ET DES URINES
Nous ne détaillerons pas toutes les méthodes qui-ont pu être employées: nous donnerons exactement celles qui ont été pratiquées par MM: Lereboullet, J.-J. Gournay et A. Détrois dans les examens dont nous rapportons le résultat dans cette thèse.
1° — Examen du Sang A) ETUDE DE LA CHOLÉMIE.
Deux méthodes furent employées dans tous les examens pour l'étude de la cholémie; la méthode colorimétrique de Fouchet et celle de Van Den Bergh
1° Méthode de Fouchet.
La méthode proposée par Fouchet en 1918 se pratique comme suit : le matériel comporte : le réactif de Fou-
chet dont la composition est :
Âcide’thrichloracétique. #1: eue b::6T:
RATS AU PE CR a Dr de TON oe.
Perchiorure dé fer: OfCinalr Tree ie. Li 6e.
Une échelle colorimétrique spéciale.
Un godet de porcelaine de 4 centimètres de diamètre et 1 de profondeur.
Technique : On verse une quantité égale (4 à 5 gouttes) de sérum non hémolysé et de réactif dans le godet. On. mélange avec un agitateur ét on laisse reposer une demiheure environ. La bilirubine se transforme en biliverdine et on obtient une coloration verte qu’on compare avec l'échelle colorimétrique.
Cette méthode permet d’ APPEAÈE une teneur en bili-
rubine de 1 p. 60.000.
Méthode de Hijmans Van Den Bergh.
Hijmans Van Den Bergh a étudié et mis au point un dosage colorimétrique de la cholémie basé sur la réaction diazoïque de la bilirubime. C'est un procédé très précis, qui donne les résultats les plus rigoureux dans le dosage de la bilirubine.
. Matériel :
a) Solution de diazonium à préparer de suite en mélangeant : ;
Solution [: Acide sulfanilique : 1 gr.
Acide chlorydrique à 25 % : 5 à r5 cc.
Eau: 1.600 cc.
Solution IT: Soiution aqueuse de nitrite de’soude à
TS
Mélanger au mement de l’emploi dans les proportions . suivantes ve
Solution L: 10 ce.
Solution IT : 0,3.
b) Solution colorimétrique qui peut être :
ou : Sulfate de cobalt déshydraté : 2 gr. 16.
Eau ° 100 cc. |
ou : Une solution de bilirubine pure.
On verse le liquide étalon dans une des cuves du colorimètre, puis on mélange 1 ec. de sérum à 2 ce. d'alcool à go”, il se forme un précipité qu'on centrifuge ; puis on prélève 2 cc. du liquiäe surnageañt, auquel on ajoute un
“quart de ce réactif. On verse le mélange dans l’autre cuve du colorimètre, et on attend quelques instants avant de faire la lecture. S'il se produit un trouble, on ajoute o cc. 5 d’alcool.
Le calcul de ‘ia bilirubine se fait en tenant compte des dilutions effectuées, et il suffit de multiplier par 4 le chiffre obtenu au colorimètre pour connaître le tit, en bilirubine du liquide examiné.
=. Telle est la réaction indirecte ou ralentie. Il existe en effet des cas où la réaction se fait directemnt sans adjonction d'alcool et par la seule union du réactif et du liquide examiné. On dit alors que la réaction est directé el Prompte.
Des résultats obtenus Van Den Bergh appelle « unité » la dilution étalon de 1 p. 200.006 et dit que ‘tel sérum à un taux de bilirubine à æ unités. Chez l'individu normal, le taux moyen évolue entre 0,2 et 0,6 unités, soit une
dilution de 1 p. 100.000 à r p. 406.000.