de ganglions, plus un fragment de rate.
Deuxième passage :
Cobaye II : granulations sur rate, on ne retrouve pas de B. K.
Cobaye IT : grosse rate avec granulations, sans B. K.
Conclusion : observation discutable étant donné la rareté des bacilles rencontrés et dont il ne semble pas possible de tirer des conclusions précises. Il s’agit peut-être d’une infection à ultra-
virus.
C) Inoculation du nodule.
Nous n'avons pratiqué l’inoculation du broyage du nodule qu’une seule fois (obs. III), et nous n'avons pas obtenu de résultats concluants. Voici ce que nous avons observé chez nos cobayes après 3 passages successifs.
Le 22 décembre 1931, on inocule à 2 cobayes 1 cmc. de broyage du nodule prélevé à la malade.
Premier passage :
Cobaye I : 25 janvier, intra-dermo réaction avec :
Tüberculine 4 M00 PDO UE 0 Filtrat de produits tuberculeux.......... 0 . Le 19 février 1932, un petit ganglion.
Le 23 février, intra-dermo réactions :
Tuberculine 1710024 mme eme 0 FiHDRLe Re CR Et TOUS 0
CL9g Le 5 mars 1932, un petit ganglion.
Le {er avril 1932, un petit ganglion.
Le 27 avril 1932, ganglions inguinaux.
Le 25 mai 1932, 2 enfants morts.
Le 25 avril 1932, intra-dermo réactions :
Tubercolire 400 MCE RES E RAM 0 AU TS ASTRA DR RONN R E ERE mn M)
Autopsie : hypertrophie ganglionnaire a regressé.
Pas de bacilles sur frottis des ganglions.
Viscères normaux.
Cobaye II : sacrifié le 18 janvier 1932, 27 jours après inoculation.
Autopsie : viscères normaux.
Deux ganglions trachéo-bronchiques B. K. : 0.
Deux ganglions lombaires B. K. : 0.
Deux ganglions inguinaux B. K. : 0.
Coupes : 0.
Deutième passage :
Deux cobayes IIT et IV sont inoculés le 18 janvier 1932 avec 1 cmc. du broyage de ganglions du cobaye IT.
Cobaye III : 8 injections hebdomadaires de 1 cmc. d'extrait acétonique.
Sacrilié le 17 février 1932, après un mois on trouve une pseudo-tuberculose.
Autopsie : poumons : 0.
Péricardite hémorragique.
Un moyen ganglion trachéo-bronchique.
Un petit ganglion lombaire.
AU Foie très gros avec un énorme ahbcès.
Rate très grosse avec granulations.
Frottis :
Foie : B. K. : O.
Rate: BK :0.
Ganglions T. B. : B. K. : 0.
Ganglions lombaires : B. K. : 0.
Coupes : 0.
Pas de réinoculation.
Cobaye IV : inoculation le 18 janvier 1932 de 1 eme. du broyage des ganglions du cobaye IL.
fer février, un ganglion inguinal.
16 février, intra-dermo avec tuberculine 1/100 : + + +.
Sacrifié le 10 mars 1932 après un mois et 20 jours.
Autopsie : poumons : (0.
Foie gros avec une grosse tache blanche.
Rate un peu granuleuse.
Deux ganglions trachéo-bronchiques.
Un ganglion lombaire.
Trois petits ganglions inguinaux.
Frottis :
Rate: BK 0
Ganglions T. B. : B. K. : O.
Ganglions lombaires : B. K. : 0.
Ganglions inguinaux : B. K. : 0.
Coupes : (0.
Réinoculation à 2 cobayes V et VI.
Troisième passage :
Cobaye V : Inoculé le 10 mars 1932 avec { emc. du broyage
des ganglions du cobaye IV.
LORS Pre : Le 11 avril 1932, intra-dermo-réactions :
tub. 4100 2 RE MT AR SLA SEE 0 LU EN SE ee RAT Se I EE 0 Sacrifié après { mois : autopsie négative.
Cobaye VI : inoculé le 10 mars 1932 avec 2 eme. du broyage des ganglions du cobaye IV.
Le 11 avril 1932, intra-dermo-réactions :
LAN CR LR REX RC RENE RAILS 0 DEA RSR RER RE ET FR le)
Sacrifié le 11 septembre 1932 : autopsie négative.
D) Résultats des inoculations.
[. — Nos résultats personnels peuvent se résumer ainsi :
sur 2? inoculations de crachats, nous avons
obtenu 2 tuberculisations du cobaye dont
les modalités doivent faire incriminer une
tuberculose paucibacillaire, à bacilles de virulence normale.
sur 2 inoculations de sang, nous avons obtenu
2 tuberculisations strictement ganglion-
naires et le restant aux passages succes-
sifs, qui nous font conclure à la présence
dans le sang de ces 2 malades de bacilles
de virulence modifiée, peut-être ultra-
virus. Dans un de ces cas, l’hémoculture
par le procédé de Lôüwenstein a été posi-
tive, dans l’autre elle est restée négative.
M. Gibert A
La seule inoculation de nouure que nous ayons
pu pratiquer a été négative.
