ZeitscKfûr Hyg., XXXI

Uexamea à Tétai frais des cultures très jeanes en liquides Dulritirs permet de constater que les bacilles sont doués d'usé réelle mobilité et ifH'ila 9D«t{)0iDrvus de cils en nombre variable k chaque pôle.CBienlôt œs cils s'enchevêtrent eA semblent jouer un rôle capital dans la facilité avec laquelle les éléments microbiens, dès lors immobilisés, se collent entre eua pour former des amas compacts.) L enveloppe ciro-giaisseuse les retient a^lutiaés et flottante en faciles plus eu moins épais^ secs et lidéS) k la surface du milieu de culture.

Les caractères morphologiques des bacilles tuberculeux sont asse:^ notablement influencés par la composition chimique des milieux arlificteès dans lesquels on les cultive. Ils se montrent tantôt plus grêles et oourts, tantôt pîus^is ou allongés. Des variations analogues s'obser\%nt aussi suivant que les bacilles proviennent de lésions anciennes ou récentes, de tuberculoses évolutives ou en voie de guérison, et suivant rhôte qui les héberge : c'est ainsi qœ les bacilles provenant du boeuf sont en générai phis courts et plus épais que ceux provenant de Tbommc tuberculeux. {Planche 1.)

a. — TECHNIQUE DES COLORATIOKS

La technique de la coloration du bacille tuberculeux a fait l'objet d*un grand Aoœbre de recherches.

La méthode initiale employée par Robert Kocn était la suivante : Les lamelles pctftant le produit tuberculeux (crachat ou Ccoliis d'organes) restaient immergées pendant 24 heures dans le bain colorant composé de :

Solution alcoolique concentrée de bleu de mé-

**»ylèoe I ce.

Ëiu distillée* , ioo ce.

Solution de potasse à lo p. foo o oc ao

On les lavait ensuite k leau distillée <3ton les plongeait dans une solution aqueuse concentrée de vésuvine, où elles restaient quelques minutes, jusqu'à ce qu'elles aient pris une teinte francbeoient brune. Ellesétaient de nouveau lavées à Teau, sédiées et montées dans le baume de Canada : les bacilles tuberculeux gardaient la couleur bleue et se dcUdiaieot assez nettement de la teinte uniformément brune prise par les éléments environnants.

Mais ce procédé était infidèle. Ehiu.ich * y apporta bientôt un perfectionnement important en substituant au bleu de méthylène alcalin, comme colorant des bacilles, le violet de méthyle aniline et en décolorant ensuite les préparations par l'acide azotique dilué de deux ûers d'eau. Les bacilles tuberculeux gardent alors la couleur violette etappa-

i Dealsch. med. Woch , 1883, n° 19.

MORPHOLOGIE DV BACILLE TUBERCULEUX la

laissent presque noirs, landts que les autres microbes et les celhiles prennent une teinte grise. Ehrlich * ne tarda* pas J»i-même à montrer queU fujchsine (chlocbjïdrate de ro6aniUnc)anilinée donne des résultats encore meilleurs qiiele violet de mélhyle.

Les^ mélbodea de coloration de Kogh-Ehalich ne sont pins employées aujourd'hui. On leur pvéfèrc avec raison le procédé de ZrEm.-NEELSEW *, beaucoup plus rapide et plus sûr.

Le bain colorant de ZisufL se prépare caa»me suit :

On broie dans un mortier i gr. de fuchsine rubine dans ro cent, cnbe» d'aicool absolu. On ajoute :

Acide phéni(|ue CEistallisé neigeux 5 gr

puis, par petites portions, en continuant à agiter, 60 cent, cubes (Teaa distillée. On verse dans un flacon. On rince le mortier avec ^0 cent, cubes d'eau distillée qu^on verse dans le même flacon. On laisse reposer 24 heures et on filtre. """

Les préparations de frottis ou de crachats sont immergées dans ce bain, contenu dans un tube large à recûUYrement de Borreï^ou dans tout autre récipient que Ton porte à Tétuve à 3^° pendant deux heures {Fig- 5). Ou bien, si Ton est pressé, on verse directement sur la lame quelques gouttes de colorant et on chauffe SATT (a veineuse d'an bec Bunsen ou audessus de la ftamnve d'ime lampe à alcool jusqu'à ce que h liqwde émettedes vapeurs, et ce. pendant au moins trofs minutes.

Çr^suile on lave un instant à l'eau froide pour enlever l'excès de couleur et on verse pjg 5 Cuveties à colorasur la lame une dilution d'acide azotique tion des lames porte objets, (i partie d'acide pour 3 parties d'eau distillée) ou une dilution au cinquième d'acide sulfuriqne, ou bien une dikitfoo d'acide acétique au tiers dans Fafcool à 96®. On larsse en contact pendant 20 secondes ; on lave à l'alcool à 60® jusqu'à ce que la préparation soit bien décolorée. On la passe à l'eau.

On recolore avec une solution aqueuse de bleu de méthylène, ou mieux pendant 3o secondes avec le blea de Kuhne :

Bleu de méthylène. .......... i gr. 5

Alcool absolu 10 gr.

Solution phéni(^uée à 5 p. 100 100 gr.

On lave fiuafement à grande eau sous le robraet pendant 2-3 secondes ;